中山大学本科生科研论文格式要求.DOC

1、中山大学本科生科研论文格式要求一、页面设置纸型：A4 纸型上下边界：25mm左右边界：25mm行距：固定值 24 磅字体：宋体字号：标题四号加粗，正文五号页码：暂不设置页码二、论文格式*（中文题目，一般不超过 20 个字）院系名称（小四号黑体） 作者姓名（小四号楷体）指导老师的姓名和职称：请在学生作者的署名下方另起一行注明。摘要（五号黑体）：*（中文，五号仿宋。摘要是科研论文主要内容的简短、扼要的重述，必须表达论文本身新的、最具特色的内容，重点是结果和结论；.一般以第三人称的语气写，避免用“ 本文”、 “我们”、 “本研究”等作为文摘的开 头。 ）关键词（五号黑体）：*（中文，五号仿宋，一般选

2、取 38 个词，每个词之间应留有空格以区别之。 ）正文（五号宋*说明：文内必要的解 释 性说明词语可采用“ 注释”形式，其序码以圆括号放在加注处右上角，内容排在加注处所在页的页下， 页下注序码每页单独排序。 表格设计必须清晰、规范，每个表格除有栏头、表身外还应在表的上方居中标明表序和表题，中间空一格将两者分开；表随文放，一般应列在“ 见表”文字的自然段落的下面，在正文中要明确提及见表；表格一般采用三线表。 插图要求大小比例适中，数字清晰，照片黑白对比分明；图也应随文字放在“ 见图”文字的自然段落下面；每幅图都要有图序和图题，通常写在图的下方居中位置。 论文内各大部分标题用“ 一、二” ，次级标

3、题为“（一）、 （二） ”，三级标题用“1、 2”，四 级标题用“（1）、 （2）”。不再使用五级以下标题。 参考文献（黑体五号，在正文后居中排版）参考文献是期刊时为 序号 著者.题名J.期刊名，出版年份，卷号( 期号): 页码.参考文献是图书时为 序号 著者.书名M.版次.出版地:出版社,出版年份.页码.*（英文题目，小四号 Times New Roman）Abstract:*Key Words: *； *； *附：医科论文格式样板参照人纤溶酶原K5基因与真核表达载体pPICZA 重组体的构建光华口腔学院 陈素洁指导教师 蔡卫斌 高国全摘要: 以K5/pET22b（+ ）为模板用PCR 的方

4、法扩增人纤溶酶 原kringle5基因，并用Xba I和EcoR I双酶切目的基因和真核表达 载体pPICZ A，胶回收试剂盒纯化酶切产物，用 DNA T4连接酶连接目的基因和载体构建重组体K5/pPICZ A，并 转 化进大肠杆菌DH5， 筛选阳性菌落，PCR鉴定重组体K5/pPICZ A，为人纤溶酶原K5 在真核系 统中表达提供基础性研究。关键词: 人纤溶酶原; kringle结构; 基因克隆新生血管的生成为恶性肿瘤生长提供营养，也是恶性肿瘤转移的必要条件，抑制新生血管在一定程度上可以减缓肿瘤细胞的恶性扩增，因此，基于抑制血管生成的治疗成为肿瘤治疗的热点。1994 年, OReilly 等

5、人从荷瘤小鼠的尿液和血清中分离纯化得到血管生成抑制素(angiostatin) , 它与人纤溶酶原 kringle14 功能区有同源性, 具有抑制毛细血管内皮细胞增殖、抑制血管生成和转移瘤生长的生物活性 1 。动物试验研究还表明, 血管生成抑制素对纤维肉瘤细胞株、人乳腺癌、结肠癌、前列腺癌细胞株在小鼠体内形成的肿瘤也有很强的抑制作用 2 。最近, Gao 等 3发现人纤溶酶原的 kringle5 功能区有比 angiostatin 更强的抑制内皮细胞生长的活性。本课题在已获得原核体系中表达的活性 K5 蛋白基础上，进一步构建 K5/pPICZA 重组体，以期在真核表达体系中获得有活性 K5 蛋

6、白。一、材料和方法（一）材料 含K5/pET22b（+）重组体的E.coli BL21(DE3)为本室构建并保存；EcoR I 和Xba I为New England公司产品；酵母粉、胰蛋白胨为OXIOD公司产品；IPTG购自北京鼎国生物技术公司；抗生素zeocin 为Sigma公司产品，pfu Tag DNA聚合酶和质粒pPICZA均购自invitrogen 公司，DNA胶回收试剂盒购自NOVAGEN公司，其他试剂为分析纯；引物由赛百盛公司合成。（二）聚合酶链反应（PCR）扩增 K5基因 以K5/pET22b（+）重组体为模板，上游引物为：5-C GAATTCCCAGATGTAGAGACTCC

7、TTC-3，5端设计有EcoRI 的酶切位点；下游引物为：5-CTCTAGA GCGGCACACTGAGGGACATCACA-3，5 端设计有Xba I的酶切位点，建立PCR反应体系：ddH 2O 38l，10pfu Buffer 5l，4dNTPs 4l，K5 primer(+) 0.7l，K5 primer(-) 0.8l，K5/pET22b（+）1l，pfu Tag DNA聚合酶0.5l。混匀后，进行PCR反应，反应条件：95预变性 3m，95变性80s，54复性100s，72延伸2m，循环30次，72延伸10m。扩增完毕后，取样 5l，于1.0%的琼脂糖凝胶上进行电泳，检测是否有扩增产

8、物K5基因。（三）K5基因和载体的酶切及酶切产物的纯化 PCR产物K5 DNA片段经酚/氯仿抽提、乙醇沉淀纯化后，用EcoR I 和Xba I两种酶同时消化，质粒 pPICZA同样用EcoR I与Not I进行双酶切，双酶切体系组成：ddH 2O 39.5l，10Buffer 5l，100BSA 0.5l, DNA 2g , EcoRI 1.0l, XbaI 1.0l，总体积50l 。酶切产物按照DNA 胶回收试剂盒操作方法进行纯化，纯化产物经1.0%琼脂糖凝胶电泳鉴定后，用 Genegenuis凝胶分析系统进行DNA 相对定量。（四）重组体的构建及转化 纯化后的产物在T4 DNA 连接酶作用

9、下进行连接反应，反应体系：K5 DNA 8l，pPICZ A 1.0l，Buffer 2.0l，T4 DNA Ligase 1.5l，ddH 2O 6.5l，总体积20l。反应液于 16水浴反应 18小时，置于4待转化。然后导入感受态的大肠杆菌DH5（感受态细胞的制备参见 分子克隆），涂布于含 25g/ml zeocin抗生素的LB 板上，37过夜培养。 （五）阳性菌落的筛选及鉴定 挑取LB平板上单克隆菌落，接种于无菌含25g/ml zeocin的 LB培养基，过夜培养。参照分子克隆中质粒DNA提取方法抽提培养物的质粒DNA， TE溶解 DNA，于-20 保存。以抽提DNA为模板，引物和PCR

10、体系同前，鉴定菌落DNA中是否存在目的基因，初步判定重组体构建成功与否。二、实验结果（一）PCR反应获得目的基因 K5片段 通过PCR 反应获得 K5基因片段，1.0%琼脂糖凝胶电泳示目的基因大小约为288bp（如图1所示，含设计的双酶识别序列），与理论推测的基因片段大小一致。图1. PCR 反应扩增目的基因17：PCR扩增的目的基因片段；M：标准分子量DNA 片段（二）K5基因和pPICZA载体双酶切产物的纯化和定量 目的基因K5和载体pPICZA经EcoR I 和Xba I消化后，用1.0% 的琼脂糖凝胶电泳和胶回收试剂盒纯化酶切产物（如图2A），并电泳鉴定纯化后的产物， Genegeni

11、us凝胶分析系统对DNA 进行相对定量示：K5 为14.7ng/ l, pPiczA为29.4 ng/ l。图2. 目的基因与载体双酶切及酶切产物纯化与相对定量A：酶切前后；B：酶切产物纯化后鉴定；1：酶切前载体pPICZA；2：酶切后PCR产物；3：酶切后载体pPICZ A；4：PCR酶切 产物纯化后；5：载体酶切产物纯化后；M：标准分子量DNA片段1100bp200bp300bp400bp500bp600bp700bp800bp900bp1038bp289bp1 2 3 4 5 6 7 MA B2 3 4 M 5100bp200bp300bp400bp500bp600bp700bp800b

12、p900bp1038bp（三）PCR鉴定阳性菌落 转化菌接种含有25g/ml zeocin的LB平板后，有单克隆菌落产生，挑取菌落扩增培养抽提质粒DNA，以其为模板PCR鉴定含重组体菌落（如图3）：从重组菌质粒DNA中能扩增出目的基因片段，大小与从阳性 K5/pET22b（+）扩增出的目的基因相一致，而以空载体为模板则不能扩增出目的片段。图3.SDS-PAGE分析重组转化菌株表达产物1：阳性模板K5/pET22b（+）扩增产物；2：重组菌质粒DNA扩增产物；3：质粒pPICZ A扩增产物；M：DNA分子量标准三、讨 论人纤溶酶原kringle5 功能区具有抑制毛细血管内皮细胞增殖 、迁移的作用

13、 3，4 , 这是血管形成过程的两个关键步骤，推测人纤溶酶原kringle5 功能区可能具有抑制血管形成和肿瘤生长的特性。本课题组已获得从原核体系中表达的活性K5蛋白，但对其活性是否受细菌内毒素的影响及其天然构象是否发生改变尚不清楚。本实验是前期工作的基础上，构建K5与真核表达载体pPICZA的重组体，为下一步的K5真核表达体系的建立提供给出行研究。人纤溶酶原的Kringle 5功能区约由91个氨基酸组成，编码该蛋白的基因约有289bp。本实验首先用PCR的方法从K5/pET22b（+）扩增出目的基因，其大小理论推算一致。目的基因和载体pPICZA均用EcoR和XbaI两限制性核酸内切酶酶切，

14、产物纯化后进行连接反应，并转化进宿主菌DH5，挑选单克隆菌落， PCR方法能从重组菌中扩增出目的基因片段，初步鉴定了K5/pPICZA重组体，为后续工作提供基础。参 考 文 献1 Oreillym S, Holmgren L, Shing Y, et al. Angiostatin:a novel angiogenesis inhibitor that mediates the suppression of metastases by a Lewis lung carcinoma J . Cell , 1994, 79: 315-14.4kD1 2 3 M100bp300bp500bp700b

15、p目的基因328.2 Oreillym S , Holmgren L, Chen C, et al. Angiostatin induces and sustains dormancy of human primary tumors in mice J . Nat Med, 1996, 2: 689-692.3 Zhang D, Kaufman PL, Gao G（高国全）, et al. Intravitreal injection of plasminogen kringle 5, an endogenous angiogenic inhibitor, arrests retinal ne

16、ovascularization in rats. Diabetologia 2001 Jun;44(6):757-65. 4 Gao G（高国全）, Li Y, Gee S, et al. Down-regulation of vascular endothelial growth factor and up-regulation of pigment epithelium-derived factor: a possible mechanism for the anti-angiogenic activity of plasminogen kringle 5. J Biol Chem 20

17、02 Mar 15;277 (11):9492-7. Construction of the Recombinant of Plasminogen Kringle 5 and pPICZA Abstract : The gene encoding kringle 5 of human plasminogen was amplified from the template of K5/pET22b（+）by polymerase chain reaction. The K5 gene fragment and the vector of pPICZA were digested by Xba I

18、 and EcoR I. The product of digestion was purified by gel purification kit and ligated by T4 DNA ligase to construct the recombinant of K5/pPICZA. Then the recombinant was transducted into E.coli of DH5 and cultured overnight. The colony was screened by the antibiotic of zeocin and identified by pol

19、ymerase chain reaction.Keywords : human plasminogen；kringle5 domain；gene cloning；FoxP3 的研究新进展中山医学院 张良明指导老师 彭辉摘要： FoxP3 是一个转录因子，它和调节性 T 细胞的发育和功能密切相关。 FoxP3 表达过多或者过少都会影响到机体中免疫系统，FoxP3 基因的突 变更会引起严重的自身免疫病。对 FoxP3 的深入研究将有助于了解机体免疫调节机制， 对 于肿瘤治疗，自身免疫病治疗，诱导移植物耐受等方面将大有好处。关键词：调节性 T 细胞；CD4 + CD25 + 调节性 T 细胞；免疫调

20、节；免疫耐受调节性 T 细胞(Treg)是 T 细胞的一种，它们有控制免疫应答反应和诱导免疫耐受的功能。这些 Treg 在许多实验模型里都已经得到证实，一般是 CD4+ T 细胞，并且相当部分是表达CD25 分子(IL-2 受体 a 链)，包括自然产生的(在胸腺里自然发育成熟的)和在外周血中的 T细胞经诱导产生的等。最近的研究表明 Treg 的功能相当广泛，它们几乎涉足所有的免疫反应，包括过敏症，感染，炎症，移植物排斥反应和肿瘤免疫等。另外，最近研究在早产婴儿的脐带血中 CD25+ CD4+ Treg 的减少规律这个实验还表明 Treg 在先天性免疫方面也发挥着重要的功能 1。 FoxP3 是

21、一个转录因子，它和调节性 T 细胞的发育和功能密切相关。下面就谈谈目前 FoxP3 的研究进展情况。一、FoxP3 的发现以及定位转录因子是一些多结构域的蛋白质，常根据其结合 DNA 的保守区域来分类。forhead区域第一次被证实是作为一个和老鼠肝细胞核因子 3 相同的果蝇 melanogaster 转录因子forkhead2。forkhead 区域包含一段 110bp 的 DNA 结合的保守区域，它能通过特异性结合DNA 而调节下游基因的表达。各种 forkhead 家族的转录因子在多种发育过程起重要作用，例如信号的传导，细胞的分化和发育等。FoxP3 转录因子就是该家族的成员之一， 它是

22、在科学家在研究 IPEX(The immune dysregulation， polyendocrinopathy， enteropathy， X-linked syndrome)时发现的，定位在 X 染色体上 Xp11.23-Xq13.3 3。二、FoxP3 表达的细胞Hori S 和 Sakaguchi S 等人已经证实 FoxP3 是调节性 T 细胞发育和功能的关键性基因，它主要在 CD4+CD25+T 细胞表达 4。在老鼠和人上，胸腺和外周来源的 CD4+CD25+T 细胞都高表达 FoxP3 mRNA ，特别是胸腺来源的。通过分析基因组的表达，Bruder D 等人发现 Neurop

23、ilin-1(Nrp1)是 CD4+CD25+T 细胞表面的特异性标志物，Nrp1 高表达的 T 细胞也高表达 FoxP3 mRNA，同时有抑制 CD4+CD25-T 细胞的功能 5。虽然使外周血中的 CD4+CD25- 细胞变成 CD4+CD25+细胞的机制还有待进一步研究，但最近的研究表明 IL-2 和 TGF-beta 通过作用 CD4+CD25-细胞，然后，后者与 CD25+ CD4+ 细胞接触而使其变成 CD4+CD25+细胞，转变后的细胞表面表达 FoxP3，具有抑制功能 6。 研究表明 TGFbetal 能够刺激 CD4+CD25+ T-cells 表达 FoxP3，并且 Fox

24、P3 的表达的量会随着 TGFbetal 的减少而减少 7。在日本的 Takahata Y 等人研究早产儿和新生儿的脐带血的实验中发现，早产儿脐带血中含有高比例的 CD4+CD25+ T 细胞 ，而这个高比例会随着胎儿的生长而趋向一个正常成人的水平，胎儿脐带血中的 CD4+CD25+ T 细胞也表达 FoxP3，有抑制功能，这表明调节性 T 细胞在人发育早期就出现的，而且发挥着调节免疫的功能 8。FoxP3 在 CD4+CD25-T 细胞也可以低表达，但是其功能还有待进一步研究来确定。总之，到目前的研究表明 FoxP3 基因主要在 CD4+CD25+T 细胞上表达， 是调节性 T细胞发育和功能

25、的关键性的基因。三、FoxP3 表达的产物以及其对自然发生的 Treg 的作用以上的研究都表明 FoxP3 与 Treg 的发育与功能有极大的关系，那究竟它们是怎样的关系呢? FoxP3 是在 X 染色体上的一段基因，是调节性 T 细胞表面最特异的标志，与调节性T 细胞的发育和功能有重要的关系 9。FoxP3 表达过多或者过少都会直接影响到 T 细胞的生长发育，甚至引发免疫性疾病。人们发现 FoxP3 的表达的蛋白质产物是 scurfin，FoxP3有突变的老鼠会因为 CD4+T 细胞的高反应性而得严重的像自身反应性的疾病，相反大量表达 scurfin 的老鼠，就会导致身体内的成熟 T 细胞含

26、量比正常老鼠的要少，而且经过分析其体内 B 细胞与 TD-Ag 的反应，发现血清中的特异性 Ab 的量减少和脾功能结构的混乱 10。这其中的原因是过度表达 scurfin 使 CD4+T 细胞发育有缺陷，从而在依赖 T 细胞的 Ab 反应中不能够提供帮助给 B 细胞，所以血清中的特异性 Ab 就少了。 在荷兰学者研究先天性青少年关节炎(juvenile idiopathic arthritis (JIA)试验中，发现预后良好的关节炎患者比预后差的患者体内外周血中的 CD4(+)CD25(bright) FoxP3(+)T 细胞表达的量明显要多，在关节滑液的分析结果也显示预后良好型 CD4+CD

27、25+ T 细胞的总量相比较多 11。这些研究都表明 FoxP3 能够调节 Treg 的生长发育，诱导机体免疫耐受，减少自身反应性疾病的发生。另外，FoxP3 在其它细胞上也可以表达，而且也能够发挥免疫抑制功能。 最近研究表明体外产生的同种抗原特异性的 CD8+ CD28- T 抑制性细胞也表达 FoxP3，它们与人类内皮细胞相互作用，使其表达抑制性受体支持分子和下调相互刺激的功能，导致内皮细胞的耐受 12。 FoxP3 在肿瘤细胞也有表达，最近日本的研究者发现成人 T 细胞白血病淋巴瘤(Adult T-cell leukaemia/lymphoma (ATLL)的瘤细胞也表达 FoxP3，只

28、不过表达的量比正常的少，这表明这些瘤细胞也有一定的调节功能 13。四、FoxP3 作用的分子机制以及其诱导机制既然 FoxP3 与调节性 T 细胞的发育和功能有这么多的联系，下面就谈谈 FoxP3 的作用机制以及 FoxP3 是怎样诱导产生的。关于 FoxP3 的作用机制到目前为止还不是很清楚，但是此前的一些研究可以推测其机制可能与 IL-2 有关。FoxP3 是一个转录因子，能够通过结合到 DNA 上，调节下游基因的表达。Hori 和 sakaguchi 研究表明转导了 FoxP3 的初始 T 细胞，它们的 IL-2，IL-4 和 IFN-gamma 的表达会被抑制 14。早在 2001 年

29、，就有人发现 FoxP3 的结合到 DNA 上的位点是在 IL-2 增强子附近的 NFAT(nuclear factor of activated T cells)调节位点上，这样 FoxP3 就可以通过结合 NFAT 来抑制 IL-2 的增强子的活性，达到抑制 IL-2 的产生 15。这也同样解析了表达 FoxP3 的 CD4+CD25+ T 细胞不表达 IL-2 了。FoxP3 作为一个转录因子可以结合到 DNA 上，它有抑制的功能，但它也可能充当一个转录增强子的角色。CD25，GITR，CTLA-4 和 CD103 等是 Treg 表面重要的标志性分子，和其调节功能有重要联系。有研究表明

30、转导了 FoxP3 的 T 细胞能够多表达以上这些表面分子14。IL-10 是一个负调节的细胞因子，通过诱导 FoxP3 可以诱导 IL-10 的产生分泌 15。至于 FoxP3 是直接还是间接作用于基因而促进这些分子的表达，目前还不是很清楚。同样，FoxP3 这个转录因子是直接还是间接调节 Treg 的发育和功能，目前也有待研究。虽然 FoxP3 作用机制还不是很清楚，但是其免疫调节功能是无容质疑的，因此，人们千方百计地诱导它的表达。我们知道在胸腺中高亲和的 TCR 相互作用对 CD4+CD25+ T 细胞的发育有重要的作用， 那么 FoxP3 的表达与 T 细胞受体(TCR)有没有关系呢?

31、为了确定它们的关系，研究者从无反应性的 TCR 转基因小鼠分离出 CD4+CD25- T 细胞，然后用该转导的基因编码的同类的配体( 高亲和性的自身 MHC 分子复合物) 去刺激它们，发现其表达FoxP3，虽然没有自然产生的 CD4+CD25+ T 细胞产生的量多，但是这足以提示 TCR 的作用可以诱导 FoxP3 的表达 16。胸腺产生的 CD4+CD25+ T 细胞的 FoxP3 表达与 TCR 的作用有关，那么外周血中的CD4+ T 细胞 FoxP3 的表达与什么有关呢?人们研究发现 TGF-beta 与体内的 FoxP3 的表达有关。CD4+CD25+ T 细胞会随着 TGF-beta

32、 增加而提高表达的量，同样，当 TGF-beta 刺激的信号减弱时，FoxP3 表达的量也会减少 7。最近的研究发现 TGF-beta 和 IL-10 一起作用目标细胞 CD4+CD25- T 细胞，后者在通过与 CD4+CD25+ T 细胞接触作用，使其转变成为 CD25+细胞，表达 FoxP3，具有抑制的功能 17。另外，最近又有研究表明依靠 TGF-beta能够在 CD4 Ab 被封闭后重新诱导移植耐受，诱导产生的表达 FoxP3 调节性 T 细胞会在移植物聚集，发生抑制作用，延长移植物的生存时间 18。这些研究都表明， TGF-beta 就能够促进 FoxP3 的表达，诱导 Treg

33、的产生，但是 TGF-beta 究竟是怎样作用的还有待进一步的研究。五、FoxP3 的表达与疾病FoxP3 基因的表达与很多疾病有关，下面从几个方面谈谈它们的关系。（一）FoxP3 与自身反应性免疫病的关系FoxP3 与多种自身反应性疾病有关。其致病作用主要是 FoxP3 影响 Treg 的功能而致病。最早发现与其有关的是 IPEX(the immunodysregulation， polyendocrinopathy， enteropathy syndrome)，这是一种和 X 染色体有关的隐性遗传病，主要由免疫调节功能混乱引起的自身免疫病，这个疾病的基因就是 FoxP3，正是 FoxP3

34、基因的突变使 Treg 的量减少，对自身反应性 T 细胞的抑制作用减少了而致病3。与此相反，在研究风湿性关节炎过程中，人们用dnaJP1(一种可以诱导未经治疗的风湿性关节炎患者体内的前炎症 T 细胞反应的多肽) 可以引起 CD4+CD25+ T cell 表达 FoxP3，引起耐受，这样就可以减轻关节炎 19。在与糖尿病的研究中，研究者发现 TGF-beta 在糖尿病的早期能够通过促进 CD4+CD25+ T cell 的生长发育从而抑制疾病的发生 20。令人注意的是 I 型糖尿病虽然是自身免疫性疾病，但是最近意大利的研究者在研究撒丁岛糖尿病人的 FoxP3 基因时，发现 I 型糖尿病与 Fo

35、xP3 基因的变化并没有太大的关系 21。总之，利用好 FoxP3 来诱导免疫耐受，对于治疗自身反应性疾病大有好处。（二）FoxP3 与肿瘤免疫肿瘤治疗难与机体的免疫系统无法清除肿瘤细胞有重要关系，这其中机体对肿瘤的耐受又是主要原因。研究者发现转移性黑色素瘤（metastatic melanoma）淋巴结中表达 FoxP3的 CD4+CD25+ T 细胞是没有发生肿瘤的淋巴结和外周血单个核细胞(PBMC)表达的量的两倍 22。研究者在体外实验，这些细胞有抑制的功能，能够抑制 CD4+CD25- T 细胞和CD8+T 细胞的增殖，还可以通过接触抑制的方式抑制 IL-2 和 IFN-gamma 的

36、释放， 这些都不利于治疗转移性黑色素瘤，如果能够想办法减少体内的 Treg，将大大有利于转移性黑色素瘤的治疗。（三） 其它在 HIV 患者体内存在高水平的激活的 T 细胞，但是 FoxP3 并没有能够促进足够多的记忆性 T 细胞发展为 Treg，研究者发现一部分 HIV 患者体 FoxP3+CD4+CD25+ T 细胞的水平已经大大的降低了。降低 Treg 的比例，提高激活的 T 细胞的比例，这样此消彼长，就会加重病情的进展 23。另外，法国的研究者发现从 HIV 患者外周血中分离的 CD4+CD25+ T 细胞表达了一种记忆的显形，但是，与 CD4+CD25- T 细胞不同的是对于有记忆的抗原和 p24的刺激， 这些 CD4+CD25+ T 细胞并没有增殖。CD4+T 细胞对于结核菌素，CMV 和 p24的刺激只有在 CD4+CD25+ T 细胞的减少的情况下才能增殖 24。所有这些将会诱导机体对HIV 耐受的产生，加重病情的发展。另外，在移植中如果能够利用 FoxP3 来诱导机体对移植物的耐受，将会大大提高移植