芳酸类药物的质量控制.doc

1、 1芳 酸 类 药 物 的 质 量 控 制第 一 节 典 型 药 物 与 结 构 特 点非 甾 体 抗 炎 药 (Nonsteroidal Antiinflammatory Drugs， NSAIDs)是一 类 不 含 有 甾 体 骨 架 的 抗 炎 药 ， 是 目 前 临 床 使 用 最 多 的 药 物 种 类 之 一 。本 类 药 物 具 有 抑 制 前 列 腺 素 的 合 成 ， 进 而 发 挥 抗 炎 、 抗 风 湿 、 止 痛 、 退热 和 抗 凝 血 等 作 用 ， 在 临 床 上 广 泛 用 于 风 湿 性 关 节 炎 和 类 风 湿 关 节 炎 、多 种 发 热 和 各 种 慢

2、 性 疼 痛 ， 如 头 痛 、 关 节 肌 肉 疼 痛 、 牙 痛 等 症 状 的 缓 解 。本 类 药 物 具 有 不 同 的 化 学 结 构 ， 但 多 数 具 有 芳 酸 基 本 结 构 ， 即 芳 基 取 代羧 酸 结 构 。 本 类 药 物 的 结 构 特 点 为 同 时 具 有 游 离 羧 基 和 苯 环 ， 其 酸 性 特征 可 作 为 原 料 药 的 含 量 测 定 基 础 ， 即 在 中 性 乙 醇 或 其 他 水 溶 性 有 机 溶剂 中 ， 用 氢 氧 化 钠 滴 定 液 直 接 滴 定 ； 苯 环 的 紫 外 光 吸 收 特 性 常 被 用 于 本类 药 物 的 鉴

3、别 、 定 量 检 查 及 部 分 制 剂 的 含 量 测 定 。 本 类 药 物 的 酯 类 易 于水 解 的 特 性 决 定 了 其 特 殊 杂 质 检 查 的 项 目 与 方 法 ； 如 阿 司 匹 林 中 游 离 水杨 酸 的 检 查 ， ChP 曾 采 用 三 价 铁 比 色 法 检 查 ； 但 由 于 在 供 试 品 溶 液 制 备过 程 中 阿 司 匹 林 的 继 续 水 解 使 检 查 结 果 不 稳 定 ； 所 以 ChP2010 采 用1%冰 醋 酸 甲 醇 溶 液 制 备 供 试 品 溶 液 ， 以 防 阿 司 匹 林 的 水 解 ， 增 加 稳 定 性 ，同 时 采 用

4、 高 效 液 相 色 谱 法 (HPLC)检 查 ， 以 提 高 检 查 结 果 的 可 靠 性 。芳 酸 类 非 甾 体 抗 炎 药 物 在 结 构 上 具 有 苯 环 和 羧 基 。 羧 基 可 呈 游 离态 ， 如 水 杨 酸 、 阿 司 匹 林 、 双 水 杨 酯 、 二 氟 尼 柳 、 甲 芬 那 酸 、 布 洛 芬 、酮 洛 芬 、 萘 普 生 、 吲 哚 美 辛 等 ； 羧 基 也 可 成 盐 或 成 酯 ， 如 双 氯 芬 酸 钠 、双 水 杨 酯 等 ； 也 可 呈 酰 胺 结 构 ， 如 吡 罗 昔 康 、 美 洛 昔 康 等 。 本 类 药 物在 苯 环 上 亦 存 在

5、不 同 的 结 构 特 征 ， 如 水 杨 酸 、 阿 司 匹 林 、 双 水 杨 酯 、二 氟 尼 柳 等 具 有 邻 羟 基 (游 离 或 酯 化 )苯 甲 酸 结 构 ； 甲 芬 那 酸 具 有 邻 胺基 苯 甲 酸 结 构 ； 酮 洛 芬 具 有 二 苯 甲 酮 结 构 ； 吡 罗 昔 康 和 美 洛 昔 康 具 有-羟 基 -不 饱 和 酮 结 构 ； 吲 哚 美 辛 、 吡 罗 昔 康 和 美 洛 昔 康 具 有 杂 环结 构 ； 二 氟 尼 柳 含 有 氟 元 素 ， 双 氯 芬 酸 钠 和 吲 哚 美 辛 含 有 氯 元 素 ， 吡 罗2昔 康 和 美 洛 昔 康 含 有 硫

6、元 素 。 上 述 结 构 特 征 或 杂 原 子 的 存 在 也 决 定了 各 药 物 的 化 学 特 性 。 作 为 其 他 非 甾 体 抗 炎 药 ， 对 乙 酰 氨 基 酚 和 尼 美舒 利 的 结 构 分 别 为 取 代 乙 酰 苯 胺 和 甲 磺 酰 苯 胺 ， 具 有 苯 胺 和 甲 磺 酰 基 结构 。 主 要 理 化 性 包 括（ 一 ） 酸 性本 类 药 物 因 分 子 结 构 中 具 有 游 离 羧 基 而 显 酸 性 ， 但 其 酸 性 强 度 受苯 环 的 取 代 位 置 及 苯 环 上 其 他 取 代 基 的 影 响 。 具 有 邻 位 取 代 苯 甲 酸结 构 的

7、 药 物 ， 如 水 杨 酸 、 阿 司 匹 林 、 双 水 杨 酯 、 二 氟 尼 柳 、 甲 芬 那 酸等 ， 由 于 邻 位 效 应 使 得 酸 性 增 强 ， 如 阿 司 匹 林 的 酸 性 (pKa 3.49)比苯 甲 酸 的 酸 性 (pKa=4.26)强 ； 其 中 ， 水 杨 酸 还 由 于 邻 位 游 离 羟 基 的 氢能 与 羧 基 形 成 分 子 内 氢 键 ， 更 增 强 了 羧 基 中 氧 氢 键 的 极 性 ， 使 其 酸性 进 一 步 增 强 (pKa=2.95)。 双 氯 芬 酸 、 布 洛 芬 、 酮 洛 芬 、 萘 普 生 、 吲 哚美 辛 等 ， 由 于

8、羧 基 并 非 直 接 与 苯 环 相 连 ， 在 结 构 上 属 于 芳 环 取 代 的脂 肪 酸 类 ， 其 酸 性 较 弱 。 而 吡 罗 昔 康 、 美 洛 昔 康 、 尼 美 舒 利 、 对 乙 酰 氨基 酚 则 为 酰 胺 结 构 ， 无 明 显 酸 性 。基 于 本 类 药 物 具 有 较 强 酸 性 的 特 性 ， 大 多 数 药 物 的 原 料 药 均 可 在中 性 乙 醇 或 甲 醇 、 丙 酮 等 水 溶 性 有 机 溶 剂 中 ， 用 氢 氧 化 钠 直 接 滴 定 法测 定 含 量 。（ 二 ） 水 解 性本 类 药 物 中 ， 阿 司 匹 林 和 双 水 杨 酯 具

9、 有 酯 键 ， 吲 哚 美 辛 、 吡 罗 昔康 、 美 洛 昔 康 、 尼 美 舒 利 、 对 乙 酰 氨 基 酚 等 则 具 有 酰 胺 键 ， 均 可 发 生 水解 反 应 。 水 解 反 应 及 其 产 物 的 理 化 特 性 反 应 可 用 于 鉴 别 ； 若 水 解 反应 可 快 速 、 定 量 进 行 ， 亦 可 用 剩 余 碱 量 法 测 定 含 量 ， 如 美 洛 昔 康 可加 定 量 过 量 的 氢 氧 化 钠 水 解 后 ， 剩 余 的 氢 氧 化 钠 用 盐 酸 回 滴 定 法 测定 含 量 。（ 三 ） 吸 收 光 谱 特 性本 类 药 物 分 子 结 构 中 具

10、有 苯 环 和 特 征 取 代 基 ， 均 具 有 紫 外 和 红 外特 征 光 谱 ， 紫 外 -可 见 分 光 光 度 法 和 红 外 分 光 光 度 法 已 被 广 泛 应 用 于本 类 药 物 及 其 制 剂 的 鉴 别 ； 同 时 ， 紫 外 -可 见 分 光 光 度 法 亦 被 广 泛 用 于3本 类 药 物 制 剂 的 含 量 均 匀 度 、 溶 出 度 或 释 放 度 的 检 查 ， 甚 至 部 分 药 物制 剂 的 含 量 测 定 。（ 四 ） 基 团 或 元 素 特 性本 类 药 物 分 子 结 构 中 的 特 征 基 团 或 元 素 具 有 特 征 的 理 化 特 性 ，

11、 如对 乙 酰 氨 基 酚 的 酚 羟 基 、 水 杨 酸 的 邻 羟 苯 甲 酸 结 构 与 三 价 铁 可 生 成 有色 配 位 化 合 物 ； 酮 洛 芬 的 二 苯 甲 酮 可 与 苯 肼 缩 合 显 色 ； 美 洛 昔 康 结构 中 的 硫 元 素 热 分 解 后 产 生 的 硫 化 氢 可 与 醋 酸 铅 生 成 黑 色 硫 化 铅 等 均可 用 于 本 类 药 物 的 鉴 别 。第 二 节 鉴 别 试 验依 据 上 述 理 化 性 质 ， 芳 酸 类 非 甾 体 抗 炎 药 物 可 采 用 显 色 反 应 、 沉淀 反 应 ， 以 及 红 外 、 紫 外 -可 见 分 光 光 度

12、 法 和 高 效 液 相 色 谱 法 或 薄 层 色谱 法 鉴 别 。一 、 与 三 氯 化 铁 反 应1 水 杨 酸 反 应 水 杨 酸 的 水 溶 液 加 三 氯 化 铁 试 液 ， 即 生 成 紫 堇色 配 位 化 合 物 。+ FeCl3OOHOH + FeOOO OHH2O + 3HCl反 应 宜 在 中 性 或 弱 酸 性 (pH 46)条 件 下 进 行 ， 在 强 酸 性 溶 液 中 配位 化 合 物 可 分 解 ； 本 反 应 极 为 灵 敏 ， 试 验 宜 在 稀 溶 液 中 进 行 。 如 取样 量 大 ， 产 生 颜 色 过 深 时 ， 可 加 水 稀 释 后 观 察

13、。阿 司 匹 林 加 水 煮 沸 使 水 解 生 成 水 杨 酸 后 ， 可 与 三 氯 化 铁 试 液 反 应显 紫 堇 色 ； 双 水 杨 酯 在 氢 氧 化 钠 试 液 中 煮 沸 后 与 三 氯 化 铁 试 液 反 应呈 紫 色 ； 二 氟 尼 柳 溶 于 乙 醇 后 与 三 氯 化 铁 试 液 反 应 呈 深 紫 色 。2 酚 羟 基 反 应 对 乙 酰 氨 基 酚 的 水 溶 液 加 三 氯 化 铁 试 液 即 显 蓝 紫色 。 3NHCO3OH+ FeCl3 NHCO3O- 3Fe +3HCl4吡 罗 昔 康 与 美 洛 昔 康 噻 嗪 环 上 的 烯 醇 式 羟 基 具 有 酚

14、 羟 基 的 性 质 ， 亦可 在 三 氯 甲 烷 溶 液 中 与 三 氯 化 铁 生 成 红 色 配 位 化 合 物 ， 分 别 显 玫 瑰 红色 和 淡 紫 红 色 。二 、 缩 合 反 应酮 洛 芬 具 有 二 苯 甲 酮 结 构 ， 在 酸 性 条 件 下 可 与 二 硝 基 苯 肼 缩 合 生 成橙 色 偶 氮 化 合 物 。 取 本 品 ， 加 乙 醇 溶 解 后 ， 加 二 硝 基 苯 肼 试 液 ， 加 热 至沸 ， 放 冷 即 产 生 橙 色 沉 淀 。CH3OHONH-2NO2O2 NHO2 NO2CH3OH+ H2SO4-2三 、 重 氮 化 -偶 合 反 应对 乙 酰

15、氨 基 酚 具 潜 在 的 芳 伯 氨 基 ， 在 稀 盐 酸 中 加 热 水 解 生 成 对 氨基 酚 ， 具 有 游 离 芳 伯 氨 基 结 构 ， 在 酸 性 溶 液 中 与 亚 硝 酸 钠 试 液 进 行 重氮 化 反 应 ， 生 成 的 重 氮 盐 再 与 碱 性 -萘 酚 偶 合 生 成 红 色 偶 氮 化 合 物 。NHCO3 +HCl +2OHO HONH2Cl +H3COHHONH2Cl +HNO2HON2+Cl- 2HOHON2+Cl- OH+ NaOH NOHOH+ NaCl +H2O分 子 结 构 中 具 有 芳 伯 氨 基 或 潜 在 芳 伯 氨 基 的 药 物 ，

16、均 可 发 生 重 氮 化 反应 ， 生 成 的 重 氮 盐 可 与 碱 性 -萘 酚 偶 合 生 成 有 色 的 偶 氮 染 料 。四 、 氧 化 反 应甲 芬 那 酸 溶 于 硫 酸 后 ， 与 重 铬 酸 钾 反 应 显 深 蓝 色 ， 随 即 变 为 棕 绿色 。吲 哚 美 辛 溶 液 在 硫 酸 存 在 下 ， 与 重 铬 酸 钾 溶 液 共 热 ， 应 显 紫 色 ； 在 盐酸 溶 液 中 与 亚 硝 酸 钠 溶 液 反 应 显 绿 色 ， 放 置 后 渐 变 黄 色 。五 、 水 解 反 应阿 司 匹 林 与 碳 酸 钠 试 液 加 热 水 解 ， 得 水 杨 酸 钠 及 醋 酸

17、 钠 ， 加 过 量 稀 硫5酸 酸 化 后 ， 则 生 成 白 色 水 杨 酸 沉 淀 ， 并 发 生 醋 酸 的 臭 气 。COHCOH3 CONaH+ Na2CO3 + C3ONa +CO2COHCONaH2 + 2SO4 2 + Na2SO42 CH3COONa + H2SO4 2 CH3COOH +Na2SO4双 水 杨 酯 与 氢 氧 化 钠 试 液 煮 沸 后 ， 加 稀 盐 酸 ， 即 生 成 白 色 水 杨 酸沉 淀 ； 沉 淀 在 醋 酸 铵 试 液 中 可 溶 解 。六 、 特 征 元 素 的 反 应1 氯 元 素 的 鉴 别 含 氯 药 物 与 碱 共 热 分 解 产

18、生 氯 化 物 ， 显 氯 化 物的 鉴 别 反 应 。 如 双 氯 芬 酸 钠 ， 与 碳 酸 钠 炽 灼 灰 化 ， 加 水 煮 沸 、 滤 过 后 ，滤 液 显 氯 化 物 鉴 别 反 应 (详 见 本 书 第 二 章 药 物 的 鉴 别 )。2 硫 元 素 的 鉴 别 美 洛 昔 康 中 含 二 价 硫 高 温 分 解 产 生 硫 化 氢 气体 ， 遇 醋 酸 铅 生 成 硫 化 铅 黑 色 沉 淀 。 如 美 洛 昔 康 于 试 管 中 炽 灼 ， 产 生的 气 体 能 使 湿 润 的 醋 酸 铅 试 纸 显 黑 色 。七 、 光 谱 法(一 ) 紫 外 -可 见 分 光 光 度 法

19、紫 外 吸 收 光 谱 为 电 子 光 谱 ， 一 般 只 有 23 个 较 宽 的 吸 收 带 ， 药 物分 子 结 构 中 的 共 轭 体 系 决 定 光 谱 的 形 态 ， 如 最 大 吸 收 波 长 与 最 小 吸 收波 长 及 在 各 波 长 处 的 吸 收 系 数 均 取 决 于 分 子 结 构 中 的 共 轭 体 系 。 紫外 吸 收 光 谱 法 被 广 泛 应 用 于 本 类 药 物 的 鉴 别 ， 各 药 物 的 紫 外 吸 收 光 谱特 征 参 数 见 表 6-1。 常 用 的 紫 外 鉴 别 方 法 如 下 ：1 最 大 吸 收 波 长 法 双 氯 芬 酸 钠 、 萘 普

20、 生 、 吡 罗 昔 康 、 美 洛 昔 康等 均 规 定 其 最 大 吸 收 波 长 ， 如 双 氯 芬 酸 钠 的 水 溶 液 (20g/ml)在276nm 的 波 长 处 有 最 大 吸 收 。本 类 药 物 的 多 种 制 剂 亦 采 用 本 法 鉴 别 ， 如 吡 罗 昔 康 片 的 鉴 别 ： 取含 量 测 定 项 下 的 溶 液 ， 照 紫 外 -可 见 分 光 光 度 法 测 定 ， 在 243nm 与334nm 的 波 长 处 有 最 大 吸 收 。62 最 大 与 最 小 吸 收 波 长 法 布 洛 芬 用 0.4%氢 氧 化 钠 溶 液 制 成0.25mg/ml 的 溶

21、液 ， 在 265nm 与 273nm 的 波 长 处 有 最 大 吸 收 ， 在245nm 与 271nm 的 波 长 处 有 最 小 吸 收 ， 在 259nm 的 波 长 处 有 一 肩 峰 。布 洛 芬 及 美 洛 昔 康 制 剂 亦 用 同 法 鉴 别 。3 吸 光 度 法 甲 芬 那 酸 用 1mol/L 盐 酸 溶 液 -甲 醇 (1 99)混 合 液制 成 20g/ml 的 溶 液 ， 在 279nm 与 350nm 的 波 长 处 有 最 大 吸 收 ， 其吸 光 度 分 别 为 0.690.74 与 0.560.60。4 吸 光 度 比 值 法 二 氟 尼 柳 用 0.1m

22、ol/L 盐 酸 乙 醇 溶 液 制 成20g/ml 的 溶 液 ， 在 251nm 与 315nm 的 波 长 处 有 最 大 吸 收 ， 吸 光 度比 值 应 为 4.24.6。(二 ) 红 外 分 光 光 度 法红 外 吸 收 光 谱 是 由 分 子 振 动 、 转 动 能 级 跃 迁 所 产 生 的 分 子 光 谱 ，与 紫 外 吸 收 光 谱 (电 子 光 谱 )比 较 ， 红 外 吸 收 光 谱 更 具 指 纹 特 征 性 。 本类 药 物 的 原 料 药 均 采 用 红 外 分 光 光 度 法 鉴 别 ； 亦 有 少 数 制 剂 采 用 溶 剂 提取 法 去 除 辅 料 后 测

23、定 ， 如 布 洛 芬 和 对 乙 酰 氨 基 酚 、 萘 普 生 、 尼 美 舒 利 片剂 分 别 用 丙 酮 、 甲 醇 和 无 水 乙 醇 溶 解 、 滤 过 、 干 燥 后 ， 采 用 红 外 分 光 光度 法 鉴 别 。八 、 色 谱 法(一 ) 薄 层 色 谱 法药 物 制 剂 中 存 在 大 量 的 辅 料 ， 常 对 原 料 药 所 使 用 的 某 些 鉴 别 方 法 ，如 红 外 光 谱 法 构 成 一 定 的 干 扰 。 虽 部 分 药 物 可 用 溶 剂 提 取 法 去 除 辅料 的 干 扰 ， 但 多 数 药 物 制 剂 中 辅 料 的 干 扰 难 以 有 效 去 除

24、， 此 时 ， 可 采用 薄 层 色 谱 法 (TLC)进 行 分 离 与 鉴 别 。 如 二 氟 尼 柳 、 美 洛 昔 康 等 制 剂 均采 用 TLC 法 鉴 别 。 二 氟 尼 柳 胶 囊 的 鉴 别 ： 以 硅 胶 GF254 为 固 定 相 ， 正己 烷 -二 氧 六 环 -冰 醋 酸 (85 10 5)为 展 开 剂 ， 展 开 后 在 紫 外 光(254nm)灯 下 检 视 ， 供 试 品 溶 液 所 显 主 斑 点 的 位 置 和 颜 色 应 与 对 照 品溶 液 的 主 斑 点 相 同 。 美 洛 昔 康 制 剂 则 以 三 氯 甲 烷 -甲 醇 -二 乙 胺(60 5 7

25、.5)为 展 开 剂 ， 同 法 鉴 别 。(二 ) 高 效 液 相 色 谱 法7虽 然 TLC 设 备 简 单 、 操 作 方 便 ， 但 随 着 高 效 液 相 色 谱 法 (HPLC)在 药 物 制 剂 分 析 ， 尤 其 是 在 含 量 测 定 中 的 大 量 应 用 ， 近 年 来 更 多 应 用HPLC 进 行 制 剂 的 鉴 别 。 如 美 洛 昔 康 制 剂 采 用 有 关 物 质 检 查 的 HPLC色 谱 条 件 进 行 鉴 别 ， 而 阿 司 匹 林 、 甲 芬 那 酸 、 双 氯 芬 酸 钠 、 布 洛 芬 、 萘普 生 、 吲 哚 美 辛 、 对 乙 酰 氨 基 酚

26、等 的 多 种 制 剂 则 均 直 接 取 含 量 测 定 项下 记 录 的 HPLC 色 谱 图 进 行 鉴 别 。 如 阿 司 匹 林 片 、 泡 腾 片 、 肠 溶 片 、 肠溶 胶 囊 等 制 剂 均 采 用 本 法 鉴 别 ， 方 法 如 下 ： 在 含 量 测 定 项 下 记 录 的色 谱 图 中 ， 供 试 品 溶 液 主 峰 的 保 留 时 间 应 与 对 照 品 溶 液 主 峰 的 保 留时 间 一 致 。 当 TLC 和 HPLC 均 有 收 载 时 ， 二 者 可 任 选 其 一 ， 如 美 洛 昔康 片 的 鉴 别 。第 三 节 特 殊 杂 质 及 其 检 查 法典 型

27、 芳 酸 类 非 甾 体 抗 炎 药 物 的 有 关 物 质 信 息 见 表 6-3。典 型 非 甾 体 抗 炎 药 物 的 主 要 有 关 物 质药 物 名 称有 关 物 质 结 构式代 码 /名 称 药 物 名 称有 关 物 质 结 构式代 码 /名 称阿 司 匹 林双 水 杨 酯OHO游 离 水 杨酸萘 普 生OCH3 OMeI 6-甲 氧基 -2-萘 乙酮NH2OH氨 基 酚甲 芬 那 酸 NH2CH332,3-二 甲基 苯 胺对 乙 酰 氨 基酚 CH3NHOCl 对 氯 苯 乙 酰胺一 、 阿 司 匹 林 及 双 水 杨 酯 中 游 离 水 杨 酸 与 有 关 物 质 的 检 查(

28、一 ) 阿 司 匹 林 及 双 水 杨 酯 的 合 成阿 司 匹 林 及 双 水 杨 酯 的 合 成 路 线 如 下 ：8ONa ONaCHH+ OHCOHC(CH3O)2 OCH3CCH3OOHHOC OCHOHCO2 +H2O+(二 ) 阿 司 匹 林 中 游 离 水 杨 酸 与 有 关 物 质 的 检 查1 游 离 水 杨 酸 阿 司 匹 林 为 乙 酰 水 杨 酸 ， 在 生 产 过 程 中 因 乙 酰化 反 应 不 完 全 ， 或 在 精 制 过 程 及 贮 藏 期 间 的 水 解 而 产 生 水 杨 酸 。 游 离水 杨 酸 对 人 体 有 毒 性 ， 且 其 分 子 中 所 含

29、的 酚 羟 基 在 空 气 中 易 被 逐 渐氧 化 生 成 一 系 列 有 色 醌 型 化 合 物 ， 如 淡 黄 、 红 棕 甚 至 深 棕 色 而 使 阿司 匹 林 成 品 变 色 ， 因 而 需 加 以 控 制 。COHOH OCHHO COHOOHOOHC OCOHHOCHCOH+ H- O+CHOCOHChP 曾 基 于 水 杨 酸 可 在 弱 酸 性 溶 液 中 与 高 价 铁 盐 生 成 紫 堇 色 配 位 化 合物 ， 而 阿 司 匹 林 结 构 中 无 游 离 酚 羟 基 ， 不 发 生 该 反 应 的 原 理 ， 用 稀 硫酸 铁 铵 溶 液 显 色 反 应 检 查 游

30、离 水 杨 酸 。 但 由 于 在 供 试 品 溶 液 制 备 过 程 中阿 司 匹 林 可 发 生 水 解 产 生 新 的 游 离 水 杨 酸 ， 所 以 ChP2010 采 用 1%冰醋 酸 甲 醇 溶 液 制 备 供 试 品 溶 液 (10mg/ml)， 以 防 阿 司 匹 林 水 解 ， 同 时采 用 高 效 液 相 色 谱 法 (HPLC)检 查 ， 用 十 八 烷 基 硅 烷 键 合 硅 胶 (ODS)为 填 充 剂 ， 以 乙 腈 -四 氢 呋 喃 -冰 醋 酸 -水 (20 5 5 70)为 流 动 相 ，检 测 波 长 为 303nm。 按 外 标 法 以 峰 面 积 计 算

31、 ， 游 离 水 杨 酸 不 得 过 0.1%。通 常 ， 制 剂 不 再 检 查 原 料 药 物 检 查 项 下 的 相 关 杂 质 ， 但 阿 司 匹 林在 制 剂 过 程 中 易 水 解 生 成 水 杨 酸 ， 因 此 药 典 规 定 阿 司 匹 林 片 、 肠 溶9片 、 肠 溶 胶 囊 、 泡 腾 片 及 栓 剂 均 照 原 料 药 方 法 与 色 谱 条 件 检 查 水 杨酸 ， 限 量 分 别 为 0.3%、 1.5%、 1.0%、 3.0%和 3.0%。2 有 关 物 质 阿 司 匹 林 中 的 “有 关 物 质 ”系 指 除 “游 离 水 杨 酸 ”外 的 合 成 原 料 苯

32、 酚 及 其 他 合 成 副 产 物 ， 如 醋 酸 苯 酯 、 水 杨 酸 苯 酯 、水 杨 酰 水 杨 酸 、 水 杨 酸 酐 、 乙 酰 水 杨 酸 苯 酯 、 乙 酰 水 杨 酰 水 杨 酸 及乙 酰 水 杨 酸 酐 等 杂 质 。 ChP 采 用 HPLC 法 检 查 ： 使 用 ODS 色 谱 柱 ，以 检 查 “游 离 水 杨 酸 ”的 流 动 相 为 流 动 相 A、 乙 腈 为 流 动 相 B， 梯 度洗 脱 ， 检 测 波 长 为 276nm。 以 供 试 品 溶 液 (10mg/ml) 的 稀 释 液 (0.5%)为 对 照 ， 除 水 杨 酸 峰 外 ， 其 他 各 杂

33、 质 峰 面 积 的 和 不 得 大 于 对 照 溶 液主 峰 面 积 (图 6-2)。OHOHCOH COOH COOH3OHCOCOH COOH3COHCOOHOH COOH3 OCH3OCH3OHOHCOHOHCOH (CH3O)2(C3O)2 (C3O)2 (CH3O)2CO2图 6-2 阿 司 匹 林 有 关 物 质 HPLC 检 查 色 谱 图a:阿 司 匹 林 供 试 品 (10mg/ml)；b:0.5%自 身 对 照 (50g/ml)；c:0.05%自 身 对 照 (灵 敏 度 试 验5g/ml)；d:水 杨 酸 对 照 (10g/ml)；e:空 白1:阿 司 匹 林 ；2:水

34、 杨 酸 ；103:乙 酰 水 杨 酰 水 杨 酸(三 ) 双 水 杨 酯 中 游 离 水 杨 酸 的 检 查双 水 杨 酯 为 水 杨 酰 水 杨 酸 ， 以 水 杨 酸 为 原 料 经 酯 化 而 成 。 在 生 产过 程 中 因 酯 化 反 应 不 完 全 ， 或 在 精 制 过 程 及 贮 藏 期 间 的 水 解 均 可 产生 水 杨 酸 。 其 检 查 原 理 是 利 用 水 杨 酸 可 与 三 价 铁 生 成 有 色 配 位 化 合物 的 特 性 ， 用 硝 酸 铁 溶 液 显 色 后 ， 在 530nm 的 波 长 处 测 定 吸 光 度 ，规 定 供 试 品 溶 液 的 吸 光

35、 度 不 得 大 于 水 杨 酸 对 照 溶 液 的 吸 光 度 ， 限 度为 0.5%。 双 水 杨 酯 片 同 法 检 查 ， 限 度 为 1.5%。二 、 甲 芬 那 酸 中 2.3-二 甲 基 苯 胺 的 检 查(一 ) 合 成 工 艺甲 芬 那 酸 主 要 以 邻 -氯 苯 甲 酸 (o-chlorobenzoic acid)和 2， 3-二 甲基 苯 胺 (2， 3-dimethyl- aniline)为 原 料 ， 在 铜 的 催 化 下 缩 合 而 成 。ClOH3CH3N2+ Cu NHCO3CCH3(二 ) 2,3-二 甲 基 苯 胺 的 检 查ChP 曾 采 用 HPLC 法 检 查 有 关 物 质 ， 单 一 杂 质 的 限 量 为 0.1%，杂 质 总 量 为 0.5%。 但 因 为 2,3-二 甲 基 苯 胺 可 引 起 高 铁 血 红 蛋 白 血 症 ，并 对 中 枢 神 经 系 统 及 肝 脏 有 损 害 。 故 ChP 除 规 定 采 用 HPLC 法 检 查“有 关 物 质 ”外 ， 采 用 气 相 色 谱 法 检 查 2,3-二 甲 基 苯 胺 ， 限 度 为0.01%。 方 法 如 下 ：1 色 谱 条 件 以 聚 乙 二 醇 (PEG-20M)为 固 定 液 的 毛 细 管 色 谱 柱 ；