1、第十四章 临床免疫检验自动化分析免疫检验自动化 ( automation of immunoassays) 是将免疫学反应检测过程中的取样、加试剂、混合、温育、固相载体分离、信号检测、数据处理、打印报告和检测后的仪器清洗等步骤由计算机控制,自动化进行。 20世纪 50-80年代 :免疫学检测主要是 手工操作 20世纪 80年代末 :随着单克隆抗体技术、免疫标记技术以及计算机技术的出现, 自动化免疫分析技术 引入临床- 提高检测灵敏度,增加检测项目- 缩短检测时间- 提高实验结果的精确度和准确度自动化免疫分析仪的共同特点计算机系统样本处理系统自动稀释自动进样自动清洗主机系统温育反应系统信号检测系
2、统信号处理及数字转换信号储存分析报告试剂系统免疫自动化仪器分析技术第一节 免疫浊度测定的自动化分析第二节 发光免疫测定的自动化分析第三节 荧光免疫测定的自动化分析第四节 酶联免疫测定的自动化分析第一节免疫浊度测定的自动化分析免疫浊度分析的基本原理是:抗原、抗体在特定的电解质溶液中反应,形成小分子免疫复合物( 19S),使反应液出现浊度。在抗体稍微过量且固定的情况下,形成的免疫复合物量随抗原量的增加而增加,反应液的浊度亦随之增大,即待测抗原量与反应溶液的浊度呈正相关。 自动化免疫浊度分析一定波长的入射光线通过抗原抗体反应后的溶液时,被其中的免疫复合物微粒吸收、反射和折射而减弱,在一定范围内, 吸
3、光度 与免疫复合物量呈正相关,而形成的免疫复合物量与参与反应的抗原和抗体的量呈 正相关 。与已知浓度的抗原标准品比较,可确定标本中抗原含量。一、免疫透射比浊法(一) 原理:1.将待检标本和抗原参考品作适当稀释。(二)仪器工作过程2.将待测标本和标准抗原溶液( 5个浓度抗原标准品)与适当过量的抗血清混合,在一定条件下,抗原抗体反应完成后,在 340nm处测定各管吸光度。3.按 log-logit转换或 y=ax3+bx2+cx+d方程进行曲线拟合,制备剂量 -反应曲线,由计算机处理,计算出抗原浓度。(三)方法评价 优点 :灵敏度高,稳定性好,操作简便,结果准确不足 : 抗体用量较大; 溶液中存在的抗原抗体复合物分子应足够大 透射比浊测定在抗原抗体反应的第二阶段,检 测需在抗原抗体反应达到平衡后进行,耗时较长。