1、实验室安全培训,罗皓,一、实验室生物安全培训二、实验室危化品培训三、实验室消防安全培训,实验室安全培训,一、实验室生物安全管理,（一）实验室生物安全危害（二）实验室生物安全防护（三）医疗废物管理,（一）实验室生物安全危害,实验室生物危害：指在微生物和生物医学实验室研究过程中对人、环境、生态和社会造成的危害和对环境造成的污染。实验室生物安全概念：避免危险生物因子造成实验室人员暴露，向实验室外扩散并导致危害的综合措施。,1 实验室获得性感染的病原体分布,大多数实验室获得性感染由 细菌 43% 病毒 27% 立克次体 15% 真菌 9% 衣原体 3.3% 寄生虫 2.9%,实验室职业暴露感染的途径,
2、实验室职业暴露可发生在实验室工作或逗留的任何时间呼吸道吸入经口摄入针刺或锐器刺伤接种皮肤、粘膜污染,呼吸道传播,呼吸道传播的微生物主要存在于气溶胶中并可引起人类感染，举例：结核分枝杆菌、炭疽杆菌、SARS冠状病毒等气溶胶（aerosol)是指固体或液体微粒稳定地悬浮于气体介质中形成的胶溶状态分散体系，大小不一，其粒径一般为0.001-10m (0.001-100m ),消化道摄入传播,经消化道摄入传播的微生物主要存在于粪便、食物等中，可引起人类消化道感染，举例：志贺菌属细菌、沙门菌属细菌、葡萄球菌属细菌经消化道摄入传播的胃肠道感染可发生在 无意识的手-口途径污染，传染性液体喷溅入口，在实验室进
3、食、饮水，口吸移液管等,经血液传播,经血传播的微生物是存在于血液中并可引起人类疾病的生物病原体，举例：HBV 、HCV 、HIV、疟原虫、梅毒螺旋体等被经血传播的病原体感染的患者血液、或有可见的血污染的体液；以及精液、阴道分泌物、 关节液、内脏器官周围液体等可传播血传病原体经血传播而致的感染主要发生在 针刺意外时 锐器刺伤时 蚊虫、动物叮咬时 破损的皮肤或粘膜污染时,2医务人员职业暴露预防及处理,2.1医务人员职业暴露的定义及分类2.2医务人员职业暴露的因素2.3医务人员职业暴露的预防2.4医务人员职业暴露的处理,2.1医务人员职业暴露的定义及分类,医务人员职业暴露是指医务人员在从事临床诊疗、
4、护理及科学实验等职业活动过程中被物理、化学或生物等有害因素影响，直接或间接地对人体健康造成损害甚至危及生命的情况。,医院感染性职业暴露是指医务人员在从事诊疗、护理活动时意外地被患者的血液等体内物质污染，或被患者血液等体内物质污染的针头、手术刀等锐利器械刺破自己的皮肤，而有可能导致感染性疾病发生的一类职业暴露。,感染性职业暴露的评估,分型 : 轻度类型暴露：经检验，暴露源为艾滋病病毒阳 性，但滴度低、艾滋病病毒感染者 无临床症状. 重度类型暴露：经检验，暴露源为艾滋病病毒阳 性，但滴度高、艾滋病病毒感染者 有临床症状. 暴露源不明型暴露：不能确定暴露源者.,1、暴露源为体液、血液或者含有体液、血
5、液的医 疗器械、物品； 2、暴露类型为暴露源沾染了有损伤的皮肤或者粘 膜，暴露量小且暴露时间较短。 1、暴露源为体液、血液或者含有体液、血液的医 疗器械、物品； 2、暴露类型为暴露源沾染了有损伤的皮肤或者粘 膜，暴露量大且暴露时间较长；或者暴露类型 为暴露源刺伤或者割伤皮肤，但损伤程度较 轻，为表皮擦伤或者针刺伤。 1、暴露源为体液、血液或者含有体液、血液的医 疗器械、物品； 2、暴露类型为暴露源刺伤或者割伤皮肤，但损伤 程度较重，为深部伤口或者割伤物有明显可见 的血液。,一级暴露,二级暴露,三级暴露,分级,2.2医务人员职业暴露的因素,（A）防护意识淡薄（B）针、刀刺伤与割伤（C）皮肤粘膜暴
6、露（D）空气污染 （E）其它相关因素,医务人员对使用后锐器放置不当,接触患者血液等体液不戴手套,手术中对于易发生血液喷溅情况未作有效防护措施,处理使用过的注射器及针头时违反操作规程。这些都是医务人员对职业暴露的防护意识欠缺所至。种种资料表明，医务人员职业暴露中锐器损伤居首位,是医务人员职业暴露最常见的途径,其次是意外直接接触血液。,医务人员在医疗护理工作中，如果没有采取正确有效的防护措施，有被经血液、体液、呕吐物、排泄物传播疾病感染的风险。患者的血液、体液、呕吐物、排泄物有可能污染医务人员的手、眼、鼻、口。当医务人员的手部皮肤有破损时，接触具有传染性血液、体液、呕吐物、排泄物就有被感染的可能；
7、当带病原体的血液、体液、呕吐物、排泄物溅到医务人员的口腔粘膜、鼻粘膜、眼粘膜均有可能造成感染。,2.3医务人员职业暴露的预防,（A）加强医护人员职业暴露防护知识的教 育，强化自我防护意识，增强职业暴 露防护的自律性；（B）严格执行各种操作规程及标准，贯彻 标准预防原则，加强自我防护；（C）医院加强职业暴露预防资金的投入， 提供有力的职业安全保障，为医务人 员提供安全的工作环境。,标准预防,标准预防的概念：认定病人的血液、体液、分泌物、排泄物均具有传染性，须进行隔离，不论是否有明显的血迹污染或是否接触非完整的皮肤与粘膜，必须采取防护措施。标准预防既强调防止疾病从医务人员传至病人，也强调疾病从病人
8、传至医务人员和病人传至医务人员再传至病人。因此，标准预防既保护病人又保护医务人员，故又称为所谓的双向防护。,标准预防的措施,洗手：接触每个病人前后，每次操作前后都要洗手接触血液、体液、排泄物、分泌物后可能污染时，脱手套后，要洗手或使用快速手消毒剂洗手。 戴手套：当接触血液、体液、排泄物、分泌物及破损的皮肤黏膜时应戴手套 ；医务人员皮肤发生破损，在进行有可能接触病人血液、体液的诊疗、护理操作时必须戴双层手套；在两个病人之间一定要更换手套；手套不能代替洗手。口罩、面罩、护目镜和隔离衣 ：有可能发生血液、体液飞溅污染时，医务人员应当戴具有防渗透性能的口罩、防护眼镜、隔离衣或者围裙等，减少通过破损皮肤
9、和粘膜感染的危险性。,物体表面、环境的消毒:清洁区消毒：250-500mg/L有效氯溶液作用30-60分钟。半污染区的消毒：500-1000mg/L有效氯溶液作用30-60分钟。污染区的消毒： 桌椅等表面用1000mg/L有效氯溶液作用30-60分钟。 地面用高于消毒台面浓度（1000-2000mg/L有效氯）的消毒液进行消毒，作用30-60分钟。所用清洁器材、用具不得三个区域共用，专区专用，用后及时消毒。,2.4医务人员职业暴露的处理,紧急处理 I、用肥皂液和流动水清洗污染的皮肤，用生理盐水冲洗粘膜。 II、如有伤口，应当在伤口旁端轻轻挤压，尽可能挤出损伤处的血液，再用肥皂液和流动水进行冲洗
10、；禁止进行伤口的局部挤压。 III、受伤部位的伤口冲洗后，应当用消毒液，如：75%乙醇或者0.5%碘伏进行消毒，并包扎伤口；被暴露的粘膜，应当反复用生理盐水冲洗干净。,登记和报告,职业暴露后要将暴露情况及时进行登记和报告，登记的内容包括：职业暴露发生的时间、地点及经过；暴露方式；暴露的具体部位及损伤程度；暴露源种类和患者的姓名、性别、年龄、诊断、祥细通迅、住址，包括亲属的姓名及祥细通迅及住址；暴露处理方法及处理经过，是否实施预防性用药、首次用药时间、药物毒副作用及用药的依从性情况；定期检测及随访情况。,预防性用药,I、免疫预防：根据某种感染的危险程度和发生感染的频率进行预防接种，使用疫苗应尽量
11、在医务人员进入高危区工作之前进行。 II、预防性用药：根根卫生部制订的医务人员艾兹病职业暴露防护指导原则，医务人员发生感染性职业暴露属艾兹病职业暴露者，要根据暴露级别和暴露源病毒载量水平实施预防性用药方案。预防性用药方案分为基本用药程序和强化用药程序。,基本用药程序为两种逆转录酶制剂，使用常规治疗剂量，连续使用28天。强化用药程序是在基本用药程序的基础上，同时增加一种蛋白酶抑制剂，使用常规治疗剂量，连续使用28天。预防性用药应当尽早开始，最好在暴露后4小时内实施，最迟不得超过24小时；即使超过24小时，也应当实施预防性用药。,发生一级暴露且暴露源的病毒载量水平为轻度时，可以不使用预防性用药；发
12、生一级暴露且暴露源的病毒载量水平为重度或者发生二级暴露且暴露源的病毒载量水平为轻度时，使用基本用药程序；发生二级暴露且暴露源的病毒载量水平为重度或者发生三级暴露且暴露源的病毒载量水平为轻度或者重度时，使用强化用药序；暴露源的病毒载量水平不明时，可以使用基本用药程序。,追踪,根据接触疾病的性质定期检测及随访。 如：艾滋病即在暴露后的当天、4周、8周、 三个月、六个月、一年定期追踪，对 艾滋病病毒抗体进行检测，对用药的 毒性进行监控和处理，观察和记录艾 滋病病毒感染的早期症状等。,乙肝：暴露后当天、3个月、6个月追踪丙肝：暴露后当天、4周、3个月、6个月追踪梅毒：暴露后当天、4周、3个月追踪,化学
13、污染,针刺伤,皮肤、粘膜、角膜被污染,灼 伤,标本污染,流水冲洗,病原体抗原抗体检测,挤出血液流水冲洗,络合碘消毒预防用药,流水冲洗,上报医务部、院感科,就 诊,就 诊,中和冲洗,冲洗干净或擦除,消毒液浸泡30-60分钟,就 诊,上报医务部、院感科,上报医务部、院感科,定期复查,上报医务部、院感科,流水冲洗,职业暴露后应急处置流程,实验室标本溢撒应急事故处理演练,I、少量标本溢撒到工作台面,II、新鲜配置2000-2500mg/L的有效氯溶液,III、用干净卫生纸或吸水纸覆盖标本，并滴上新鲜配置的有效氯溶液作用30-60min,再用有效氯溶液擦拭工作台面，并用75%酒精消毒5.在事故应急处理登
14、记表上填写溢撒处理过程,标本离心时试管破裂,标本离心时试管破裂，应戴手套、口罩，用镊子将试管碎片夹出，放入专用黄色口袋里。离心机内塑料套管用2000mg/L有效氯消毒液浸泡4小时；用2%戊二醛擦拭离心机，半小时后用清水擦净。,（二）实验室生物安全防护,实验室生物安全防护：实验室工作人员所处理的实验对象含有致病的微生物及其毒素时，通过在实验室设计建造、使用个体防护装置、严格遵从标准化的工作及操作程序和规程等方面采取综合措施，确保实验室工作人员不受实验对象侵染，确保周围环境不受其污染。,1 实验室生物安全防护,实验室生物安全防护的内容包括安全设备、个体防护装置和措施（一级屏障），实验室的特殊设计和
15、建设要求（二级屏障），严格的管理制度和标准化的操作程序及规程。根据使用的一级和二级防护屏障的不同，实验室生物安全防护水平（biosafety level,BSL）分为四级。按防护水平由低到高排列即： 一级生物安全水平（BSL-1） 二级生物安全水平（BSL-2） 三级生物安全水平（BSL-3） 四级生物安全水平（BSL-4）,病原微生物危险度分级 WHO 危险度14级(渐高),BSC：生物安全柜；GMT：微生物学操作技术规范。,BSL-1是围护屏障水平和生物安全级别最低的生物实验室，在该级别实验室中进行的操作都是在室内开放空间进行的在其中活动所涉及的生物因子应是已知不引起健康成人感染的微生物但
16、是应注意这些微生物也许有可能引起幼儿、老人或免疫抑制患者的机会感染,BSL-2主要用于处理中度危险的病原体，如沙门菌属和乙型肝炎病毒等这些病原体可能通过意外的经口摄入或经皮肤、粘膜暴露而感染在遵守标准操作程序的情况下，这些病原体的处理可在开放实验台进行，应配备高压蒸汽灭菌器但是，如预期有发生喷溅或可产生气溶胶时应使用生物安全柜等,BSL-3是为应对主要通过气溶胶传播的病原微生物如结核分枝杆菌等的实验室操作而设计的BSL-3有严格的操作规程和程序，使用一级和二级防护屏障，同时对于诸如通风系统都有特殊的要求,BSL-4用于可引起致命疾病的病原体的处理和实验操作这些病原体（如出血热病毒）可能通过气溶
17、胶传播的或者没有有效的疫苗预防或没有有效的治疗方法BSL-4实验室的实验操作一般地应在级生物安全柜内进行，或由身着正压防护服的工作人员进行操作处理BSL-4实验室应是完全独立的实验室，其通风系统和废弃物处理亦应完全独立,2 实验室生物安全防护一级防护屏障,2.1个体防护装备2.2生物安全柜,2.1个体防护装备,装备 避免的危害 安全性特征实验服、隔离衣、连体衣 污染衣服 背面开口 罩在日常服装外塑料围裙 污染衣服 防水鞋袜 碰撞和喷溅 不露脚趾护目镜 碰撞和喷溅 防碰撞镜片（必须有视 力校正或外戴视力校 正眼镜） 侧面有护罩安全眼镜 碰撞 防碰撞镜片（必须有视 力校正） 侧面有护罩面罩 碰撞和
18、喷溅 罩住整个面部 发生意外时易于取下,46,2.1个体防护装备,装备 避免的危害 安全性特征防毒面具 吸入气溶胶 在设计上包括一次性使用的、整 个面部或一半面部空气净化 的、整个面部或加罩的动力空 气净化（powered air purifying，PAPR）的以及供 气的防毒面具手套 直接接触微生物 得到微生物学认可的一次性乳 划破 胶、乙烯树脂或聚腈类材料 保护手 网孔结构,47,操作者在移动双臂进出安全柜时，应该垂直地缓慢进出前面的开口。级生物安全柜前面的进气格栅不能被阻挡。放入柜内的物品应采用75%酒精来清除表面污染。,2.2生物安全柜的使用,48,2.2生物安全柜的使用,所有物品应
19、尽可能地放在工作台后部靠近工作台后缘的位置，并使其在操作中不会阻挡后部格栅。可产生气溶胶的设备（例如混匀器、离心机等）应靠近安全柜的后部放置。废弃物袋、盛放废弃吸管的盘子以及吸滤瓶等体积较大的物品，应该放在安全柜内的某一侧。,3 手卫生,2009年4月，国家卫生部颁布了我国首个医务人员手卫生规范，对医务人员该如何“认真洗手”作出详细规定，希望以此控制高发的院内交叉感染。,3 手卫生,3.1术语和定义3.2手卫生的管理与基本要求 3.3 洗手与卫生手消毒方法,3.1术语和定义,手卫生(hand hygiene): 是医务人员洗手、卫生手消毒、外科手消毒的总称。,I 洗手(hand washing
20、)：医务人员用肥皂(皂液)和流动水洗手，去除手部皮肤污垢、碎屑和部分致病菌的过程。,0 用水打湿双手 1 取适量产品涂抹双手所有皮肤 2 掌心对掌心揉搓,3手指交叉，掌心对手背揉搓 4 手指交叉，掌心对掌心揉搓 5 手指互握，一手手指 背部放于另一只手手掌中，揉搓手指,使用肥皂和水洗手方法,使用肥皂和水洗手方法,I 洗手(hand washing)：医务人员用肥皂(皂液)和流动水洗手，去除手部皮肤污垢、碎屑和部分致病菌的过程。,6 拇指在掌中揉搓 7指尖在掌心中揉搓 8 用水冲洗,9用一次性毛巾/纸巾彻底擦干 10 用毛巾关水龙头 你的手是安全的,II 卫生手消毒(antiseptic han
21、drubbing)：医务人员用速干手消毒剂揉搓双手，以减少手部暂居菌的过程。,1取适量产品于于掌心中，并涂抹双手至所有皮肤 2 掌心对掌心揉搓,使用快速手消毒剂的手卫生方法,II 卫生手消毒(antiseptic handrubbing)：医务人员用速干手消毒剂揉搓双手，以减少手部暂居菌的过程。,3手指交叉，掌心对手背揉搓 4手指交叉，掌心对掌心揉搓 5 手指互握，一手手指背部放于另一只手手掌中，揉搓手指,使用快速手消毒剂的手卫生方法,II 卫生手消毒(antiseptic handrubbing)：医务人员用速干手消毒剂揉搓双手，以减少手部暂居菌的过程。,6拇指在掌中揉搓 7 指尖在掌心中揉
22、搓 一旦干燥，你的手是安全的,使用快速手消毒剂的手卫生方法,III 外科手消毒(surgical hand antisepsis)：外科手术前医务人员用肥皂(皂液)和流动水洗手，再用手消毒剂清除或者杀灭手部暂居菌和减少常居菌的过程。使用的手消毒剂可具有持续抗菌活性。,3.2手卫生的管理与基本要求,手消毒效果应达到如下相应要求：卫生手消毒，监测的细菌数应 10cfu/cm2。外科手消毒，监测的细菌数应 5cfu/cm2。,3.3洗手与卫生手消毒方法,应遵循以下原则：当手部有血液或其他体液等肉眼可见的污染时，应用肥皂(皂液)和流动水洗手。手部没有肉眼可见污染时，宜使用速干手消毒剂消毒双手代替洗手。
23、,洗手或使用速干手消毒剂的指征,（三）医疗废物管理,1.医疗废物的分类2.医疗废物的处理,1 医疗废物的分类,医疗废物：医疗卫生机构在医疗、预防、保健以及其他相关活动中产生的具有直接或者间接感染性、毒性以及其他危害性的废物。感染性废物病理性废物损伤性废物药物性废物化学性废物,感染性废物,特征：携带病原微生物具有引发感染性疾病传播危险的医疗废物。常见：1、被病人血液、体液、排泄物污染的物品，包括：棉球、棉签、引流面条、纱布及其他各种敷料；一次性使用卫生用品、一次性使用医疗用品；一次性医疗器械；废弃的被服；其它被病人血液、体液、排泄物污染的物品。2、医疗机构收治的隔离传染病病人或者疑似传染病病人产
24、生的生活垃圾。3、病原体的培养基、标本和菌种保存液。4、各种废弃的医学标本。5、废弃的血液、血清。,病理性废物,特征：诊疗过程中产生的人体废弃物和医学实验动物尸体等。常见：1、手术及其它诊疗过程中产生的废弃的人体组织、器官等。2、医学实验动物的组织、尸体。3、病理切片后废弃的人体组织、病理腊块等。,损伤性废物,特征：能够刺伤或者割伤人体的废弃的医用锐器。常见：1、医用针头、缝合针。2、各类医用锐器，包括：解剖刀、手术刀、备皮刀、手术锯等。3、载玻片、玻璃试管、玻璃安瓿等。,药物性废物,特征：过期、淘汰、变质或者被污染的废弃的药品。常见：1、废弃的一般性药物，如：抗生素、非处方类药品等。2、废弃
25、的细胞毒性药物和遗传毒性药物，包括:致癌性药物，如环孢霉素、环磷酰胺等；可疑致癌性药物，如:顺铂、丝裂霉素、阿霉素等；免疫抑制剂等。3、废弃的疫苗、血液制品等。,化学性废物,特征：具有毒性、腐蚀性、易燃易爆性的废弃的化学物品。常见：1、医学影像室、实验室废弃的化学试剂。2、废弃的过氧乙酸、戊二醛等化学消毒剂。3、废弃的汞血压计、汞温度计。,2.医疗废物的处理,2.1各种体液标本（尿、胸腹水、脑脊液、胃液、关节液等）排入医院污水处理站，经处理合格后排放。2.2固体标本及痰、脓、血、粪等装入三层黄色塑料口袋运往垃圾处理站进行无害化处理。2.3细菌培养皿、血液试管经121高压灭菌后统一交由医院无害化
26、处理。2.4盛过标本的玻璃或陶瓷容器用2000mg/L有效氯溶液浸泡4小时清洗，压力灭菌后再使用。,2.医疗废物的处理,2.5消毒处理后的痰杯、血管等标本杯，分别用黄色塑料口袋扎紧，贴上废弃物种类标识，再放入专用黄色废弃物运送箱，由医院专人进行交接，登记记录，统一进行无害化处理。2.6采血后的空针锐器等装入锐器桶，送到医院污物存放处进行交接，登记记录，由医院统一进行无害化处理。,2.医疗废物的处理,2.7使用后的一次性帽子、口罩、手套、棉签等医用废物，装入黄色塑料口袋扎紧，贴上标识，再放入专用黄色废弃物运送箱，由医院专人进行交接，登记记录，统一进行无害化处理。2.8科室所有废水全部排入医院污水
27、处理站，经处理合格后排放，若存在剧毒物质由医院统一交给专业机构处理。,医疗废物处置要点,医疗废物集中处置包装物要防渗漏、防锐器穿透，明显标识和警示说明，不超过容器的3/4医疗废物储存设备定期消毒医疗废物制病原体的培养基、标本和菌种、毒种保存液等高危险废物，在交医疗废物集中处置前应就地高温蒸汽灭菌处理,二、实验室危化品培训,1.危化品管理：五双制度 双人收发 双人记账 双人双锁 双人运输 双人使用浓盐酸、甲苯、无水乙醇、酒精、氢氧化钾,二、实验室危化品培训,2.危化品泄露应急处理措施要点：2.1紧急报告：生物安全负责人和实验室负责人2.2紧急疏散2.3熄灭所有明火，关闭可能产生火花的电器，开窗通
28、风2.4确认安全后处理溢出物,二、实验室危化品培训,3.受到危化品伤害人员现场急救要点：3.1皮肤接触：脱去污染衣物，使用冲淋装置彻底冲洗3.2眼睛接触：提起眼睑，使用洗眼器冲洗眼睛，立即就医3.3吸入：迅速脱离现场至空气新鲜处，保持呼吸通畅，如有呼吸困难，立即就医,水银泄露处理与防护,1、破损导致水银泄漏时，要及时处理，疏散周围人群，处理者戴好橡胶手套、口罩，避免用手直接接触水银，然后用纸片缓慢收集泄漏的水银，将其放入密封瓶内，并加少量水进行水封。破损的血压计、体温表及收集的水银珠不能随意放入垃圾桶内，应放入化学性废物桶内，一同送交后勤保障人员统一处理。2、房间黑暗时，使用手电筒寻找闪光水银珠，确保检查、搜寻整个房间。,水银泄露处理与防护,3、接触水银的人员要进行相应处理。1）皮肤接触者：脱去污染的衣服，用流动水彻底冲洗。2）眼睛接触者：立即提起眼睑，用大量流动水或生理盐水冲洗。3）食入者：立即漱口，饮牛奶或蛋清，进粗纤维食物，观察大便情况。4、窗通风至少24小时。,三、实验室消防安全培训,1.灭火基本方法： 冷却法 窒息法 隔离法 抑制法,三、实验室消防安全培训,2.消防器材使用,谢谢！,
