1、第七章 免疫学检验一、选择题1SPA 能特异性与下述哪种工 g 的 Fc 段结合： ( )AIgG BIgA CIgM DIgD2在人类血清的 Ig 中，K 链和入链之比为： ( )A11 B12 C13 D21356C 30min 可使下列工 g 丧失生物学活性的是： ( )AIgG BIgA CIgM DIgE4胎血中出现抗风疹病毒的何种 Ig，则表示子宫内感染：( )AIgG BIgA CIgM DIgD5补体系统的激活必须参与的成分是： ( )A C2 B细胞因子CClq DC36补体不具备的作用是： ( )A中和作用 B促进中和及溶解病毒C调理作用 D溶菌作用 7补体含量增高见于：
2、( )A肿瘤 B系统性红斑狼疮C血清病 D肾小球肾炎8关于旁路途径正确的叙述是： ( )A需要抗原抗体的识别和反应B膜攻击单位与经典途径相同C首先被活化的补体成分是 C5D需要经典途径的识别单位和活化单位的参与 9能引起恶液质的细胞因子是： ( )ATNF-a BTGF-pCIFN-a DIL-210下列英文缩写的中文含义错误的是： ( )AIL白细胞介素 BEPO血小板生成素CSCF 干细胞生长因子 DTNF肿瘤坏死因子11关于 MHC 工类分子，下列选项中正确的是： ( )A存在于一切有核细胞上 B只存在于白细胞上C只存在于淋巴细胞上 D只存在于巨噬细胞上12下列疾病中，与 HLA-B2，
3、抗原相关性显著的是： ( )A系统性红斑狼疮 B类风湿性关节炎C重症肌无力 D强直性脊柱炎13无血缘关系的同种器官移植中，急性排斥反应难以避免的主要原因是： ( )AHLA 系统的高度多态性B受者的免疫功能常处于紊乱状态C移植物供血不良D受者体内已存在对移植物致敏的淋巴细胞 14黏附分子包括： ( )A黏合素家族 B免疫球蛋白家族C选择素家族 D以上全都是15绵羊红细胞受体又称为： ( )ACD2 BCD3CCD4 DCD816关于免疫细胞错误的叙述是： ( )AB 淋巴细胞分化为浆细胞BNK 细胞引起 ADCC 效应C单核吞噬细胞具有抗原递呈功能DNK 细胞具有产生抗体的作用17具有特异性杀
4、伤作用的细胞是： ( )AB 细胞 B中性粒细胞CNK 细胞 DCTL 细胞18能够与人类免疫缺陷病毒特异性结合的 CD 分子是： ( )ACD2 BCD4CCD8 DCD2119与绵羊红细胞特异性结合，形成玫瑰花环状结构的免疫细胞是： ( )AT 细胞 BB 细胞C单核巨噬细胞 D中性粒细胞20B 细胞不具有的功能是： ( )A抗原递呈功能 B分化为浆细胞产生抗体C免疫记忆功能 D直接杀伤靶细胞21关于 NK 细胞正确的是： ( )A已发现具有特异性抗原识别受体B具有 MHC 分子的限制性C 是 ADCC 效应的重要介导细胞D分泌与 Th2 相同的细胞因子22下列选项中，不属于巨噬细胞的是：
5、 ( )A肝枯否细胞 B神经组织的小胶质细胞C肺泡巨噬细胞 D血液中性粒细胞23下列细胞不具有抗原递呈作用的是： ( )A巨噬细胞 B上皮细胞C神经胶质细胞 DT 细胞24决定抗原特异性的是： ( )A抗原的物理形状B抗原结构的复杂性C 抗原分子表面的特殊化学基团D抗原相对分子质量的大小25与移植排斥反应有关的抗原物质是： ( )AABO 血型抗原 BRh 血型抗原CHLA 抗原系统 D异嗜性抗原26关于佐剂的描述，下列选项中错误的是： ( )A佐剂是特异性的免疫增强剂B与免疫源混合后可以增加抗原在体内的存留时间C 最常用于实验动物的是佛氏佐剂 D可刺激巨噬细胞，增加它对抗原的处理和递呈能力2
6、7下列关于超抗原的性质的叙述中，正确的是： ( )A有严格的 MHC 限制性B无须经 APC 的力 11212 就可以与 MHC-II 类分子结合C与自身免疫无关D内源性超抗原存在于所有哺乳动物体内28下列关于抗原的组合中，错误的是： ( )A半抗原青霉素 B自身抗原HLAC完全抗原绵羊红细胞 D细胞浆抗原线粒体抗原29在初次应答中产生的抗体主要是： ( )AIgM BIgG CIgA DIgE30在再次应答中产生的抗体主要是： ( )AIgM BIgG CIgA DIgE31体液免疫的效应包括： ( )A调理作用 B补体介导的细胞溶解作用CADCC 作用 D以上全是32B 细胞的抗原识别受体
7、是： ( )AMHC-工类分子 BSmlgCCD4 分子 DCD8 分子33下列免疫作用，在无抗体存在的时候仍可发生的是： ( )AADCC 效应 B免疫调理作用C免疫黏附作用 D补体经典途径激活34关于细胞免疫，下列说法中错误的是： ( )A，T 细胞介导，巨噬细胞参与B致敏 Tc 细胞介导的细胞毒作用C由 TD 抗原引起 D抗原肽MHC 复合物传递活化的第二信号35细胞间相互作用不受 MHC 限制的是： ( )ATh 与 B 细胞 B NK 与靶细胞CTc 与靶细胞 DTh 与巨噬细胞36下列免疫现象不是由 T 细胞介导的主要细胞免疫现象的是：( )A迟发型超敏反应 B免疫调理作用C抗肿瘤
8、作用 D同种移植排斥反应37提出单克隆选择学说的是： ( )ABurnet BMetchnikOC了 erne DWatson38可引起新生儿溶血症的抗体是： ( )A天然的血型抗体 IgM B天然的血型抗体 IgGC免疫的血型抗体 IgM D免疫的血型抗体 IgG39主要在黏膜局部抗感染的 Ig 是： ( )AIgG BIgEC工 gA DSIgA40关于 ADCC 的叙述，下列选项正确的是： ( )AIgM 可介导 ADCCBM 不具有 ADCCC CTL 可通过 ADCC 杀伤靶细胞DADCC 的杀伤作用是非特异性的41多数补体灭活温度及时间是： ( ) A56，30 min B4，2
9、hC 一 30，30 min D室温，30 min42经典激活途径中的 C3 转化酶是： ( )AC3bBb BC4b2bCC4b2b3b DC 3bBbp43参与攻膜复合体的有关成分是： ( )AC1 BC3 转化酶CC3b DC5 C944补体活化的 MBL 途径的激活物质是： ( )A抗原抗体复合物B凝集的 IgAC炎症期产生的蛋白与病原体结合DIgGlIgG345产生IL-2 的细胞是： ( )A M BT 细胞 CB 细胞 DNK46IL-2R 主要存在于： ( )A肥大细胞表面 B静止 T 细胞表面C 中性粒细胞表面 D活化的 T 细胞表面47与强直性脊柱炎密切相关的 HLA 分子
10、是： ( )AHLA-5 BHLA-B7CHLA-B8 DHLA-B2748下列选项中具有 MHC 限制性的是： ( )ATC 杀伤靶细胞 BADCCCMci)吞噬抗原 D补体溶菌49一般说，与抗原递呈有关的分子是： ( )AMHC-Il 类分子 BCDl 分子CMHC-工类分子 DMHC- 类分子50MHC 是指： ( )A染色体上编码组织相容性抗原的一组紧密连锁的基因群B染色体上编码次要组织相容性抗原的一组紧密联系的基因群C染色体上编码移植抗原的一组紧密连锁的基因群D染色体上编码主要组织相容性抗原的一组紧密连锁的基 因群51同时表达 CD3 和 CD4 抗原的细胞有： ( )ATc 细胞
11、BTs 细胞CB 淋巴细胞 D Th 细胞52能通过 ADCC 作用杀伤肿瘤细胞的是： ( )ACTL 细胞 BNK 细胞C中性粒细胞 DB 细胞53抗原抗体反应的第一阶段一般需要的时间是： ( )A几分钟至几十分钟 B几十分钟至数小时C几秒钟至几分钟 D数小时至数十小时54以免疫复合物/补体为介导的组织炎症为特征的过敏反应属于： ( )A 工型 B 型C型 D型55下列 CD 标志物不是 T 细胞的表面标志物的是： ( )ACD3 BCDl9CCDl6 DCD856下列试验不属于沉淀反应的是： ( )A免疫比浊法 B双向免疫扩散法C单向免疫扩散法 DCoombs 试验57间接凝集反应的灵敏度
12、要比直接凝集反应高： ( )A12 倍 B28 倍C8 一 10 倍 D10100 倍58下列抗体中不属于自身抗体的一种是： ( )A抗核抗体(ANA) B类风湿因子C抗 D D抗 SS-B(La)59下列 CD 标志可作为 NK 细胞的表面标志物的是： ( )ACD8 BCDl6CCDl9 DCD260成人血清中 AFP 极微，其含量一般小于： ( )A10 gL B20gLC25gL D200gL二填空题1异嗜性抗原是一类与 无关的，存在于人、动物、植物、微生物中的共同抗原。2抗原抗体反应的可逆性特点是指抗原抗体的结合仅是分子面的结合，属 结合，这种结合具有相对 ，但为 反应。3抗原抗体反
13、应一般在 pH 的条件下进行。4自身免疫反应如果达到一定强度以致能破坏 并引起相应 时，则称为自身免疫病。5抗 DNA 抗体有 3 类，即抗 Ds-DNA、 和 。6T 细胞表面的 分子是 HIV 的天然受体。7GVHR 是指移植物中的 淋巴细胞识别 抗原而发生的一种排斥反应。8AFP 主要用于高危人群中诊断 肿瘤和 肿瘤。9沉淀反应分两个阶段：第一阶段发生抗原抗体 结合，第二阶段将形成可见的 。10直接 Coombs 试验主要检测已吸附在 上的不完全抗体；间接Coombs 试验主要检测 中游离的不完全抗体。11ELISA 间接法的反应原理是利用酶标记的 以检测已与固相结合的 。12ELISA
14、 的洗涤目的是洗去反应液中没有与固相 或 结合的物质以及反应过程中吸附于固相载体的干扰物质。13TRFIA 一般是用镧元素 螯合物作为荧光标记物14RIA 的基本原理是 抗原和 抗原对有限量抗体竞争性 或竞争性 反应。15工型超敏反应主要检测血清中 和 ，临床提供实验室诊断资料。三简答题1比较补体两条主要激活途径的不同点。2补体的生物学活性是什么?3细胞因子的生物学作用特点是什么?4试论 MHC 在医学上的意义。5参与体液免疫应答的细胞有哪些?如何发挥作用?6什么是自身抗原?它是怎样产生的?有何临床意义?7试述抗原抗体反应的基本原理。8简述 HVGR 和 GVHR 的主要区别。9T 细胞亚群检
15、测有何临床意义?10简述 ELISA 的基本原理。11试述直接 Coombs 试验与间接 Coombs 试验的共同点与不同点。12简述 ELISA 双抗体夹心法的操作步骤。13ELISA 操作的注意事项有哪些 ?14试述流式细胞术(FCM)的工作原理及其特点。参 考 答 案选择题1A 2D 3D 4C 5D 6。A 7A8B 9A 10B 11A 12D 13A 14D15A 16D 17D 18B 19A 20 D 21C22D 23D 24C 25C 26A 27B 28B29A 30B 31D 32B 33B 34D 35B36B 37A 38D 39D 40D 41 A 42B43。D
16、 44C 45B 46D 47D 48A 49C50D 51D 52B 53C 54C 55B 56D57B 58C 59B 60 B填空题1种属特异性2非共价键 稳定性 可逆3684正常组织 临床症状5抗 ssDNA 抗 ZDNA6CD47抗原特异性 宿主8原发性肝脏 胚胎细胞9特异性 免疫复合物 、10红细胞 血清11抗抗体 受检抗体12抗原 抗体 非特异性13铕(Eu)14标记 未标记 结合 抑制15IgE 抗特异性过敏原抗体简答题1两条激活途径的主要不同点：比较项目 经典激活途径 旁路激活途径激活物质 抗原抗体复合物 LPS 酵母多糖凝聚的 IgG、IgA等激活的起点 Clq C3比较
17、项目 经典激活途径 旁路激活途径 参与成分 C1C9 C3BDP 因子，C5 一 C9C3 转化酶 C4b2b C3bBbpC3 转化酶 C4b2b3b， C3bnBbp：作用 在特异性体液免疫 参与非特异性免疫，在感染阶段发挥作用 早期即发挥作用2补体的生物学活性是指补体活化、过程的产物表现出的具有扩大免疫效应的多项生物学活性，根据这些产物的活性特点可分为五类。(1)细胞溶解作用即膜攻击作用新生的 C5b 可插入就近的细胞膜上，进而有C6C7 和 C9 与膜上有 C5b 组成膜攻击单位 C5b67 89n，构成可让细胞膜内外物质自由出入的通道壁，造成细胞或细菌的破裂死亡。(2)调理作用与病原
18、体或免疫复合物共价键结合的 C3b，还可与吞噬细胞表面的C3b 受体 (CRl)结合，以促进其吞噬过程，成为补体的调理作用。(3)引起炎症反应引起炎症反应( 的物质)，C3a、C4aC5a 有过敏毒素作用，C5a有对粒细胞的趋化作用，其综合作用效果是导致组 织充血、水肿及渗出等炎症表现。 (4)清除免疫复合物即补体(C3b) 的免疫粘连作用在替代活化途径和经典活化途径新产生的 C3b，都可以借其不稳定的硫酯键断裂，直接与病原体( 或其成分)或免疫复合物中的抗原成分共价性结合。和病原体或免疫复合物共价结合的 C3b，可再与血小板或人红细胞表面的 C3b 受体 (CRl)结合，使这些病原体或免疫复
19、合物黏附于血小板或人的红细胞上，成为免疫黏连作用。免疫黏连作用不仅可减少血液中游离的免疫复合物及病原体，而且被黏附于血小板或红细胞表面的免疫复合物或病原体易被吞噬细胞捕捉吞噬，消除它们对机体的危害。(5)免疫调节作用补体可对免疫应答的各个环节发挥调节作用：C3 可参与捕捉固定抗原，使抗原被 APC 处理与提呈；补体成分可与多种免疫细胞相互作用，调节细胞的增殖分化，例如 C3b 与 B 细胞表面 CRl 结合，可使 B 细胞增殖分化为浆细胞。 CR2能结合 C3d、iC3b 及 C3Dg，助 B 细胞活化；补体参与调节多种免疫细胞效应功能，如杀伤细胞结合 C3b 后可增强对靶细胞的 ADCC 作
20、用。3(1)细胞因子的作用高效性：极微量(Pg 水平) 即可发挥生物学效应。细胞因子的旁泌和自泌作用自产生分泌出来后作用于附近的细胞或自身产生细胞。(2)细胞因子作用的一时性：只在局部短时间发挥作用，临床上细胞因子作为药物治疗时，在药理剂量下也可随血流分部全身发挥作用。(3)细胞因子作用的多效性：种细胞因子可作用于多种靶细胞，发挥多种生物学效应如促进靶细胞增殖分化，增强抗感染和杀伤效应，促进或抑制其他细胞因子的产生和细胞膜表面分子的表达。(4)细胞因子作用的网络性：不同的细胞因子之间有相互协同或相互制约的作用，由此构成了复杂的细胞因子免疫调节网络，如 IL-1 又到产生 IL-2，IL-10
21、抑制丁干扰素产生4MHC 在医学上的意义如下：(1)器官移植：移植排斥反应的实质是免疫应答，故移植成败的关键是供受者间MHC 的相容程度。(2)免疫调节：抗原提呈：无论外源性抗原还是内源性抗原大多需经细胞加工处理后形成抗原肽段，再与 HLA工类分子结合，HLA抗原肽复合物共同表达于细胞膜表面，才能被 CD8+T 细胞或 CD4T 细胞所识别；MHC 限制性：在免疫应答过程中各种免疫细胞如 Th、Mrl) 、B 及 TC 细胞间的相互作用均受到不同的 MHC 分子的调控或严格的约束。例如，TC 细胞识别病毒抗原或肿瘤抗原时必须识别自身 MHC工类分子；而 Th 细胞识别的抗原肽必须是与自身 MH
22、C 类分子结合者。这种特定 T 细胞识别特定类别自身 MHC 分子而发挥效应的现象称 MHC 限制性；决定免疫应答能力：在 HLA类基因区有一免疫应答基因工 r，可对免疫应答进行调节，包括增进免疫应答或抑制免疫应答。(3)HLA 与疾病的关系：人类 MHC 即 HLA 复合体是目前已知的最复杂多态性的人类基因系统，在人类证实强直性脊柱炎与 B27 有强相关性后，通过群体的流行病学调查和家系调查发现许多内分泌疾病类风湿性疾病自身免疫性疾病肿瘤和感染性疾病等与 HLA 有关。 HLA 与疾病易感染相关的主要位点是 DR3DR4 和 B27 等。5胸腺依赖抗原(TD-Ag)次级 B 细胞产生抗体有下
23、述细胞参加反应。(1)抗原呈递细胞(APC) ：主要是单核巨噬细胞类将处理的抗原提呈给 Th 细胞并分泌 IL-1，IL-6 活化 T 细胞。(2)Th 细胞：经抗原刺激活化后分泌细胞因子，特别是 Th2 细胞分泌 IL-4、IL-5、IL-10 等，除辅助 B 细胞活化分化变成浆细胞产生抗体，还有调节抗体产生的作用。(3)B 细胞：经抗原次级后变成浆细胞合成并分泌抗体，在对应抗原再次应答时 B细胞是主要的抗原提呈细胞(APC) ，可处理并提呈抗原给 Th 细胞，使之活化。(4)非胸腺依赖抗原(T 工Ag)直接刺激 B 细胞产生 IgM 类抗体，如脂多糖或肺炎球菌荚膜多糖抗原可直接与 B 细胞
24、表面的工 g 结合，刺激其分化为浆细胞。6一般来说，自身物质对自身没有抗原性。在一定条件下，自身物质对自身发挥抗原作用，引起免疫应答，称之为自身抗原。自身抗原产生的原因：(1)隐蔽的自身抗原：某些自身物质在正常条件下与血流和免疫系统相对隔绝，称为隐蔽的自身抗原。外伤、感染或手术不甚等原因，使这些物质进入血流，引起自身免疫应答。例如眼外伤后，眼葡萄膜色素和眼晶体蛋白释放可引起交感性眼炎和过敏性眼炎；精子抗原释放引起男性不育症；甲状腺球蛋白释放引起变态反应性甲状腺炎；脑脊液和周围神经的髓鞘蛋白的释放引起脱髓鞘脑脊髓炎和外周神经炎。 (2)修饰的自身抗原：在病原微生物感染电离辐射或药物等影响下，自身
25、组织分子改变，形成新的抗原决定簇或暴露出内部的隐蔽的决定簇，成为自身抗原刺激机体产生免疫应答，引起自身免疫疾病。例如，服用氨基比林或甲基多巴，可改变粒细胞或红细胞表面的化学结构，出现新的抗原决定簇，从而引起粒细胞减少症或自身免疫性溶血性贫血。7抗体能够特异性结合是基于两种分子间的结构互补性与亲和性，这两种特性是由抗原与抗体分子的一级结构决定的。抗原抗体反应分为两个阶段：第一阶段为抗原与抗体发生特异性结合阶段，此阶段反应快，仅需几秒钟至几分钟，但不出现可见反应。第二阶段为可见反应阶段，抗原抗体复合物在环境因素(如电解质、 pH、温度、补体)的影响下，进一步交联和聚集，表现为凝集、沉淀、溶解、补体
26、结合介导的生物现象等肉眼可见的反应。此阶段反应慢，往往需要数分钟至数小时。8HVGR 和 GVHR 的主要区别在于HVGR 是由宿主体内致敏的免疫效应细胞和抗体对移植物进行攻击，导致移植物排斥；而 GVHR 是由移植物中的抗原特异性淋巴细胞，即“过路”淋巴细胞识别宿主抗原而发生的一种排斥反应。这种反应不仅导致移植失败，而且还能给受者造成严重后果。9T 细胞亚群检测已作为临床辅助诊断与研究的一种重要手段，对各种疾病如自身免疫病、免疫缺陷病、病毒感染、恶性肿瘤等的发生、发展、临床疗效考核和预后估计都具有极其重要的义；对了解机体的免疫状态也有十分重要的意义。10ELISA 的基本原理是： 使抗原或抗
27、体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或酶标抗体，这种酶标抗原或酶标抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，令受检标本( 测定其中的抗原或抗体)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化形成有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，故可极大地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度 o11直接 Coomb
28、s 试验主要用于检查已吸附在红细胞上的不完全抗体。此试验常用于新生儿溶血症、自身免疫性溶血症及特发性自身免疫性贫血等检查。间接 Coombs试验主要用于检查血清中游离的不完全抗体。此试验多用于检测母体 Rh(D)抗体，可及早发现和避免新生乙溶血症的发生。亦可对红细胞抗原不相容性输血所产生的血型抗体进行检测。12ELISA 双抗体夹心法的主要操作步骤如下：(1)特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体：洗涤除去未结合的抗体及杂质。(2)加受检标本：使之与固相抗体接触反应一段时间，让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合，形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。(3)加酶抗体：使固相免疫复合物上
29、的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的，酶量与标本中受检物质的量呈正相关 o(4)加底物：夹心复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。13ELISA 操作注意事项如下：(1)加样：在 ELISA 中除了包被外，一般需进行 45 次加样。在定性测定中有时不强调加样量的准确性，例如规定为加样 l 滴。此时应该使用相同口径的滴管，保持准确的加样姿势，使每滴液体的体积基本相同。在定量测定中则加样量应力求准确。 ，标本和结合物的稀释液应按规定配制。加样时应将液体加在孔底，避免加在孔壁上部，并注意不可出现气泡。(2)孵育：在 ELISA 中
30、一般有两次抗原抗体反应，即加标本和加结合物后，此时反应的温度和时间应按规定的要求，保温容器最好是水浴箱，可使温度迅速平衡。各 ELISA板不应叠在一起。为避免蒸发，板上应加盖，或将平板放在底部垫有湿纱布的湿盒中。湿盒应该是金属的，传热容易。如用保温箱，空湿盒应预先放在其中，以平衡温度，这一步骤在室温较低时更为重要。加入底物后，反应时间和温度通常不做严格要求。(3)洗涤：洗涤在 ELISA 过程中虽不是反应步骤，但却是决定成败的关键。洗涤的目的是洗去反应中没有与固体抗原或抗体相结合的物质以及在反应过程中非特异性吸附于固体载象的干扰物质（4）显色及终止反应：显色是酶促反应，应按规定的温度和时间操作，用酸终止。(5)结果判断：用比色计测定结果，准确性决定于 ELISA 板底的平整与透明度和比色计的质量。14经过荧光抗体染色的单细胞悬液和鞘液在氮气压力下同时进入流室，形成鞘液包裹细胞悬液的稳定层流，由喷嘴高速射下(1 0005 000 个细胞s)，与垂直而来的激光束交会。在混合细胞中，由于细胞大小胞内颗粒多少以及 DNA 含量等不同，使激光产生不同的散射，分别由散射光检测接受；细胞上着染的荧光染料在激光激发下，辐射出荧光，由荧光检测器接受。所有信号自动传人电子计算机分析处理，以获得检测结果。
