1、Innovation the HP Way,安捷伦液相色谱维护知识,Page 2,第二部分：液相色谱的维护,在线脱气机 (G1322A/G1379A)四元二元/单元泵 (G1311A/G1312A/G1310A)自动进样器 G1313A)二极管阵列检测器(G1315B)变波长紫外检测器(G1314A)柱温箱(G1316A),Page 3,Agilent 1100、1200系列HPLC,Page 4,在线脱气机 (G1322A/G1379A),Page 5,工作原理,在线脱气机 (G1322A/G1379A),Page 6,何时需要使用在线脱气机,在线脱气机 (G1322A/G1379A),Pa
2、ge 7,标准脱气机（G1322A). 标准脱气机每个通道体积为12ml，建议排液操作：5ml/min 排液6min以上。微脱气机（G1379A).微脱每个通道体积为1ml，建议排液操作：2ml/min 排液5min。切勿用5ml/min 流速去排液。,在线脱气机 (G1322A/G1379A),Page 8,使用Agilent 1100 在线脱气机须知,溶剂棕色玻璃瓶会避免藻类的生长。经常过滤溶剂以免其中微粒永久性阻塞毛细管。避免使用下述可腐蚀钢铁的 溶剂：碱金属卤化物及其酸溶液(如：碘化锂、氯化钾等)。高浓度无机酸，如硝酸、硫酸.可能含有过氧化物的色谱纯醚(如THF、二氧六环、二丙基乙醚)
3、。这些在 使用前必须用干燥氧化铝过滤除去过氧化物。含强络合剂的溶液(如EDTA，乙二胺四乙酸)。四氯化碳与2-异丙醇或四氢呋喃的混合液。,在线脱气机 (G1322A/G1379A),Page 9,防止堵塞溶剂过滤器污染的溶剂或溶剂瓶里的藻类生长将会缩短溶剂过滤器的使用寿命，并且影 响泵的运行。这在水溶剂或磷酸盐缓冲液 (pH4 至 7) 中尤其如此。下 列建议将会延长溶剂过滤器的使用寿命并维持泵的运行。 使用灭过菌的溶剂瓶来减缓藻类生长。使用新鲜配制的流动相，特别是水溶剂或盐缓冲液 建议不超过两天。如果应用许可，在溶剂中加人0.00010.001M的叠氮化钠。避免溶剂瓶暴露在直射阳光下。用氩气
4、置换流动相上层的空气。,在线脱气机 (G1322A/G1379A),Page 10,检查溶剂过滤器拧开脱气机出口或比例阀入口管线，并使液面高于出口30cm此时溶剂会因为重力流出，脱气机或溶剂过滤头堵塞时，溶剂会流出不畅或不流出。查看过滤器是否变色临时取下过滤器，检查柱前压力是否正常清洁溶剂过滤器将堵塞的溶剂过滤器从瓶头组件中拿下。先用水冲洗残留之溶剂然后将过滤器放在装有浓硝酸 （35）的烧杯里浸一小时。用二次蒸馏水彻底冲洗过滤器。建议不使用超声波清洗机清洗。将过滤器重新装好。建议定期清洗溶剂过滤器及溶剂瓶，每三个月至少清洗一次。注意：不要使用没有安装溶剂过滤器的系统可能会严重堵塞系统,在线脱气
5、机 (G1322A/G1379A),Page 11,Question?1.如何简单判断脱气机脱气是否正常？2.如何简单判断脱气机腔体或溶剂过滤头是否堵塞？,在线脱气机 (G1322A/G1379A),Page 12,Question?1.如何简单判断脱气机脱气是否正常？ 打开Purge阀，设定泵的流速2ml/min，提起当前所使用溶剂瓶内的溶剂过滤头，使之脱离液面一小段时间，此时溶剂传送管内会产生一小段气泡，放下过滤头，让此段气泡通过脱气机，如果脱气机正常，气泡应消失或缩小。2.如何简单判断脱气机腔体或溶剂过滤头是否堵塞？ 关闭泵，拧开脱气机出口或比例阀入口管线,此时溶剂会因为重力流出，脱气机
6、或溶剂过滤头堵塞时，溶剂会流出不畅或不流出。,在线脱气机 (G1322A/G1379A),Page 13,四元泵 (G1311A),Page 14,Agilent 1100 四元泵工作原理,四元泵 (G1311A),Page 15,Agilent 1100 泵头(Pump Head)结构图,四元泵 (G1311A),Page 16,四元泵 (G1311A),泵头结构,Page 17,四元泵 (G1311A),Page 18,四元泵 (G1311A),Page 19,Agilent 1100系列密封垫冲洗Seal Wash ( 可选),当流动相中盐浓度0.01M时，可以减小密封垫的磨损。对于Ag
7、ilent 1100/1200系列泵为可选件。用10%异丙醇水溶液冲洗,四元泵 (G1311A),Page 20,四元泵 (G1311A),带seal wash的泵头,Page 21,如何更换溶剂出口过滤芯,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,Page 22,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,严重污染的溶剂出口过滤芯,Page 23,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,如何更换活塞杆密封圈,Page 24,泵使用须知,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,Page 25,多通道梯度阀（MCGV）操作要点 当盐溶液和有机溶剂混合时，盐溶液可能与有机溶剂完全混溶，而不会出现
8、 沉淀。但是在梯度阀的混合点，但是在梯度阀的混合点，重力作用使盐颗粒 沉淀下来。通常，阀的A通道用于水相/盐溶液，而泵的B通道用于有机溶 剂。如果使用的是这样的配置，盐将落回到盐溶液中，并被溶解。当泵使用 的不同配置（例如，D-盐溶液，A-有机溶剂）时，盐可能会落到有机溶剂 中，从而出现问题。 四元泵中使用盐溶液和有机溶剂时，建议将盐溶液接到下面的 口上，有机溶剂接到上面的梯度阀口上。有机溶剂通道最好直接在盐溶液通 道的上面。建议定期用水冲洗所有MCGV通道，以去除在阀口上可能出现的盐 沉淀。,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,Page 26,更好地使用四元泵将装有溶剂瓶的溶剂箱放在泵
9、上面(或较高处)。当在四元泵上使用盐溶液或有机溶剂时，建议将盐溶液接 在底部得梯度阀口上，将有机溶剂接在上面得梯度阀口上。有机通道最好 在盐溶液通道得上面。建议用水定期冲洗所有MCGV通道除去可能在 阀口析出得盐结晶。操作泵之前，用至少两个体积（标准脱气机30ml，对微脱气机10ml）冲洗 真空脱气机,特别是当 泵关闭了一段时间后（例如，过夜），以及在通道中使用挥发性混合溶剂 时。防止溶剂过滤器堵塞及长菌 ，当虑器表面有黑色或黄色污染层说明虑器发生了堵塞，请立即清洗或更换之。定期检查排液阀的虑芯。检查方法：拧开排液阀，以水作流动相，流速5ml/min，若压力大于10bar,则须立即更换。,Ag
10、ilent 四元二元/单元泵日常维护,Page 27,更好地使用泵当使用低流速时（不高于0.2ml/min）检查所有1/16英寸接头有无渗漏（用压力测试或漏液测试）。每当更换泵密封垫时 排液阀虑芯也应更换。更换活塞密封垫时检查活塞杆上是否有划痕。有划痕的活塞将导致轻度渗漏，并 降低密封垫的使用寿命。应尽早更换有划痕的活塞。使用缓冲溶液时，关泵前先用水冲洗系统。当需要长时间使 用0.1摩尔或更高浓度得缓冲液时，最好选用密封垫清洗附件，以减少对密封垫及活塞杆的磨损。更换活塞密封垫后应按照密封垫安装步骤对其进行磨合，但磨合不适用于 正相密封垫。,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,Page 2
11、8,当泵头安装有冲洗附件时，由于该附件中也有密封垫，这样就会增加活塞杆运动时的阻力。所以开泵前一定要用10异丙醇，并将其流速调至约20滴/分钟使这溶液流过冲洗装置。 10异丙醇有助于降低水的表面张力，并有抑菌作用。不要用其它溶剂代替。 当泵头安装有冲洗附件而不开启10异丙醇，会使密封垫及活塞杆的寿命减短。,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,Page 29,密封垫磨合操作：1.以异丙醇作为溶剂并将其管道直接连接到主动阀(四元泵需一接头，部件号01001847）。2.连接阻尼管（部件号50222159）于排液阀的出口，阻尼管的另一端置于废液瓶中。3.打开排液阀，并用异丙醇以2ml/min的
12、流速冲洗系统10分钟。4.关闭排液阀，设置流速使压力达到350bar，并使系统在此压力下保持15分钟。5.关闭泵，缓慢打开排液阀释放压力，重新连接管路，然后冲洗系统中的异丙醇。注意，只有反相密封垫（50636589）才需此操作而正相密封垫（09051420）因其最高只耐受200bar,所以此操作会损害它。,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,Page 30,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,1.更换排液阀虑芯2.清洗,更换3.清洗球形单向阀4.更换密封垫，活塞杆,Page 31,Question?1.如何简单判断比例阀是否内漏？2.何时应该更换Purge阀内的过滤白头？3.泵压力
13、不正常可能由那些原因引起？,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,Page 32,Question?1.如何简单判断比例阀是否内漏？ 设定泵使用一个单独通路（A），打开Purge阀，流速5ml/min，提起其他溶剂瓶内的溶剂过滤头直至离开液面，观察这些通路（B、C、D）内的溶剂是否随着流动，正常时均不应流动。2.何时应该更换Purge阀内的过滤白头？ 使用纯水作流动相，打开Purge阀，流速5ml/min，观察系统压力，如果超过10bar，应该更换。3.泵压力不正常可能由那些原因引起？ 气泡，主动阀故障，出口阀故障，密封垫或柱塞杆磨损，渗漏或堵塞，比例阀故障，传感器故障，使用比例阀混合时盐
14、浓度太高,Agilent 四元二元/单元泵日常维护,Page 33,自动进样器(G1313A),自动进样器(G1313A),自动进样器原理,Page 35,自动进样器(G1313A),自动进样器原理,Page 36,自动进样器(G1313A),Page 37,自动进样器(G1313A),Page 38,自动进样器(G1313A),Page 39,自动进样器(G1313A),Page 40,使用自动洗针功能自动洗针功能可以把程序设置为“带有洗针的进样”,或将自动洗针功能包 含在进样器程序中。当使用自动洗针功能时，进样针在取样后会转移到洗针 步骤。造成携留效应的主要原因是残留在进样针外的少量样品。
15、通过进样后 的洗针功能可以立即洗去针外表面上残留的样品。当进样阀转回到主流路 时，定量管和针内所有的样品都被冲洗到色谱柱中。这种结合洗针和冲洗管 路的设计可以把携留效应减低到最小的程度。去掉洗涤瓶盖为了获得最佳的分析结果，装有溶剂的洗涤瓶是不加盖的，而且洗涤瓶中的 溶剂对样品组分有较好的溶解作用。如果洗涤瓶有盖将会有少量样品留在密 封垫上，这样会把残留的样品带到下一个样品中。带有洗针的进样程序,自动进样器(G1313A),Page 41,自动进样器(G1313A),Page 42,提高进样量的精度进样体积小于2L当进样阀切换到BYPASS（旁路）位置时，在定量管内的流动相压力降低。当 进样针抽
16、取样品时，流动相进一步降低压力。如果流动相没有充分脱气，在 进样时定量管内就会产生小气泡。在进样体积小于2L时这些小气泡就会 影响到进样体积的精密度。为了使进样体积小于2L时有最佳的进样精密 度，建议使用Agilent1100系列真空脱气机，确保流动相充分脱气。也可以 在进样间隙自动洗针，从而进一步提高进样体 积的精密度。,自动进样器(G1313A),Page 43,提高进样量精度抽样速度对粘稠的样品，计量部件从样品瓶抽取样品的速度会影响取样体积的精密 度。如取样速度太快，在样品塞中会带有气泡，从而影响进样体积。抽样速 度的默认值是200L/min (范围：10-1000L/min)，这一速度
17、适合于大 多数样品的取样要求。但是对于粘稠的样品要得到最佳的结果，设定的抽样 速度要低于200L/min。进样器程序中的“DRAW”命令行也用于抽样速度 的设定，这是为自动进样器设置的。推样速度默认的推样速度为200L/min (范围：10-1000L/min)，当进行大体积 进样时，就要设定为较大的推样速度，加快进样周期。这就是缩短计量器具 从进样周期开始（当注射器活塞回到起始位置时）到推出溶剂所需的时间。进样器程序中的“EJECT”命令行也用于推样速度的设定，这是为自动进样器设置的。较快的推样速度可以加快进样器程序所需的时间。对于粘稠的样 品要避免使用过快的推样速度。,自动进样器(G131
18、3A),Page 44,转子密封垫的选择VespelTM密封垫标准的密封垫是由Vespel密封材料制成的。Vespel适用于pH范围为2.3 9.5的流动相。 Vespel适合于大多数的应用领域， 但是当pH低于2.3或高 于9.5时，Vespel密封垫会很快地损坏，缩短其使用寿命。TefzelTM密封垫在流动相的pH低于2.3或高于9.5时，或者在会很快降低Vespel密封垫的 使用寿命的情况下，可以使用由Tefzel制成的密封垫。Tefzel是较Vespel更耐极端pH范围的材料，但是 Tefzel较为柔软。通常Tefzel密封垫的理论使用寿命小于Vespel密封垫。 但对于pH很低或很高
19、的流动相，Tefzel密封垫的使用寿命会更长一些。,自动进样器(G1313A),Page 45,自动进样器(G1313A),1 定期检查各传动杆是否足够润滑，必要时先用酒精棉球擦拭干净后再给这些杆涂抹少量液体润滑油，脏的传动杆使阻力增大从而造成自动进样器在取样过程中由于马达过热导致出错。检查取样爪子的绿色胶套时否损坏，如果是请更换之，否则会使样品放置位置不正确而导致如针，针座等损坏。用酒精棉签擦拭针座防止灰尘污染堵塞针与针座。若场地确实灰尘较多，建议购买自动进样器门，棕色门还可以帮助防止见光敏感的样品。,Page 46,漏液 针座磨损 转子磨损 进样量不准 转子磨损 计量泵故障 抽样速度太快机
20、械臂移动故障-抓不准样品瓶 传感器故障 周围环境差 样品瓶不标准,自动进样器(G1313A),Page 47,Question?1.样品量太少（某些离心处理的样品），无法过滤，为了尽量避免堵塞，可以采取什么措施？,自动进样器(G1313A),Page 48,Question?1.样品量太少（某些离心处理的样品），无法过滤，为了尽量避免堵塞，可以采取什么措施？ 在自动进样器设置中，适当抬高进样针抽样时的位置。,自动进样器(G1313A),Page 49,自动进样器(G1313A),Question?2.怎样判断自动进样器的转子垫圈磨损？,Page 50,自动进样器(G1313A),Questio
21、n?2.怎样判断自动进样器的转子垫圈磨损？ 将第四号管（排液的细塑料管）提起，正常情况下应没有液体滴出，如有则转子垫圈已磨损。 色谱现象：压力不稳，保留时间面积重复性差，残留严重。,Page 51,更换转子密封圈更换针及针座,自动进样器(G1313A),Page 52,手动进样器（G1328A,G1328B),Page 53,手动进样器（G1328A,G1328B),Page 54,手动进样器（G1328A,G1328B),Page 55,为了防止虹吸应注意使第五第六号放空管的出口与进样口保持在同一平面,手动进样器（G1328A,G1328B),Page 56,为了更好的重现性，进样体积最好是
22、样品环的56倍。2手动进样器预装Vespel转子垫圈，请参考自动进样章节选择转子垫圈。一定要使用合规格的进样器，规格为外径0.028英寸，长2英寸的平头针。一定不能使用尖针！它会严重刮坏转子垫圈。,手动进样器（G1328A,G1328B),Page 57,进完样后一定要及时冲洗进样器，特别是用盐或缓冲液作流动相。由于这些溶液会形成结晶从而磨损垫圈。冲洗方法： A. 将进样器转至Inject位置，利用液相泵输送高纯水冲洗(这时是冲洗样品环及沟槽）. B.用阀清洗接头和注射器冲洗。,手动进样器（G1328A,G1328B),Page 58,当用注射器及接头清洗时，应注意不要太靠近进样器并戴防护眼镜
23、，防止溶剂溅入眼睛。经常用湿润的软布清洁进样器，特别是进样口周围。请仔细阅读进样器说明书，上面有详细使用及其它信息。,手动进样器（G1328A,G1328B),Page 59,Question如何判断手动进样器的密封圈漏？,手动进样器（G1328A,G1328B),Page 60,Question.如何判断手动进样器的密封圈漏？通常结合两方面：从进样器观察，进样后将针拔出，若从进样口或排空管有液体冒出，显示密封圈磨损。从结果看：通常有压力不稳定，峰面积或保留时间不稳定和残留严重。,手动进样器（G1328A,G1328B),Page 61,更换转子密封圈。,手动进样器（G1328A,G1328B
24、),Page 62,柱温箱(G1316A),Page 63,柱温箱(G1316A),连接的管路尽量短，防止热扩散及峰增宽。如果使用小体积分析柱以及流速小于0.2ml/min时建议使用左边的柱温箱(左边体积较少, 3ul).除非特殊应用，建议将两边温度设置一样。并确保关好前盖。,Page 64,柱温箱(G1316A),Question如果加热块堵塞怎么办？,Page 65,Question.如果加热块堵塞怎么办？用一管连接泵与加热块出口，开泵进行反冲。,柱温箱(G1316A),Page 66,紫外检测器(G1315B),Page 67,紫外检测器(G1315B),Page 68,可变的光进口狭缝
25、系统这一微型狭缝系统是利用硅的机械性能和总体布局微型加工技术以及精确的 制作功能加工而成，它把所需的光学性能狭缝和光栅集中组合到一起， 成为一个简单、紧凑的元件。狭缝宽度直接由仪器上的微处理器来控制，并 可用为设定分析方法的一个实验参数。光栅用一个凹面全息光栅来实现分光和光谱成像， 光栅把入射光束全部分散成组 成它的波长，然后把它反射到二极管阵列上。 二极管阵列二极管阵列由1024个光电二极管和一个位于陶瓷基座上的电路组成，在 190- 950nm范围内取样间隔9.5的流动相，以防腐蚀流通池石英窗，避免使用可能析晶的流动相，防止流通池堵塞VWD 40bar DAD 120bar MWD 120
26、bar FLD 20bar RID 5barRID、FLD永远是最后一个检测器注意不同厂家接头问题，防止渗漏或毁坏色谱柱和接头,日常维护总结,Page 105,HPLC常用的色谱柱接头,0.090 in.,0.130 in.,0.090 in.,0.170 in.,Swagelok,Waters,Parker,Rheodyne,Valco,Uptight,0.090 in.,0.080 in.,Troubleshooting LC Fittings, Part II.,J. W. Dolan and P. Upchurch.,LC/GC Magazine 6:788 (1988),日常维护总结
27、,Page 106,毛细管的区分,日常维护总结,颜色 内径红色 0.12mm绿色 0.17mm蓝色 0.25mm,Page 107,日常维护总结,Page 108,EMF早期维护预警,维护信息预报(EMF)在维修时要更换磨损和受力的元件。在理想的情况下，零部件更换频率由仪器的使用强度和分析条件所决定，而不决定于预先设定的时间间隔。 维护信息预报（EMF）的特点是可以监控仪器中特殊元件的使用，并且在超 过预先设定的时间后立即把信息反馈给用户，在用户界面上可以看到提示的 信息，提醒用户按计划进行维修。,日常维护总结,Page 109,1100 /1200指示灯的意义.电源指示灯：位于每个模块的左下方。把电源打开后，该灯会亮绿 色。如果把电源打开后，此灯不亮，请检查是否有电源输入。在确认有电源的情况下，请与安捷伦联系。,日常维护总结,Page 110,状态指示灯：位于各自模块的右上方。状态指示灯的颜色：呈黄色：该仪器在未准备好状态(Not-ready)或正在自检。呈绿色：该仪器正在运行，采集数据(Run)。无颜色：该仪器已准备好等待运行(Pre-run)。呈红色：该仪器检测到有故障发生，仪器在错误状态(Error).,
