1、疟原虫的镜检技术 采血时间 现症病人和流调普查时可不考虑取血时机。但在诊断或需要某期疟原虫作标本时，则应掌握适宜的取血时机。 疟疾典型的临床表现分前驱期、发冷（寒战）期、发热期、出汗期和间歇期五期。 间日疟在前驱期相当于肝内期疟原虫发育，因原虫密度太低，镜检多为阴性。发冷（寒战）期相当于红内期成熟裂殖体涨破红细胞期，镜检多为裂殖体和环状体。 发热期， 外周血中以 环状体（小滋养体）为主， 也可见到裂殖体； 出汗期因原虫密度太低，镜检多为阴性。发作后数小时（ h）， 间歇期外周血中以 大滋养体 为主，形态较易辩认，为诊断的有利时机 ；发作 36-48h，可检出裂殖体；发作 1-2次后， 配子体
2、出现较多。 恶性疟较理想的取血时间是在发作后至 20h内取血 ，初发患者退热后常查不到原虫。末梢血 血检到恶性疟原虫配子体，是在末梢血出现环状体之后的 10天左右。血膜的制作 （涂片操作）血膜的制作 （取血操作）在采集标本、制作血片前，首先要核对患者的姓名、年龄和住址。 采血部位和方法： 采血部位一般人为耳垂，指头；一人一针，常规消毒、采血。 取血部位和血量采血部位 和 取血方法 ： 耳垂或无名指（婴幼儿母趾或足跟）， 通常在耳垂取血 ， 先用 75%酒精棉球消毒取血部位 ， 待酒精干后，用左手拇指和食指紧捏耳垂上方 或无名指指尖，右手持消毒针迅速刺入皮肤， 不宜过深或过浅。然后用右手中指轻轻
3、挤压出血。 厚血膜血量约一粒大米（即火柴头）大小。采血详细部位、取血方法有小技巧。血膜的制作用于检查疟原虫的血涂片有两种：一种是将血液涂呈薄膜状，称 薄血膜；一种是血液涂成圆盘，称 厚血膜 。无特殊要求的可厚薄血膜分载玻片涂制。发热病人血片 标本片血膜的制作 （涂片操作） 涂制厚、薄血膜的位置 通常将厚、薄血膜涂在一张载玻片上。方法是将载片分为 6等分，第 1、 2格备贴标签及编号用；厚血膜涂在第 3格中央，薄血膜涂在第 4格前缘至 第 6格中部。作为标本的血片每张玻片涂厚、薄血膜各 1个； 门诊和发热病人血片每片 1人， 涂 2个厚血膜 1个薄血膜，以防血膜脱落而影响检查；标本片发热病人血片
4、标签薄血膜的制作 薄血膜 用推片一端边缘的中点从取血部分 取约1 1.5微升的血量（相当于 1/4火柴头大小）， 使血滴与平置的载玻片接触， 并形成 25 350夹角 ，待血液向两侧扩展约 2cm 2.5cm宽时 ，均匀而迅速地从右向左推成舌状薄血膜（约 2.5cm长）。推制时速度要均匀，血滴大小、推片与载玻片之间夹角大小及展开血膜的速度快慢等常影响血膜的厚薄。制成的薄血膜应在玻片上形成平铺的血细胞，细胞之间互相接触而不相互重叠。 薄血膜外观：舌状厚薄均匀，无划痕， 位于玻片 1/2 1/3处【 左半部分（或第 46 份） 】 。熟练工作者的推片姿势厚血膜的制作 厚血膜 用推片的左下角，从取血部位刮取 约 4 5微升血量（相当于火柴头大小）， 使血滴与平置的载玻片接触，再由里向外一个方向旋转，转 2 4圈，涂成 直径 0.8 1cm大小圆形厚血膜 (厚血膜的厚度以一个油镜视野内可见到 5 10个白细胞为宜 )， 厚血膜的位置，位于玻片右 1/3处 中央偏右（或 6等份中的与贴标签的 1、 2份相邻的第 3份中部） 。 厚血膜外观：圆形厚薄均匀，无划痕。过厚易于脱落，过薄达不到检出率的要求，以油镜视野 5-10个 WBC为宜。标准的疟疾厚薄血膜位置
