1、UV-2600 型紫外分光光度计操作指导书1 概况1.1 仪器概况：UV-2600 型紫外分光光度计是由日本岛津（Shimadzu）生产制造，与功能强大的操作软件 UVProbe 结合，操作简单方便，且符合 SH/T0181 方法的测量精度要求。1.2 主要技术参数分辨率 0.1nm波长范围185nm900nm（使用积分球附件 ISR- 2600Plus 时 220nm1400nm） 波长准确性 0.3nm谱带范围 0.1、0.2、0.5、1、2、5nm 测光方式 双光束方式杂散光 0.005%以下 检测器 光电倍增管 R-928测光范围 -55Abs 比色池 1cm光源 50W 卤素灯、氘灯
2、 单色器 切尼尔-特纳单色器主电压 AC100V240V 主频率 50/60Hz1.3 使用条件操作温度：1535操作湿度：30%805%2 仪器结构仪器由 UV-2600 型紫外分光光度计和计算机组成。3 操作步骤 3.1 开机在使用前先确认仪器和计算机的工作电源，检查仪器样品室应无遮挡光路的物品。确认后先开启计算机，然后开启仪器电源。待分光光度计外侧的指示灯显示绿色时，启动电脑桌面上的 UVPROBE 程序。首先从下拉式菜单的仪器项上追加需要的仪器，操作完毕如下图所示，然后点击上图的连接键，这样仪器与计算机连接（当然，中间的通讯电缆的连接、通讯口的指定等都是必须的，此处不再赘述）并开始下示
3、的初始化面。初始化大约需要 5 分钟左右，进行一系列的检查和初置，如一切顺利通过就可以开始测定。3.2 测定首先选择测定的方式，在主菜单上能发现右图 所示的各键，自左至右分别为：报告生成器：用于制作各种格式的报告。动力学测定方式：一般测定吸收值随时间的变化，通常用于酶反应随时间的变化。光度测定（定量）方式：可进行多波长、单波长、峰高或峰面积定量。校准曲线可使用多点、单点、K 因子等方法。由于具有自定义方程的功能，DNA/ 蛋白质测定等以前需 要特殊选购的软件才能进行的工作，使用 UVPROBE 可自编程序进行测定。光谱测定方式：可进行紫外可见区的光谱测定。3.3 光谱测定方式3.3.1 参数的
4、设定点击菜单栏上的 键，即可出现如下图所示的选择测定条件的画面：在此对话框中可选择波长测定的范围、扫描的速度、采样间隔等条件。点击图中试样准备标签，可输入重量、体积、稀释因子、光程长等信息。点击图中仪器参数标签，可选择测定种类（吸收值、透射率、能量、反射率）以及通带（狭逢）等条件。点击主菜单上的 键，可分别开关图象面板（图中的左键） 、数据处理面板（中）以及方法面板（右键） 。3.3.2 光谱测定首先点击上图的进行基线校正，然后点击波长设置到 500nm，再点击自动调零。数据处理面板方法面板图象面板 为何要如此做？原因非常简单，由于一般的分光光度计的能量在 500nm 左右最强，在此自动调零可
5、得到最正确的基线。通常上述操作在开机后进行一次就足够了。此后，设置样品点击键即可开始测定。3.4 光度测定方式3.4.1 参数的设定点击菜单栏中的 键，出现下图：此处显示的波长类型是“点”表示测定高度，如果选择的是范围，则需输入起始和结束波长，并可选择最大、最小、峰、谷或面积等作为定量的依据。无论如何选择，波长都是必须的，并要加入以后才有效。在某单栏上有右列各 键，点击以后分别出现标准表（最左） 、样品表（左 2） 、工作曲线图（右 2）和样品图（最右） 。3.4.2 定量测定首先如前所述，选择了点及波长，然后在方法中选择校准，在此决定用工作曲线法定测定的方式选择测定波长的列名选择和登录波长登
6、录后的波长显示区标准表样品表工作曲线样品图量，并选择多点、单点或 K 因子法等。进行定量测定也需要基线校正和自动调零，方法如前面所述。此后，样品室内逐个放入标准，点击上图下方的读数键即可。注意，无论是测定标准或未知样品，必须输入名称才有效。标准测定完毕，工作曲线自动显示。接下去就可测定未知样品的浓度了。有时不测定浓度，只测定某些波长的读数，则在校准方法中选择“原始数据” ，在登录时选择若干需要的波长，即可测定各波长的读数。使用 SH/T0181 方法标准进行光谱测定时，点击设置波长到 287.5nm，再放入两只均装有光谱纯异辛烷的比色皿，点击自动调零，最后，将外面一只比色皿中装入需要测定的样品
7、，点击键读数，即可测得在该波长处的样品的吸光度值。在工作曲线图象上点击鼠标右键，选择属性，可从该图象上得到许多有用的信息，见下图：只需在这些显示的项目中做标记，相应的信息即出现在工作曲线图象的左下方。见下图的划圈部分：所谓 K 因子法实际上可称为已知工作曲线法（而且不局限于直线） ，即工作曲线回归方程的系数和次数已知，故而只要输入这些系数以及工作曲线的次数。这一方法对工作曲线较为稳定的日常分析非常有效。设置方法见下图：3.5 动力学分析在菜单栏中点击方法键 ，得到如下图象：此处的计时方式选择的是“自动” ，时间总量中需手动设置测定的时间。由于是自动计时方式，所以采样步长（图中为时间周期）和读数
8、次数将根据时间总量自动设置。此外可设置波长以及活度计算的开始和结束时间。设置大短的活度范围会出现错误信息。相反，如果计时方式选择的是手动的话，则可输入时间周期和读取次数，而时间总量（测定时间）会根据输入的时间周期和读取次数自动计算得到。活度范围用于酶反应随时间的变化，如果单纯进行时间扫描的话，则可不考虑活度范围。测定的波长栏内可选择单波长或双波长（波长 l-波长 2 或波长 l/波长 2）两种方法。选择后输入相应的波长。主菜单中有如右 各键，自主到右分别是时间扫描图象、数据处理面板、测定参数面板和酶活度图象。点击各键屏幕出现相应的板块。下图中表示已经测定得到数据的显示情况。4 定期维护检查表检
9、查维护项目 每天 1 年 2 年 3 年检查样品室 检查外观 确认光源点灯时间 更换 W1（卤素）灯 更换 D2（氘）灯 性能确认 5 常见故障及排除5.1 初始化室的异常状况（以下编号见前文初始化窗口中内容）编号 检查位置 处理措施 关闭（OFF）本产品的电源开关后再次打开（ON） ，进新仪器初始化。样品室池架上是否有遮挡光线的物品？暂时关闭（OFF）本产品的电源开关。取出遮挡光线的物品后再次打开（ON）电源。、观察光源室，W1 是否漏光？如果没有漏光将 W1 熄灭。暂时关闭（OFF）本产品的电源开关后再次打开（ON） 。如果光源不亮，请更换 W1 灯。光源的使用时间是否超过使用寿命？在 U
10、VProbe 软件中单击“仪器”菜单的“配置” ，显示“配置”窗口后单击“点灯时间”选项卡。如果各光源灯的点灯时间超过“灯寿命” ，请更换光源。样品室池架上是否有遮挡光线的物品？暂时关闭（OFF）本产品电源开关。取出遮挡光线的物品后再次打开（ON）电源，对仪器进行初始化。样品室盖是否敞开？ 暂时关闭（OFF）本产品电源开关。关闭样品室盖后再次打开（ON）电源开关，对仪器进行初始化。、光源的使用时间是否超过使用寿命？在 UVProbe 软件中单击“仪器”菜单的“配置” ，显示“配置”窗口后单击“点灯时间”选项卡。如果各光源灯的点灯时间超过“灯寿命” ，请更换光源。5.2 故障症状与处理方法故障（
11、症状） 主要原因 处理方法AC 电源线插头是否插好？ 正确连接 AC 电源线插头。AC 电源线是否被压，或电源线弯曲？如果 AC 电源线损坏，更换相同型号的电源线。供电电源是否符合仪器的电源规格？使用与仪器的电源规格相符的电源。打开电源开关后不通电。保险丝是否烧断？ 需要确认和更好保险丝时请与所在区域的岛津分公司联系。是否确保正确连接 USB 缆线？ 请确切链接到 PC 和仪器上。是否正确设置 PC 的 COM 端口？ 在 PC 显示器右下方确认本产品 COM 端口号后，电极 UVProbe“仪器”菜单的“配置” ，设置连接端口。无法与 UVProbe通讯。是否正确安装 USB 驱动程序？ 按
12、照 UVProbe 软件的安装窗口安装 USB驱动程序。测光值异常。 光源是否熄灭？ 在 UVProbe 软件中单击“仪器”菜单的“配置” ，显示“配置”窗口然后单击“维护”选项卡。 “光源状况”的“W1” 、“D2”复选框未被激活时，A 处理：光源熄灯时，激活“W1” 、“D2”的复选框。在 UVProbe 中单击“断开” ，关闭（OFF）与 UVProbe 的通讯；关闭（OFF）仪器电源。稍后再打开电源；单击“连接” ，进行仪器初始化。如果光源灯未亮，显示错误时，再进行“B 处理” 。光源灯点亮，随后又熄灭时进行“C 处理” 。B 处理：光源未亮。请更换新灯。C 处理：仪器检出异常时强行将
13、灯熄灭；检测风扇是否停止或基板上的温度感应器是否过热；关闭电源开关后与所在区域内的岛津分公司联系。波长等测定参数设置是否正确？请重新检查输入的参数。狭缝宽度是否合适？ 改变狭缝宽度，重新进行测定。光源的使用时间收费超过使用寿命？如果光源的使用时间超过使用寿命，请更换光源。测定的样品是否正确？ 请检查所取样品是否正确。使用的吸收池是否合适？ 请使用符合测定目的的吸收池。使用玻璃池时无法测定紫外区，请使用石英池。仪器附近是否使用手机？ 手机种类的信号强度可能光度值有影响。样品室安装的特殊附件和连接器的连接是否正确？请检查特殊附件是否正确安装到样品室，或连接器是否正确连接？测光值异常。在仪器前方是否
14、听到发动机的异常声响？扇形发动机可能运行异常。请与所在区域的岛津分公司联系。排气风扇的排气口是否堵塞？ 关闭电源开关。检查排气风扇出口处10cm 以内是否存在阻碍物，如果有请清除。由于可能出现温度异常，请稍后再重新打开电源开关。如果仍未解决，请与所在区域的岛津分公司联系。异常警报发出蜂鸣声，LED 显示红色。排气风扇是否停止？ 确认空气从左后方的排气口排出。如果风扇停止运行，关闭电源开关后与所在区域的岛津分公司联系。光源是否熄灭？ 如果光源的使用时间超过使用寿命，请更换光源。两侧光源都未亮。排气风扇是否停止？ 确认空气从左后方的排气口排出。如果风扇停止运行，关闭电源开关后与所在区域的岛津分公司联系。UVProbe 启动慢。 仪器记录文件的容量是否增加？由于加载存储的仪器记录需要时间，软件的启动可能会变慢。按照以下顺序将仪器记录删除或进行数据库传输。单击输出窗口的“仪器记录”选项卡；选择仪器记录的所有行；单击右键菜单中的“复制” ，将仪器记录复制到剪贴板上；将复制的内容粘贴到文本文件中，保存到 PC；再次选择 UVProbe 仪器记录的所有行；单击右键菜单中“删除” 。6 附加说明6.1 本操作指导书参照岛津 UV-2600 型紫外分光光度计产品使用说明书和 UV Probe 中文说明书编制而成。6.2 本仪器适用于 SH/T0181 试验方法。6.3 本操作说明由二站徐樱萍起草。
