1、临床细菌检验标本采集指南1所有标本的采集、运送和处理应在无菌操作，防止污染原则下认真进行。2已采集原始标本都应置于、密封的容器中运送，含有明显区分各部门文字标志。3带针头的注射器运送标本到实验室，用无菌试管或防护装置套住注射针，再置于防漏塑料袋中运送。4避免来自寄生菌的污染，应当保证每份标本代表感染过程。健康宿主在感染的许多部位也可出现的正常菌丛，主要来自皮肤、黏膜和呼吸道，它若过早、过度生长，掩蔽了真正的病原菌，干扰培养结果解释。5采集足够量标本，材料不足可能产生假阴性结果。6已采集标本，常规性细菌学检验，不超过1 h送交实验室，延迟运送影响病原菌检出。血液和骨髓标本的采集1菌血症患者多数为
2、间歇性，病原菌是周期性出现在血液中，随之无细菌时期。不管临床症状经历的严重程度，但患者血液中病原菌浓度水平相当低，据此要求临床多次采集血液标本进行培养，但24 h内一般不超过3次，成人每次血量10 -20 ml可提高阳性检出率。2血标本接种到培养瓶后，轻轻混匀以防血液凝固。立即送检，如不能立即送检，需室温保存或置3537孵箱中，切勿冷藏。3一般患者出现以下一种体症时可作为采血的重要指征：发热(38)或低温(36)，寒战，白细胞增多，皮肤粘膜出血，昏迷，多器官衰竭，血压降低，CRP升高及呼吸快，特殊患者(如血液病)出现粒细胞减少，血小板减少等，或同时具备上述几种体症的临床可疑菌血症应采集血培养。
3、新生儿菌血症，应该增加尿液和脑脊液培养。对入院危重感染患者在未进行系统性抗菌药物治疗之前，应及时采集血培养。4采血培养应该尽量在使用抗菌药之前进行，在24h内采集23份血培养(一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养)。对间歇性寒战或发热应在寒战或体温高峰到来之前0.51h采血液，或于寒战或发烧后lh进行。5不明原因发热，如隐性脓肿，伤寒热和波浪热，先采集23份血标本，2436 h后估计体温升高之前(通常在下午)再采集2份以上。6急性脑膜炎炎、骨髓炎、关节炎、细菌性肺炎和肾孟肾炎发热患者，应在抗生素治疗或更换前，从不同部位采集血液标本，做2次血液培养(应在抗生素治疗前完成) 。7疑似心内
4、膜炎患者：急性病例，在抗生素治疗或改变前1 - 2h ，从各个不同部位采血3次做血液培养。亚急性病例，第一天24 h内，相隔1 h连续采集3次血标本培养，若24 -48 h全部阴性，再采集2 -3次血标本培养。若已经抗生素治疗患者，连续3天，每天取2次血液标本。8皮肤消毒程序：严格执行以下三步法：1）70酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上。2)12碘酊作用30s或10碘伏60s，从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径达3cm以上。3)70酒精脱碘。对碘过敏的患者，用70酒精消毒60s，待酒精挥发干燥后采血。9培养瓶消毒程序1)70酒精擦拭血培养瓶橡皮塞，作用60s。2)用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮
5、塞子表面残余酒精，然后注入血液。如果是自配带塞子的三角瓶，此步骤可免去。10静脉穿刺和培养瓶接种程序1)在穿刺前或穿刺期间，为防止静脉滑动，可戴乳胶手套固定静脉，不可接触穿刺点。2)用注射器无菌穿刺取血后，勿换针头(如果行第二次穿刺，应换针头)直接注入血培养瓶，如果是自配带塞子的三角瓶，严格无菌操作将血液注入三角瓶内，应烧瓶口，避免采血针头与三角瓶瓶口和瓶塞接触。11采血量：成人采血量是5l0ml，儿童l5ml,骨髓l2ml。血液和肉汤之比为1：5l：10为宜。附血管内导管尖端培养1.用酒精清洁导管周围皮肤。2. 无菌手续移动导管，剪取尖端末段5 cm ，直接置入无菌试管中。3. 立即运送到细
6、菌实验室，防止干燥，常规培养不超过15min ,4 保存不越过2 h。4只有当做血液培养的同时，做血管内导管尖端培养，确定患者菌血症的来源。或是抽取新鲜脓性标本培养，确定软组织相关感染，并做在附近有插入导管的尖端段培养。脑脊液标本的采集CSF采集后，置于无菌带塞试管中，15min内运送实验室，绝不可冷藏。一般细菌培养检验最小量1ml，真菌2ml。尿液标本的采集1有下列情况之一者，应进行尿培养(1)有典型的尿路感染症状；(2)肉眼脓尿或血尿；(3)尿常规：白细胞和或亚硝酸盐阳性；(4)不明原因的发热，无其他局部症状；(5)留置导尿管的病人出现发热；(6)膀胱排空功能受损；(7)泌尿系统疾病手术前
7、。2注意尽量采集晨尿标本，睡前少饮水，以免稀释尿液，应保证尿液在膀胱内停留4h以上。3中段尿采集清洁外阴反尿道口周围，自然排尿，让尿流不间停，截留中段尿，置于无菌容器中，不少于1 ml。4直接插导管采集尿标本一般插入导管后。先让尿流弃15 ml 再留取培养标本。尽情不采用导管采集标本，极容易将尿道细菌丛进入膀胱，增加医源性感染危险。5滞留导管集尿用70% 酒精消毒导管口，用针筒抽取5 - 10 ml尿，置于无菌容器中送实验室。操作时注意防止混入消毒剂。不能采集收集袋中的尿液。滞留导管会使膀胱带有细菌，尽可能不采用。6标本采集后，常规2 h 送交实验室。下呼吸道标本的采集有以下任何一种情况时建议
8、采集标本进行培养：(1)咳嗽；(2)咯血；(3)呼吸困难； (4)发热伴白细胞增高尤其是中性粒细胞或CRP明显增高情况者。1自然咳痰法以晨痰为佳，采集标本前应用清水、冷开水漱口或牙刷清洁口腔和牙齿，有假牙者应取下假牙。尽可能在用抗菌药物之前采集标本。用力咳出呼吸道深部的痰，痰液直接吐入无菌、清洁、干燥、不渗漏、不吸水的广口带盖的容器中，标本量应lml。咳痰困难者可用雾化吸入加温至45的100gL NaCl水溶液，使痰液易于排出。标本应尽快送检，不能及时送检的标本，室温保存2h。2支气管镜采集法、防污染毛刷采集法、环甲膜穿刺经气管吸引法、经胸壁针穿刺吸引法和支气管肺泡灌洗法均由临床医生按相应操作规程采集，但必须注意采集标本时尽可能避免咽喉部正常菌群的污染。3小儿取痰法用弯压舌板向后压舌，将拭子伸入咽部，小儿经压舌刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。幼儿还可用手指轻叩胸骨柄上方，以诱发咳痰。粪便标本的采集当腹泻患者出现以下任何一种情况时建议采集粪便标本，进行细菌培养：(1)粪便涂片镜检白细胞5HP；(2)重症腹泻；(3)
