1、实验项目 血糖的测定( 72-1)3学时 【 临床意义 】正常成人空腹静脉血糖含量为3.89 6.11mmol/L。空腹血糖高于 6.11 mmol/L称为临界高血糖,高于 7.5 mmol/L称为高血糖,高于 8.89 10.0mmol/L出现糖尿现象。空腹血糖低于 3.0mmol/L称为低血糖。【 实验目的 】掌握血糖测定的原理、操作方法和临床意义。 【 实验原理】( 1) 葡萄糖 +H2O + O2 葡萄糖氧化酶 葡萄糖酸 + H2O2 ( 2) H2O2 + 氨基安替比林 + 酚 过氧化物酶 红色醌类化合物 + H2O ( 3)用 72-1型分光光度计测出红色化合物的吸光度,再用公式求
2、出 葡萄糖含量。 【 实验器材 】试管、水浴箱、洗耳球、五档微量移液器、 刻度吸量管 ( 5ml)、 72-1型分光光度计 。【 实验器材 】五档微量移液器 使用方法:1.将 吸嘴套在移液器头上 轻轻转动,以保证密封。2.使用前应先将移液器 吸液和排液几次 , 润洗吸嘴 和保持 腔内外气压一致。3.选择量程 。4.垂直地握住移液器,将按钮按到第一停止点,然后把 吸嘴浸入到 液 面下 2 3mm,再缓慢放松按钮,使之复位,等待 1 2秒后,从液体中取出,并避免碰撞任何物体。5.将吸液嘴移至加样容器壁上,缓慢地把按钮按到第一停止点,等待 1 2秒,再把按钮全部按下去, 排 尽 液 体后,吸液嘴应沿
3、容器壁上滑动取出,再放松按钮,使之复位,即完成。6.最后, 打掉用过的吸液嘴,调回最大量程 ,仪器放置好保存。【 实验器材 】72-1型分光光度计 工作原理物质对光的吸收具有选择性,不同的物质都有各自的吸收波长。在一定波长下,某物质的溶液对光的吸收强弱( 吸光度 A)与 溶液的浓度 C和 液层的厚度 L的乘积成正比,即遵循朗伯 -比尔定律: A=KCL(K为吸收系数,对同一物质来说为一常数 )使用方法:1.检查 :指针位于 “0”。 2.打开电源,打开比色皿暗箱盖, 预热 20分钟。3.加样: 夹毛面,擦干 。 4.放置好比色皿 ,选择波长、调灵敏度。5.反复 调 0、调 100至稳定 。 6
4、.合盖, 读数,记录,取样,清洗,关闭仪器 。( 1)血清( 2) G标准液: 5.55 mmol/L( 3)酶试剂 ( 4) 酚试剂 【 实验试剂 】【 实验内容和操作过程 】 1. 加样 【 取 2支干净试管,分别 标明 测定(T)、标准( S) 】 ,然后按表加入试剂:加入物 测定管 T 标准管 S 血清 ( ml) 10 G标准应用液 ( ml) 10酶试剂 ( ml) 0.75 0.75酚试剂 ( ml) 0.75 0.752.将样品混匀后,置于 37 水浴箱中水浴 15min。3.用分光光度计在波长 505nm(光径 1cm), 以空白管调零 O100 ,分别读取其余两管吸光度值,即记录测定管 T、 标准管 S的吸光度值( AT、 AS ) 。