1、学科分类号（二级）18051本科学生毕业论文（设计）题目矮壮素对马铃薯米拉试管苗生长的影响姓名学号114120206院、系生命科学学院专业应用生物教育指导教师职称（学历）讲师（硕士研究生）1矮壮素对马铃薯米拉试管苗生长的影响摘要以MS为基本培养基，以马铃薯米拉的试管苗为实验材料，研究矮壮素对马铃薯米拉试管苗生长的影响。结果表明，在MS培养基中加入100MG/L的矮壮素能有效仰制马铃薯试管苗腋芽的萌发，可使试管苗节间长度变短、茎变粗、叶片浓绿，保持马铃薯试管苗的正常生长，有利于培养出健壮的试管苗，达到壮苗的目的，有效防止试管苗发生徒长和倒伏现象。关键词马铃薯试管苗；矮壮素；壮苗马铃薯（学名SOL
2、ANUMTUBEROSUM），属茄科多年生草本植物，块茎可供食用，是全球第三大重要的粮食作物，仅次于小麦和玉米。马铃薯又称地蛋、土豆、洋山芋等，茄科植物的块茎。是世界上种植和食用国家最多的作物，与小麦、玉米、稻谷、高粱并成为世界五大作物1。随着马铃薯生产的发展马铃薯茎尖脱毒离体培养2试管脱毒微型薯的诱导35等研究取得了很大的进展,很好地解决了由于病毒侵染积累品种严重退化的问题，并为大规模工厂化种苗繁育、品种资源的长期保存积累了经验，但频繁的继代培养过程中脱毒试管苗常常出现严重的徒长现象，不仅降低了有效繁殖倍数，而且影响到下一代扩繁。矮壮素CCC是一种优良的植物生长延缓剂，又名稻麦立，它的化学名
3、称为2氯乙基三甲基氯化物。CCC是通过仰制赤霉素生物合成过程中GGPPCPP的环节来使植物生长延缓的。可用于小麦；水稻；棉花；烟草；玉米及西红柿等作物67，抑制作物细胞伸长，但不抑制细胞分裂，能使植株变矮，杆茎变粗，叶色变绿，可使作物耐旱耐涝，防止作物徒长倒伏，抗盐碱，又能防止棉花落铃，可使马铃薯块茎增大。马铃薯品种米拉中晚熟品种，生育期从出苗到成熟105115天左右。株型开展，分枝数中等，株高60CM，茎绿色基部带紫色，生长势较强，叶绿色。抗晚疫病，所以适于无霜期较长、雨多湿度大、晚疫病易流行的西南一季作山区。本实验以米拉马铃薯试管苗作为材料，通过在MS培养基中加入不同浓度的矮壮素，研究不同
4、浓度的CCC对米拉马铃薯试管苗生长的影响。达到马铃薯试管苗壮苗的目的，提高马铃薯的生产效率。1、材料与方法11实验材料实验材料米拉（MIRA）的脱毒试管苗有云南师范大学组织培养实验室提供。矮壮素采用四川国关实业公司的产品。12实验方法本次实验采用的是植物组织离体培养法，实验分为两个阶段，第一阶段是米拉脱毒试管苗的扩繁，第二阶段是加入不同浓度矮壮素对米拉试管苗的培养。2121培养基的配制以MS培养基为基本培养基，以蒸馏水代替无菌水，加入不同浓度的矮壮素，PH值调至58，总共有6个矮壮素浓度梯度，每个梯度分装10瓶，分装到果酱瓶中，每瓶装50ML培养基，封口采用不透气封口膜，放入高压灭菌锅进行常规
5、灭菌。试验中采用的6种不同矮壮素浓度的培养基列于表1。表1含不同浓度矮壮素的培养基处理矮壮素（CCC）浓度水平（MG/L）1对照MS02MS203MS504MS1005MS1506MS200122接种从培养好的脱毒马铃薯米拉试管苗中选取大小均匀一致的试管苗，采用带一个叶片和腋芽的单节茎段，长度1厘米左右，将茎段腋芽朝上插在培养基上。总共6个处理，每个处理10瓶，每瓶接种5个茎段。整个过程在严格的无菌环境下进行。123培养条件将接种好的培养瓶放到培养室中进行培养，。培养室中的温度为251、光照时间为14H/D、光照强度为10001500LX。124观察记录每7天观察和记录一次马铃薯米拉试管苗的生
6、长情况，及时清理和统计污染数，培养到40天时记录结果。记录每一株苗的分支数、根数和叶数（叶数只记录可见叶的数量），株高用直尺测量从培养基以上到茎尖的部分，选取苗的茎段中间比较均匀的部分用游标卡尺测量其茎粗。记录完分支数、根数、叶数、株高和茎粗这几个数据后，把苗去除其根部放到烘箱中烘干（先在105温度下处理30MIN，再在80温度下处理12H），烘干后用分析天平测量其干重，计算其干重和株高的比值。2、结果与分析在恒温培养室里培养40D后，不同培养基培养马铃薯米拉试管苗的生长情况如图1所示。其根数、叶数、株高、茎粗和干重/株高的平均值及其腋芽萌发情况的测定结果见表2。3图1不同浓度CCC处理下马铃
7、薯米拉试管苗的生长情况表2不同浓度CCC对马铃薯米拉试管苗生长的影响浓度（MG/L）根数条/棵叶数（片/棵）株高（CM）茎粗（MM）分支（条/棵）干重/株高（MG/CM）070811028150762111682069988463092021728507161035608801764100742104222098048738150747988206095045728200568104315807206516注表中数据是接种后生长40D后数据，为调查样本的平均值。21不同浓度CCC对米拉试管苗根系生长的影响根的主要作用是固定植物体，并从土壤里吸收水分和无机盐8。健壮的苗应该要有健壮的根作为基础。
8、从表3中可以看出，在不同浓度CCC的影响下，只有当CCC浓度达到200MG/L时马铃薯米拉试管苗根的数量与其他几个浓度的表现出显著性差异。从表2中看出200MG/LCCC影响下马铃薯米拉试管苗的平均根数为568条，少于其余浓度影响下的根数。所以当CCC浓度达到200MG/L时马铃薯米拉试管苗的根数明显减少，不利于其生长。表3在不同浓度CCC培养后马铃薯米拉试管苗根数的差异性因变量I浓度J浓度均值差IJ标准误显著性95置信区间4下限上限根数LSD0020001800042265671651910119500008000422658509119751910000340004226542211719
9、491915000386674342337412414468120000139818436820025384225802000500026000422655391091957191000052000422652201351931191500056667434231931421428812000012181843682006358420780500010000260004226553910919571915000306674342348111614548120000147818436820016184233801000015000046674342391490148081200001738184
10、3682000878425980150002000017848544804000902926668注均值差的显著性水平为005。22不同浓度CCC对米拉试管苗叶片数以及叶片生长的影响从表4可看出，在CCC的各浓度梯度处理下，叶数与对照组无显著性差异。但是被CCC处理的马铃薯米拉试管苗的叶片与对照组相比，叶片变厚变大、叶色变深，叶绿素含量更高，有利于光合作用9。表4在不同浓度CCC培养后马铃薯米拉试管苗叶数的差异性多重比较因变量I浓度J浓度均值差IJ标准误显著性95置信区间下限上限叶数LSD00200011400038220003387718923500010200038220008267717
11、723100006200038220106132313723150001131113926700435821904020000588183950213818941365720005000120003822075487236323100005200038220175127232323150000088939267982781876405200005518239502164132942257500010000400003822029611523352315000111113926777766188840200004318239502275120943457100001500051111392671
12、942618128402000003182395029368094745715000200005429340516181134042546注均值差的显著性水平为005。23不同浓度CCC对米拉试管苗株高的影响从表5看出，在CCC不同浓度梯度处理下，马铃薯米拉试管苗的株高有显著性差异。但是浓度为100MG/L和150MG/L，150MG/L和200MG/L这两组的株高差异性不显著。从图1可看出CCC的浓度越高，试管苗生长越缓慢。图2不同浓度CCC对马铃薯米拉试管苗株高的影响表5在不同浓度CCC培养后马铃薯米拉试管苗株高的差异性因变量I浓度J浓度均值差IJ标准误显著性95置信区间下限上限株高LSD
13、00200035140022361000307383954250004592002236100041518503226注均值差的显著性水平为005。24不同浓度CCC对米拉试管苗茎粗的影响从表6看出，在CCC不同浓度梯度处理下，马铃薯米拉试管苗的茎粗与对照组相比有显著性差异。但200MG/LCCC处理下的米拉试管苗的茎粗与对照组没有显著性差异，结合图2和表2说明CCC浓度为20、50、100、150MG/L有助于马铃薯米拉试管苗茎的加粗，CCC浓度为100MG/L的处理茎最粗。茎较粗，生长健壮，苗不容易发生倒伏现象，有利于苗的生长和繁殖。表6在不同浓度CCC培养后马铃薯米拉试管苗茎粗的差异性因
14、变量I浓度J浓度均值差IJ标准误显著性95置信区间下限上限茎粗LSD00200001660003030000226010650000130000303000019000701000002260003030000286016615000019760031200002590136200000030700314328003100922000500000360003032360024009610000006000030304901200000150000031600312312009300301000059260022361000548586366215000608356229740005631365
15、358200006559362311100061044701432000500010780022361000637815182100002412002236100019718285221500025695622974000211733021820000304536231110002590435003500010000133400223610008938177421500014915622974000103931943820000196736231110001512424223100001500015756229744932947609820000633362311100717841088315
16、0002000047581237050460092942472000001967003140000135025850001000000960003030020156003615000006760031203101290006200000160700314000009902221000015000002840031236200330090200000256700314000019503181500020000022830032200001650292注均值差的显著性水平为005。图3不同浓度CCC对马铃薯米拉试管苗茎粗的影响24不同浓度CCC对米拉试管苗分支的影响从表2可以看出，没有添加CCC的
17、对照组马铃薯米拉试管苗的分支平均数为21，添加不同浓度CCC的实验组均没有分支。说明CCC能够有效仰制马铃薯米拉试管苗腋芽的萌发。25不同浓度CCC对米拉试管苗干重/株高的影响干重/株高的值越高说明马铃薯试管苗生长越健壮。从图4我们可以看出，对照组干重/株高的值最低，随着CCC浓度的升高，干重/株高的值有逐渐增加的趋势。但50MG/L与20MG/L相比有所下降，150MG/L与100MG/L相比也有所下降。8图4不同浓度CCC对马铃薯米拉试管苗干重/株高的影响3、结论与讨论矮壮素是一种植物生长延缓剂，对马铃薯的株高有明显的抑制效果，使作物矮化，促进作物的横向生长，可使茎段加粗，叶变厚。研究认为
18、CCC对马铃薯试管苗株高的仰制作用不明显10。但在本次实验中，高浓度的CCC对马铃薯米拉试管苗的仰制作用显著，试管苗生长极缓慢，有利于马铃薯试管苗的长期保存。而合适浓度的CCC可使试管苗节间长度变短、茎变粗、叶片浓绿，可用于培养壮苗。实验结果表明，1、当CCC浓度高达200MG/L时马铃薯米拉试管苗的根数减少；2、添加CCC对马铃薯米拉试管苗的叶数无影响，但与对照组相比叶片变大变厚；3、CCC对马铃薯米拉试管苗的株高有较大影响，随着CCC浓度的增加株高逐渐降低，当CCC浓度达到200MG/L时株高还不到对照组的1/4；4、与对照组相比，除了200MG/LCCC的处理以外，其余几个处理都对马铃薯
19、米拉试管苗的茎粗有促进作用，CCC浓度为100MG/L的处理茎最粗；5、经CCC处理的马铃薯米拉试管苗均无分支现象，CCC能有效仰制腋芽的萌发；6、在不同浓度的CCC处理下，随着CCC浓度的增加，马铃薯米拉试管苗的干重/株高的值有逐渐增加的趋势。综上所述，根据在不同浓度CCC处理下马铃薯米拉试管苗干重/株高9各指标的测定结果分析，当CCC浓度为100MG/L时，最有利于马铃薯试管苗的壮苗培养。参考文献1ANCORAG,ASONNINO,INVITROINDUCTIONOFMUTATIONINPOTATOM,INBAJAJYPSEDBIOTECHNOLOGYINAGRICULTUREANDFOR
20、ESTRY3POTATO,SPRINGERVERLAGBERLINHEIDELBERG,GERMANYIV12,19872林长春，李其文，马铃薯块茎培养脱毒与种质资源试管保存的研究J,马铃薯杂志，1989,3（2）73783郭得平，应振土，SHAMCA植物激素与马铃薯块茎形成J植物生理学通讯，1991,27（2）1301334HUSSEYG,STACEYNJINVITROPROPAGATIONOFPOTATOSOLANUMTUBEROSUMLJANNBOT,1981,487897965WANGPJ,STACEYNJINVITROMASSTUBERIZATIONANDVIRUSFREESEEDP
21、OTATOPRODUCTIONINTAIWANJAMERPOTATOJ,1982,5933376王成社,邹淑芳,李景琪等,小麦花培苗化学越夏技术研究,西北农业学报,1999,8（3）53557毛龙生,高勇,姚亚英等,PP333、B9、CCC对盆栽一串红矮化效应研究,园艺学报,1991,18（2）1771798马炜梁植物学M高等教育出版社，9潘瑞炽主编植物生理学M第六版高等教育出版社，2008，9910赵克蓉植物生长调节剂控制马铃薯试管苗徒长的作用J中国马铃薯,2000,143150152CCCEFFECTSONPOTATOMIRATUBESEEDLINGSGROWTHABSTRACTWITHM
22、SASTHEBASICCULTUREMEDIUM,THEPOTATOMIRATESTTUBESEEDLINGSASEXPERIMENTALMATERIAL,THECCCEFFECTSONPOTATOMIRATUBESEEDLINGSGROWTHRESULTSSHOWTHATTHEMSCULTUREMEDIUMWITH20150MG/LCYCOCELEFFECTIVELYMAKINGPOTATOTESTTUBESEEDLINGSOFAXILLARYBUDGERMINATION,CANMAKETHETUBEMIAOJIESHORTERLENGTH,STEMTHICKNESS,LEAF,THICK,
23、MAINTAINNORMALGROWTHOFPOTATOTESTTUBESEEDLINGS,ISCONDUCIVETOPRODUCEROBUSTTUBESEEDLINGS,ANDACHIEVETHEGOALOFSEEDLING,MODERATEGROWTHANDLODGINGOCCUREFFECTIVELYPREVENTTHETUBESEEDLINGSKEYWORDSPOTATOTUBESEEDLINGS；CCC；STRONGSEEDLING10描述N均值标准差标准误均值的95置信区间极小值极大值下限上限根数0050708001967492782565208763922001100200050
24、690001887122668863637743632001100500050716001983192804765964772363001200100005074200213895302496812180279400150015000457466722922834171677808155330014002000044568182418663646349465641722001300总数289696892173641278667172722052001500叶数00501102003053874318810152111887960019002000509880016243122971941841
25、0341670017005000501000001385051958896064103936700150010000501040001442792040499900108100800170015000459888911525117181954261023518001200200004410431821174531922978811107567002000总数289102734193775113991004901049776002000株高0050814801618422288876881860794501150200050463401180041668842986496942708405000
26、5035560114056161303231938801220680100005022220646270914020383240571005101500045206441136211693817231240581008502000044158866135009249140211775270350总数28937744250819147543484040648701150茎粗0050075801071001510728078805102000500924016360023108780970061450005008880140900199084809280612100005009840141900201094410240712150004509560151600226091010010713200004407270196900297066707870311总数2890874017840010508540895031411
