1、大肠菌群计数大肠菌群的定义n 指一群在 36 条件下培养 48h能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。n 该菌群主要来源于人畜粪便 , 作为粪便污染指标评价食品的卫生状况 , 推断食品中肠道致病菌污染的可能。n 大肠菌群不是细菌学上分类命名,而是一组与粪便污染有关的细菌。这群细菌包括:大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌。n 生化特征及血清学反应并非完全一致。n 分布: 广泛分布于自然环境。 来源于人和温血动物的粪便。n 卫生学意义 大肠菌群作为粪便污染的指标菌评价样品中是否受到粪便的污染。 大肠菌群计数的高低,直接反映了样品受粪便污染的程度。 表示对人体健
2、康是否具有潜在的危险性。n 大肠菌群是理想的粪便污染的指标菌是人类和温血动物肠道菌群,在数量上占优势。随粪便排出体外后,在外界环境影响下,其存活时间应与肠道致病菌大致相似或稍长。检验方法简便,易于检出与计数。对消毒剂的抵抗力应不低于肠道致病菌。主要修改内容n 将原标准拆分为 大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌计数三个独立的标准方法,标准名称变化。n 大肠菌群的 MPN法中乳糖胆盐等培养基改为月桂基硫酸盐胰蛋白眎 (LST)肉汤为主的培养基;n 增加了对样品匀液的 pH范围要求;n 增加了大肠菌群的平板计数法和纸片检测法;n MPN法的结果报告由原 “每 100g( mL) 大肠菌群的 MPN值 ”
3、,修改为 “每 1 g( mL) 大肠菌群的 MPN值 ”;大肠菌群计数n 第一法: MPN法n 第二法:平板计数法n 第三法: Petrifilm测试片法第一法 大肠菌群检验 MPN法原标准乳糖胆盐发酵管EMB琼脂乳糖发酵管培养基改变情况新标准新标准第一法:第一法:月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST)煌绿乳糖胆盐肉汤(煌绿乳糖胆盐肉汤( BGLB)第二法:第二法:结晶紫中性红胆盐琼脂结晶紫中性红胆盐琼脂 (VRBA)煌绿乳糖胆盐肉汤(煌绿乳糖胆盐肉汤( BGLB)操作步骤的改变原标准原标准初发酵初发酵EMB分离培养分离培养染色,复发酵染色,复发酵报报 告告现标准现标准LST初发酵初发酵BGLB验证验证报报 告告大肠菌群检验程图 (新国标 MPN法 )检样检样稀释稀释月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤( LST) 36 , 24482h 不产气不产气 产气产气煌绿乳糖胆盐肉汤(煌绿乳糖胆盐肉汤( BGLB) 36 , 24482h 不产气不产气 产气产气大肠菌群阴性大肠菌群阴性 大肠菌群阳性大肠菌群阳性报告报告