1、支气管肺泡灌洗液GM检测的意义 与肺部感染性疾病支气管肺泡灌洗病原体检测中国专家共识,山东省千佛山医院重症医学科陈海荣,侵袭性曲霉菌病慢性曲霉菌病过敏性曲霉菌病,曲霉菌感染,三种形式,肺曲霉病新的分类建议,侵袭性肺曲霉病，伴有血管侵袭,侵袭性肺曲霉病，没有血管侵袭,肺曲霉病慢性形式，包括曲霉球,慢性肺曲霉病侵袭形式,侵袭性肺曲霉病，混合组织学改变,组织中有菌丝,组织中无菌丝,The clinical spectrum of pulmonary aspergillosis. Thorax, 2014,组织病理学和无菌部位的真菌培养结果是曲霉菌病确诊标准。,生物标记物,标本,抗体检测,IgG,Ig
2、E,IgM,IgA,抗原检测,分子生物学,PCR,基因测序,G试验、GM试验,新的方法,？,生物标记物,标本,抗体检测,IgG,IgE,IgM,IgA,抗原检测,分子生物学,PCR,基因测序,G试验、GM试验,新的方法,？,慢性肺曲霉病-抗体检测Aspergillus antibody diagnosis of CPA,Present by David Denning,ECCMID 10th May 2015 in Barcelona,患者人群Population,目的Intention,干预手段Intervention,SoR,QoE,文献Reference,备注Comment,在非免疫抑制
3、患者中伴有空腔/结节肺浸润,Cavitary or nodularpulmonary infiltrate in Non-immunocompromised patients,诊断或排除慢性肺曲霉菌病,DiagnosisOrexclusionof CPA,曲霉抗体IgG,Aspergillus IgG antibody,Aspergillus IgM antibody,Aspergillus IgA antibody,Aspergillus IgE antibody,A,A,D,D,B,II,II,III,III,II,Guitard, 2012;Baxter, 2012; VanTooren
4、enbergen,2012,BTS,1970;Uffredi, 2003;Kitasato, 2009;Ohba, 2012;Baxter, 2012,Schonheyder1987; Nimomiya,1990;,Denning, 2003;Agarwal, 2012,IgG和曲霉沉淀素的标准建立尚未完成,哮喘/变态反应性肺曲霉病（ABPA）/囊性纤维化(CF),Asthma/ABPA/CF,Aspergillus precipitins,曲霉沉淀素,曲霉抗体IgM,曲霉抗体IgA,曲霉抗体IgE,Brouwer, 1988;,多数室内测试尚未应用，主要原因是不确定的敏感性,曲霉肉芽肿的敏感
5、性尚不确定,生物标记物,标本,抗体检测,IgG,IgE,IgM,IgA,抗原检测,分子生物学,PCR,基因测序,G试验、GM试验、隐球菌荚膜多糖抗原,新的方法,？,Infection Diseases Society of American Practice Guidelines 2016 Update,Clinical Infectious Diseases Advance Access published June 29, 2016,Copyright belong to Oxford journals ,Forbidden for any business purpose,Practic
6、e Guidelines for the Diagnosis and Management of Aspergillosis:2016 Update,77. Arvanitis M, Ziakas PD, Zacharioudakis IM, Zervou FN, Caliendo AM, Mylonakis E. J Clin Microbiol 2014; 52:373142.78. Avni T, Levy I, Sprecher H, Yahav D, Leibovici L, Paul M. J Clin Microbiol 2012; 50:36528.,血清或全血PCR敏感性和特
7、异性可以达到84%和76%,The pooled diagnostic performanceof whole-blood and serum PCR assays was moderate, with a sensitivity and specificity of 84% (95% confidence intervalCI, 75 to 91%) and 76% (95% CI, 65 to 84%), respectively, suggesting that a positive or negative result is unable, on its own, to confirm
8、 or exclude a suspected infection.,Infection Diseases Society of American Practice Guidelines 2016 Update,Clinical Infectious Diseases Advance Access published June 29, 2016,Copyright belong to Oxford journals ,Forbidden for any business purpose,Practice Guidelines for the Diagnosis and Management o
9、f Aspergillosis:2016 Update,77. Arvanitis M, Ziakas PD, Zacharioudakis IM, Zervou FN, Caliendo AM, Mylonakis E. J Clin Microbiol 2014; 52:373142.78. Avni T, Levy I, Sprecher H, Yahav D, Leibovici L, Paul M. J Clin Microbiol 2012; 50:36528.,BALF PCR的敏感性和特异性分别为77%和94%。,Infection Diseases Society of Am
10、erican Practice Guidelines 2016 Update,Clinical Infectious Diseases Advance Access published June 29, 2016,Copyright belong to Oxford journals ,Forbidden for any business purpose,Practice Guidelines for the Diagnosis and Management of Aspergillosis:2016 Update,曲霉病的诊断,推荐：在分子诊断工具尚未在临床实验室广泛应用之前，建议充分数量的
11、组织和体液标本进行组织/细胞学和培养的同步监测。在分离得非典型菌株或考虑耐药的案例中，需要对标本进行分子方法的鉴定（强推荐；低证据等级）。,曲霉应如何鉴别，感染如何管理？,Infection Diseases Society of American Practice Guidelines 2016 Update,Clinical Infectious Diseases Advance Access published June 29, 2016,Copyright belong to Oxford journals ,Forbidden for any business purpose,Pra
12、ctice Guidelines for the Diagnosis and Management of Aspergillosis:2016 Update,曲霉病的诊断,推荐：对于PCR的应用尚存争议，倾向于推荐PCR检测。但因为对于现有的商业化试剂盒缺乏令人信服的验证。不同的文献中描述的PCR方法各不相同，问题在于该引用哪个研究的结果作为辅助诊断的应用范围。建议临床医生根据个案情况谨慎的选择使用PCR作为疾病的诊断（强推荐；中等证据等级）。,临床标本的核酸检测的诊断价值？,有条件的实验室开展分子生物学方法用于曲霉菌病的诊断，但目前不能作为主要诊断依据。推荐在怀疑分离株有耐药可能时用分子生物
13、学方法进行菌种鉴定。,曲霉菌病的诊断PCR,生物标记物,标本,抗体检测,IgG,IgE,IgM,IgA,抗原检测,分子生物学,PCR,基因测序,G试验、GM试验,新的方法,？,Infection Diseases Society of American Practice Guidelines 2016 Update,Clinical Infectious Diseases Advance Access published June 29, 2016,Copyright belong to Oxford journals ,Forbidden for any business purpose,P
14、ractice Guidelines for the Diagnosis and Management of Aspergillosis:2016 Update,曲霉病的诊断,推荐：对于特定的亚组人群（血液恶性肿瘤和造血干细胞移植患者），推荐血清和肺泡灌洗液（BAL）的GM 检测作为诊断成人和儿童侵袭性曲霉病的生物标记物。（强推荐；高证据等级）对于接受抗霉菌治疗或预防治疗的患者不推荐GM作为常规血液筛查的工具。但对于此类患者可以将气管镜标本应用于检测。（强推荐；高证据等级）,半乳甘露聚糖（GM）和1-3-beta-D-葡聚糖（BG试验）检测该如何应用于曲霉病的诊断？,Infection Dis
15、eases Society of American Practice Guidelines 2016 Update,Clinical Infectious Diseases Advance Access published June 29, 2016,Copyright belong to Oxford journals ,Forbidden for any business purpose,Practice Guidelines for the Diagnosis and Management of Aspergillosis:2016 Update,103. Hidalgo A, Paro
16、dy R, Martino R, et al. Eur J Radiol 2009; 71:5560.,作者验证血清学GM检测的临床价值，对38位罹患确诊或临床诊断IPA患者进行研究（55%的患者中性粒计数少于500mm3 ）。在出现症状5-6天后给予CT检查。18位气道侵袭性IPA和20位血管侵袭性IPA。其中血管侵袭组患者GM滴度值1.5人次以及GM水平中位值军显著高于对照组。,Infection Diseases Society of American Practice Guidelines 2016 Update,Clinical Infectious Diseases Advance
17、 Access published June 29, 2016,Copyright belong to Oxford journals ,Forbidden for any business purpose,Practice Guidelines for the Diagnosis and Management of Aspergillosis:2016 Update,112. Park SY, Lee SO, Choi SH, et al. Clin Infect Dis 2011;52:e14952.113. Shin B, Koh WJ, Jeong BH, et al. J Infec
18、t 2014; 68:4949.,研究比较了血清和肺泡灌洗液在曲霉球患者中的敏感性差异,114. Aquino VR, Nagel F, Andreolla HF, et al. Mycopathologia 2012; 174:1639.115. Warren TA, Yau Y, Ratjen F, Tullis E, Waters V. Med Mycol 2012; 50:65860,Infection Diseases Society of American Practice Guidelines 2016 Update,Clinical Infectious Diseases Ad
19、vance Access published June 29, 2016,Copyright belong to Oxford journals ,Forbidden for any business purpose,Practice Guidelines for the Diagnosis and Management of Aspergillosis:2016 Update,112. Park SY, Lee SO, Choi SH, et al. Clin Infect Dis 2011;52:e14952.113. Shin B, Koh WJ, Jeong BH, et al. J
20、Infect 2014; 68:4949.,在曲霉球患者中血清GM敏感性仅为38%，BALF敏感性为92%,114. Aquino VR, Nagel F, Andreolla HF, et al. Mycopathologia 2012; 174:1639.115. Warren TA, Yau Y, Ratjen F, Tullis E, Waters V. Med Mycol 2012; 50:65860,38%,Serum GM,92%,BALF GM,43%,Culture,Note: Our finding that serum GM assay results were posi
21、tive for 13 (38%) of 34 patients with PA was similar to the positivity rate of 41% (5 of 12 patients) reported in a previous study 8 but higher than the rate of 22% (14 of 64) reported in another study 10. The high rate that we observed may have been attributable to the high percentage of patients w
22、ith hemoptysis. Indeed, we found that the positivity of serum GM assays was significantlyhigher in patients with hemoptysis than in those without hemoptysis (52% vs 9%; P 5 .02).,对于血液系统恶性肿瘤及造血干细胞移植患者，建立血清和肺泡灌洗液中的GM作为IA的精确诊断标志物。精确诊断标志物和确诊标志物并不等同。不建议对接受抗真菌治疗或预防性治疗的患者常规筛查血液GM，但可对这类患者的支气管镜样本检测GM。不建议对实体器
23、官移植接受者或慢性肉芽肿病患者筛查GM。G试验推荐对于高危患者（血液系统恶性肿瘤和HSCT）诊断IA，但不具有曲霉菌特异性。,曲霉菌病的诊断G、GM,生物标记物,标本,抗体检测,IgG,IgE,IgM,IgA,抗原检测,分子生物学,PCR,基因测序,G试验、GM试验、隐球菌荚膜多糖抗原,新的方法,？,Lateral flow device（LFD）,隐球菌荚膜多糖抗原（胶体金法）无需仪器15min,胶体金在念珠菌检测中的应用-LFIA测流免疫分析,原理：白色念珠菌会在人体的血液中释放神经元特异性烯化醇（Eno），继而引发机体产生烯化醇特异性抗体（Eno-Ab），该方法用于检测该烯化醇特异性抗体
24、,人的血清学样本,标记了鼠抗人IgG的胶体金,重组Eno,标记了羊抗鼠IgG的胶体金,用LFIA法检测临床确诊IC患者抗Eno抗体，50名健康者对照，与ELISA法相比，LFIA的特异性98.2%，敏感性84.8%，两者相符，与血培养的结果也高度一致 结论：LFIA适用于IC患者血清学检测,Lateral flow device（LFD）,使用的克隆抗体检测念珠菌特异性烯化醇抗体无需仪器15min,Lateral flow device（LFD）,使用的克隆抗体检测曲霉细胞外糖蛋白无需仪器15min,胶体金法检测曲霉外糖蛋白的结果,IDSA曲霉病指南（2016）,支气管镜检查在肺曲霉病诊断中的
25、作用：1. 推荐在怀疑侵袭性肺曲霉病的患者经支气管镜行肺泡灌洗检查（强推荐，中级证据）2. 严重并发症如严重低氧血症、出血、必须输注血小板的难治血小板减少症可限制 BAL的实施 3. 对于肺外周病变支气管镜的效率低，可以考虑经皮或经支气管镜行肺活检术4. 推荐标准的 BAL操作流程，BAL标本送检常规培养、细胞学和非培养方法（如 GM试验）,IDSA曲霉病指南（2016）,BAL中 GM检测：1. BAL通常在感染肺的段或亚段进行，常用生理盐水，应用林格液行 BAL检测曲霉 GM有假阳性报告2. BAL的量没有统一标准，一般至少 100ml（常为100-150ml，分每次 20-50ml灌洗）
26、3. BAL标本应该送细胞学检查、革兰染色、真菌染色、培养和 GM检测4. BAL中 GM检测与培养比较，敏感性超过70%5. BAL中 GM的理想阈值尚未确定，FDA指定.0为临床试验阈值，阈值高导致敏感性降低，但特异性升高,肺部感染性疾病支气管肺泡灌洗病原体检测中国专家共识（2017年）,中华医学会呼吸病学分会,BAL是指通过支气管镜向支气管肺泡内注入生理盐水并进行抽吸，收集肺泡表面液体（诊断性）及清除充填于肺泡内的物质（治疗性），进行炎症与免疫细胞及可溶性物质的检查，达到明确诊断和治疗目的的技术。 本共识适用于诊断性支气管肺泡灌洗术。,支气管肺泡灌洗术定义,1. 肺部感染，特别是免疫受损
27、患者肺部机会性感染的病原体诊断。 2. 肺部不明原因阴影、疑似肺部感染或需与其他疾病鉴别。,适应证,1. 严重通气和（或）换气功能障碍，且未采用有效呼吸支持。建立人工气道并非禁忌证，患者可经临床医生全面评估并在密切监护下进行。 2. 新近发生的急性冠状动脉综合征、未控制的严重高血压及恶性心律失常。 3. 主动脉瘤和食管静脉曲张有破裂危险。 4. 不能纠正的出血倾向，如严重的凝血功能障碍、大咯血或消化道大出血等。出血高风险：血小板计数1.5倍正常值。对于操作前血小板低下的患者，可考虑通过输注血小板后进行支气管肺泡灌洗，减少出血风险。 5. 多发性肺大疱有破裂危险。 6. 严重消耗性疾病或状态及各
28、种原因导致的患者不能良好配合。,禁忌证,灌洗操作,注意事项,操作流程,术前准备,BAL操作前需要进行常规的临床状态评估，排除出血等风险，严格对照支气管镜检查的适应证及禁忌证； 在支气管镜常规气道检查后且在活检、刷检前进行支气管肺泡灌洗。局部麻醉剂为2%利多卡因。有条件开展静脉复合麻醉的医院，应尽量在静脉复合麻醉下进行，以获得支气管镜嵌顿较好、增加BALF回吸收量的效果，但需严格筛选患者，术前应评估有否静脉麻醉的禁忌证，年老体弱及心、肺、肝、肾等重要脏器功能不全的患者应慎用。 术中应常规进行心电及脉搏血氧饱和度（SPO2）监测。,操作流程 一：术前准备,1. 部位选择：病变局限者选择病变段；弥漫
29、性病变者选择右肺中叶或左上叶舌段12-13。 2. 局部麻醉：在灌洗的肺段经活检孔注入2%利多卡因12 ml，行灌洗肺段局部麻醉。静脉复合麻醉的患者如仍有强烈的气道反应，同样可注入2%利多卡因12ml。 3. 注入生理盐水：支气管镜顶端嵌顿在目标支气管段或亚段开口后，经操作孔道快速注入37 或室温灭菌生理盐水，总量为60120 ml，分次注入（每次20-50 ml）。 4. 负压吸引：注入生理盐水后，立即用合适的负压（一般推荐低于100 mmHg）吸引获取BALF，总回收率30%为宜。 5. BALF收集：用于病原学分析的标本需用无菌容器收集；细胞学分析需选择塑料容器或硅化的玻璃容器以减少细胞
30、的黏附。如考虑为大气道疾病时，建议第 1管回吸收液单独处理；非大气道疾病时，可将所有标本混合后分送。,操作流程 二：灌洗操作,参考文献12BaughmanRP.Technicalaspectsofbronchoalveolarlavage:recommendations for a standard procedureJ.Semin Respir Crit Care Med，2007，28(5):475-485.DOI：10.1055/s-2007-99152013Meyer KC.Bronchoalveolarlavageas a diagnostic toolJ.Semin Respir
31、Crit Care Med，2007，28(5):546-560.DOI:10.1055/s-2007-991527,1. 支气管肺泡灌洗时支气管镜顶端要紧密嵌顿于段或亚段支气管开口，防止大气道分泌物混入或灌洗液外溢。 2. 灌洗液一般可从支气管镜操作孔道直接注入，也可先置入导管再从导管注入进行远端肺泡灌洗，可减少灌洗液的反流，且灌洗量可适当增多； 也可置入前端带气囊的导管，灌洗时将气囊充气并紧密嵌顿于段或亚段支气管开口，进行保护性支气管肺泡灌洗。 3. 灌洗过程中，麻醉要充分，咳嗽反射必须得到充分抑制，防止因剧烈咳嗽引起支气管黏膜损伤出血，影响BALF回吸收量和检测结果。 4. 回吸收时注意
32、负压不宜过大，一般推荐低于100 mmHg，也可根据情况进行调整，以吸引时支气管腔不塌陷为宜。,操作流程 三：注意事项,支气管肺泡灌洗是一种相对安全的检查方法，在支气管镜操作技术熟练及准确评估患者适应证及禁忌证的情况下，较少发生严重的并发症，常见的术中和术后并发症主要有29-31：（1）支气管痉挛或哮喘发作；（2）气道黏膜损伤及出血；（3）心律失常，但发生率较低，且与患者基础心脏疾病有关；（4）灌洗后数小时出现寒战、发热，多为吸收热，需注意排除感染扩散的可能；（5）灌洗肺野术后影像学检查可见短暂性磨玻璃影,偶可发生肺不张；（6）术中PaO2一过性降低，部分延续至术后，肺功能（肺活量、一秒用力呼
33、气容积、呼气峰值流速）可有短暂性降低；（7）气胸少见，一般仅见于同时行经支气管镜肺活检时。,并发症,参考文献29Goldstein RA,Rohatgi PK,Bergofsky EH,et al. Clinicalroleofbronchoalveolar lavageinadultswith pulmonary diseaseJ.Am Rev Respir Dis，1990，142(2):481-486.30SchnabelRM,van der Velden K,Osinski A,et al. Clinicalcourseandcomplicationsfollowingdiagnost
34、ic bronchoalveolar lavage in critically ill mechanically ventilated patientsJ. BMC Pulm Med，2015，15(1):107.DOI:10.1186/s12890-015-0104-131Lucena CM,Martnez-Olondris P,Badia JR,et al.Fiberopticbronchoscopyin a respiratory intensive care unitJ. Med Intensiva，2012，36(6):389-395.DOI:10.1016/j.medin.2011
35、.11.004,用无菌容器收集BALF标本，送检量一般需要1020 ml（5 ml），贴好标本信息标签，应在室温2 h内送至微生物实验室。 若延迟送检，可将标本放置于28保存，并在报告中说明并提示可能对培养结果造成的影响。 标本送检及保存条件见表114。,标本送检,参考文献：14王辉，任健康，王明贵.临床微生物学检验M.北京：人民卫生出版社；2015:141,273-274,注：BCYE营养培养基：活性炭酵母浸出物营养培养基；GVPC军团菌筛选培养基：甘氨酸-万古霉素-多黏菌素-放线菌酮军团菌筛选；MWY军团菌筛选培养基：甘氨酸-万古霉素-多黏菌素B军团菌筛选培养基；DFA：直接免疫荧光试验；
36、KOH：氢氧化钾；GM：半乳甘露聚糖；ELISA：酶联免疫吸附试验；ICT：免疫层析法,1. 微生物学涂片检查：BALF中的沉淀物进行革兰染色、抗酸染色及真菌的特殊染色，对细菌、分枝杆菌、真菌及寄生虫的检出有较大意义。 2. 微生物学培养：在严格无菌操作下采集的BALF进行直接接种培养或取其沉淀物进行培养，对检测细菌及真菌具有较大的临床意义，BALF细菌培养计数104CFU/ml或无菌防污染BALF103CFU/ml时具有临床诊断意义。 3. 灌洗液中GM测定：取510ml灌洗液置于无菌容器中，4 h内送检；对于早期快速诊断侵袭性肺曲霉病，特别是气道曲霉感染的患者具有重要的临床价值。 4. 特
37、殊病原体：对于某些病原体如病毒、肺孢子菌及寄生虫等可通过BALF中的抗原或核酸测定进行诊断。 5. 细胞学分类：本共识主要用于规范利用BALF标本进行下呼吸道病原学检测，在回吸收的肺泡灌洗量足够的情况下，也可进一步行细胞学分析。 BALF以中性粒细胞比例增高为主时，见于各种细菌或真菌等感染；以淋巴细胞比例增高为主时，见于病毒性肺炎、结节病或过敏性肺炎。根据BALF中淋巴细胞的亚群，区分不同间质性肺疾病；以嗜酸粒细胞比例增高为主时，见于嗜酸粒细胞浸润症、支气管哮喘或ABPA等。,临床意义,1. 灌洗部位的选择：可参考近期的胸部CT，遵循“灌洗病变叶段”的原则，特别是出现新的或进展性的浸润性病变的
38、叶段9,32；影像学提示双肺弥漫性病变时，推荐选择右肺中叶或左肺舌段，这2个部位的灌洗操作便利且回吸收量较多（与下叶比较可增加约20%）33。对于肺外周病变，有条件的单位可考虑采用径向超声支气管镜技术进行更准确的定位。2. 灌洗液量的选择：灌洗量多少可影响标本检测结果，包括细胞比例、蛋白含量及GM水平等。具体灌洗多少生理盐水是合适的，不同文献甚至指南的推荐均有差异8-9,32,34-36。Rennard等37发现，灌入20ml液体后获得回吸收标本内含有更多的上皮细胞和铁蛋白，表明该标本更可能是支气管灌洗液。 研究结果表明，在灌入60 ml或120 ml液体时所回吸收标本的检测结果差异明显，至少
39、灌入120 ml生理盐水时所回吸收的标本结果才相对稳定38-39。上述文献主要集中于健康成人及间质性肺疾病患者的观察，对于肺部感染性疾病患者，基于查找病原体的目的，又要防止在灌洗过程中感染的扩散。 本共识认为采用60120 ml的灌洗剂量，且分次灌洗，是比较好的方法。,常见问题说明（1）,参考文献8中华医学会呼吸病学分会.支气管肺泡灌洗液细胞学检测技术规范（草案）.中华结核和呼吸杂志，2002，25（7）:390-391. 9Meyer KC,et al. An official American Thoracic Society clinical practice guideline: th
40、e clinical utility of bronchoalveolar lavage cellular analysis in interstitial lung disease.Am J Respir Crit Care Med, 2012 ,185(9):1004-1014. 32Meduri GU. Thestandardizationofbronchoscopictechniques for ventilator-associated pneumoniaJ.Chest，1992，102(5 Suppl 1):557S-564S. 33PingletonSK, et al. Effe
41、ct of location, pH, and temperature of instillate inbronchoalveolarlavage in normal volunteers. Am Rev Respir Dis，1983，128(6):1035-1037. 34Sampsonas F, et al. Performanceof astandardizedbronchoalveolar lavageprotocol in a comprehensive cancer center: a prospective 2-year study.Cancer，2011，117(15):34
42、24-3433. 35TheBALCooperativeGroupSteering Committee.Bronchoalveolar lavage constituents in healthy individuals, idiopathic pulmonary fibrosis, and selected comparisongroups. Am Rev Respir Dis，1990，141(5 Pt 2):S169-202. 36DHaese J, et al. Detectionofgalactomannaninbronchoalveolarlavage fluid samples
43、of patients at risk for invasive pulmonary aspergillosis: analytical and clinical validity. J ClinMicrobiol，2012，50(4):1258-1263. 37Rennard SI, et al. Fractionalprocessingof sequential bronchoalveolar lavage to separate bronchial and alveolar samples. Am Rev Respir Dis, 1990，141(1):208-217. 38Dohn M
44、N. Effectofchanginginstilled volume for bronchoalveolar lavage in patients with interstitial lung disease. Am Rev Respir Dis，1985，132(2):390-392. 39Davis GS,et al. Analyses ofsequentialbronchoalveolar lavage samples from healthy human volunteers. Am Rev Respir Dis，1982，126(4):611-616.,3. 吸引负压的选择：过大的
45、负压会引起支气管壁塌陷或黏膜损伤，从而影响灌洗液的回收量和质量。但负压过小时，回吸收量亦会受到影响。美国胸科协会发布的指南中推荐采用100 mmHg的负压9。在临床实际工作中，可以参考但不局限于这一数值，选择合适的负压（如-100-150 mmHg），尽可能多的收集标本。4. BALF的预处理：对获取的BALF，特别是含有黏液成分时，是否需要无菌纱布过滤？本共识认为不需要常规过滤，因为在过滤过程中，细胞会黏附于纱布，会损失部分细胞及其他成分，如肺孢子菌（Pneumocystis jirovecii）更多的存在于黏液成分40。过滤过程会使标本的稳定性受到影响，且存在污染的可能性。,常见问题说明（
46、2）,参考文献9Meyer KC,Raghu G,Baughman RP,et al. An official American Thoracic Society clinical practice guideline: the clinical utility of bronchoalveolar lavage cellular analysis in interstitial lung diseaseJ.Am J Respir Crit Care Med, 2012 ,185(9):1004-1014. DOI:10.1164/rccm.201202-0320ST40Report of t
47、he European Society of Pneumology Task Group.Technicalrecommendationsandguidelinesfor bronchoalveolar lavage (BAL) J.Eur Respir J，1989，2(6):561-585.,5. 第1管回吸收液的处理9，12，37，40：研究结果显示，第1管回吸收液与后续回吸收的标本中细胞成分有较大差异，有学者建议第1管回吸收的灌洗液需单独处理或舍弃。美国胸科协会推荐混合所有的灌洗液包括第1管的灌洗液进行常规的细胞学分析。本共识认为，如果考虑气道的疾病，第1管的回吸收标本需单独处理。而对
48、于大多数疾病，可考虑混合所有的标本进行检测。 6. BALF的储存与转运41-42：获取BALF标本后，应尽快送至实验室完成检测。BALF的GM水平在4条件下24 h内保持稳定。血清和BALF的GM水平在零下20条件下可以存放11个月保持相对稳定。如果标本在采集后立即送到实验室检测，可在室温下转送，要求送检时间4 h。如果送检时间超过4 h，应在4下保存，可以储存24 h；超过24 h的标本，不适合再送检。7. BALF-GM的解读：BALF-GM已被列入IDSA和EORTC/MSG推荐的肺曲霉病诊断标准之一。但在临床诊治工作中，不能仅凭BALF-GM的结果进行抗真菌治疗，需要结合临床资料及影像学表现等进行综合分析，来判断BALF-GM阳性结果的意义。,
