1、 乳酸的测定EDTA 滴定乳酸钙法1 实验原理1.1 乙二胺四乙酸（简称 EDTA，常用 H4Y 表示）难溶于水，通常使用其二钠盐配制标准溶液。标定 EDTA 溶液常用的基准物有Zn、ZnO、CaCO 3、Bi、Cu、 MgSO47H2O、Hg 、Ni、Pb 等。通常选用其中与被测组分相同的物质作基准物，这样滴定条件较一致。EDTA 溶液若用于测定石灰石或白云石中 CaO、MgO 的含量，则宜用 CaCO3 为基准物。首先可加 HCl 溶液与之作用，其反应如下：CaCO3+2HClCaCl 2+H2O+CO2然后把溶液转移到容量瓶中并稀释，制成钙标准溶液。吸取一定量钙标准溶液，调节酸度至 pH
2、12，用钙指示剂作指示剂以 EDTA 滴定至溶液从酒红色变为纯蓝色，即为终点，其变色原理如下：钙指示剂（常以 H2Ind 表示）在溶液中按下式电离：H3Ind2H +HInd2-在 pH12 溶液中，HInd 2-与 Ca2+离子形成比较稳定的络离子，反应如下：HInd2-+Ca2+CaInd -+H+纯蓝色 酒红色所以在钙标准溶液中加入钙指示剂，溶液呈酒红色，当用 EDTA 溶液滴定时，由于 EDTA 与 Ca2+离子形成比 CaInd-络离子更稳定的络离子 CaY2-，因此在滴定终点附近，CaInd -络离子不断转化为较稳定的 CaY2-络离子，而钙指示剂则被游离了出来，其反应可表示如下：
3、CaInd-+H2Y2-CaY 2-+ HInd2-+H2O酒红色 无色 纯蓝色由于 CaY2-离子无色，所以到达终点时溶液由酒红色变成纯蓝色。用此法测定钙，若 Mg2+离子共存（在调节溶液酸度为 pH12 时，Mg 2+离子将形成 Mg(OH)2 沉淀），此共存的少量 Mg2+离子不仅不干扰钙的测定，而且会使终点比Ca2+离子单独存在时更敏锐。当 Ca2+、Mg 2+离子共存时，终点由酒红色变到纯蓝色，当 Ca2+离子单独存在时则由酒红色变紫蓝色，所以测定单独存在的 Ca2+离子时，常常加入少量 Mg2+离子溶液。滴定至终点后蓝色很快又返回至紫红色又称终点回头。此现象是由钙镁盐类的悬浮性颗粒
4、所致，影响测定。存在这样情况，可加盐酸酸化，便可除去碱度，后用NaOH 溶液中和。 2 器皿和试剂酸式滴定管；乙二胺四乙酸二钠(C10H14N2Na2O8.2H2O)，CaCO 3，镁溶液（溶解1g MgSO47H2O 于水中，稀释至 200mL），NaOH 溶液（20% 溶液），盐酸溶液（1+1）钙指示剂（固体指示剂）3 实验步骤3.1 0.05molL-1EDTA 溶液的配制：准确称取乙二胺四乙酸二钠 18.612g，溶解于 500-600mL 水中，稀释至 1L，如混浊，应过滤，转移至 1000mL 细口瓶中，摇匀。3.2 以 CaCO3 为基准物标定 EDTA 溶液3.2.1 0.05
5、molL-1 钙标准溶液的配制：置 CaCO3 基准物于称量瓶中，在 110C 干燥 2 小时，冷却后，准确称取 1.25-1.30g 碳酸钙于 150mL 烧杯中，盖上表面皿，加水润湿，再从杯嘴边逐滴加入数毫升HCl 溶液（1+1）淋洗入杯中，直至 CaCO3 完全反应，待冷却后转移至 250mL 容量瓶中，洗净表面皿物质至容量瓶，稀释至刻度，摇匀。计算准确浓度 C0。3.2.2 用钙标准溶液标定 EDTA 溶液：用移液管移取 25.00mL 标准钙溶液于 250mL 锥形瓶中，加入约 25 mL 水，2mL镁溶液，5mL20%NaOH 溶液,2mLHCl 溶液（1+4）及约 10mg（米粒
6、大小）钙指示剂，摇匀后，用 EDTA 溶液滴定至溶液从红色变为纯蓝色，即为终点。测定三次，取平均值。3.3 用 EDTA 溶液滴定乳酸钙：取发酵液 2ml，滴到盛有 50mL 蒸馏水的 250mL 锥形瓶中，加 2mL 镁溶液，5mL20%NaOH 溶液,2mLHCl 溶液（1+4）及约 10mg（米粒大小）钙指示剂，摇匀后，用 EDTA 溶液滴定至溶液从红色变为纯蓝色，即为终点。测定平行样，取平均值。4 计算C1=C0*25/V1C1 EDTA 标准溶液浓度（mol/L）C0 CaCO3基准溶液浓度（mol/L）V1 25mLCaCO3 基准液消耗 EDTA 溶液体积（mL）W1=C1*(V
7、2/1000)*218.2/(2/1000)=C1*V2*308.3/2W1 乳酸钙（CH 3CHOHCOO2Ca5H2O） 含量（g/L） C1 EDTA 标准溶液浓度（mol/L）V2 发酵液消耗 EDTA 溶液体积（mL）308.3乳酸钙(（CH 3CHOHCOO） 2Ca5H2O）摩尔质量（ g/mol）W2=2*C1*(V2/1000)*90/(2/1000)=2*C1*V2*90/2=90*C1*V2W2 乳酸含量（g/L） C1 EDTA 标准溶液浓度（mol/L）V2 发酵液消耗 EDTA 溶液体积（mL）90 乳酸（CH 3CHOHCOOH）摩尔质量（g/mol）*一分子乳酸钙由两分子乳酸和一分子 Ca2+ 结合而成。
