1、人民卫生出版社 口腔生物学 第四版第七章 口腔生物学实验教程 人民卫生出版社 口腔生物学 第四版提要： 口腔生物学实验教程是针对口腔生物学理论课设计的实验指导内容。其教学目的是让学生通过实验，掌握基本的口腔生物学研究技术和方法，加深对理论课所学知识的理解，培养学生对口腔医学基础研究的兴趣，了解基本的科研设计思路，启发学生的科研思维。人民卫生出版社 口腔生物学 第四版内容目录第一节 口腔微生物学实验实验 一 菌斑的采集、染色和观察、分类 实验 二 变异 链球菌的分离和鉴定实验 三 细菌 代谢酸的测定实验 四 细菌 细胞外葡聚糖的测定实验 五 菌 斑中 pH值的测定第二节 口腔生物化学实验实验 六
2、 龈沟 液中碱性磷酸酶活性的测定实验 七 唾液钙和磷含量的测定实验 八 唾液 分泌情况的测定 人民卫生出版社 口腔生物学 第四版第三节 口腔疾病分子生物学实验 九 以 釉原蛋白基因进行性别鉴 定第四节 骨组织生物学和口腔细胞培养实验 十 成骨细胞 的分离培养实验 十一 成骨细胞 的分离培养实验 十二 MTT法检测细胞活性实验 十三 肿瘤 细胞迁移实验（细胞划痕法）内容目录人民卫生出版社 口腔生物学 第四版第一节 口腔微生物学实验人民卫生出版社 口腔生物学 第四版实验一 菌斑的采集、染色和观察、分类实验目的与要求 :掌握牙菌斑 标本 的采集、处理和常用染色 刚果红（ congo red）负性染色
3、的主要程序和方法，熟悉龈上或龈下菌斑中常见细菌的形态及分类方法。实验内容 :菌斑标本的采集；细菌涂片的制备、染色；染色细菌的观察及 Listgarten分类。实验设备 和器材等用品： u 香柏油，二甲苯，菌斑染色剂，酒精，浓盐酸和灭菌的液状石蜡等。u 无菌牙科镊子、挖匙或探针（龈上菌斑检查用），载玻片，灭菌取菌环可卸式取菌器或消毒滤纸（龈下菌斑采集用），含预还原转送培养基的带盖小瓶 ， 普通光学显微镜，试镜纸，细菌接种环及装有固体培养基的培养皿等。第一节 口腔微生物学实验人民卫生出版社 口腔生物学 第四版实验 方法 ：漱口、隔湿 刮取牙面菌斑可摘式取菌器或灭菌纸尖吸取龈沟或牙周袋菌斑立即置转送
4、液中密闭震荡、分散菌斑团块涂片革兰负性染色观察细菌形态分类菌斑采集和处理染色观察分类第一节 口腔微生物学实验人民卫生出版社 口腔生物学 第四版 龈沟内采集法 牙周袋内采集法 龈沟或牙周袋的龈下菌斑采集法第一节 口腔微生物学实验人民卫生出版社 口腔生物学 第四版刚果红负性染色方法：Listgarten的分类标准：载玻片一端滴一滴 2%刚果红染液加入待见样本混合后推片置浓盐酸上熏至变红色推片置显微镜下观察u球菌：菌细胞直径 0.5m 1.0m，包括少量球杆菌；u直杆菌：菌细胞宽 0.5m 1.5m，长 1.0m 1.9m，包括部分分支杆菌；u丝状菌：菌细胞宽 0.5m 1.5m，长与宽之比大于 61，菌细胞多为不规则的长丝状杆菌；u梭状菌：菌细胞直径 0.3m 1.0m，长约 10m，其末端呈梭状；u弯曲杆菌：菌细胞呈新月形或弯曲状；u螺旋体：菌细胞宽 0.2m 0.5m，长约 10m 20m，螺旋形，包括大、中、小三种螺旋体。第一节 口腔微生物学实验人民卫生出版社 口腔生物学 第四版实验结果与分析：注意事项：1.染色操作中，用浓盐酸熏蒸涂片时要小心。2.该法不能检测细菌的活动性，但染色涂片可长期保存。思考题 ：刚果红负性染色有何优点？菌斑采集时应该注意什么？龈上菌斑涂片刚果红负性染色结果第一节 口腔微生物学实验
