1、高中生物实验总结实验一 观察 DNA 和 RNA 在细胞中的分布（必修一P26）一、实验原理：1、真核细胞的 DNA 主要分布在细胞核内， RNA 大部分存在于细胞质中。2、甲基绿和吡罗红两种染色剂对 DNA 和 RNA 的亲和力不同，甲基绿对 DNA 亲和力强 ，使 DNA 显现出绿色，而吡罗红对 RNA 的亲和力强，使 RNA 呈现出红色。利用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色，可同时显示 DNA 和 RNA 在细胞中的分布。3、 盐酸的作用 盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞； 盐酸使染色体中的 DNA 与蛋白质分离，有利于 DNA 与染色剂结合4、0.9%的 NaCl 溶液
2、作用：保持口腔上皮细胞的正常的形态二、目的要求：初步掌握观察 DNA 和 RNA 在细胞中分布的方法三、材料用具：人的口腔上皮细胞（也可用其他动物或植物细胞代替，如洋葱鳞片叶表皮细胞）大烧杯、小烧杯、温度计、滴管、消毒牙签、载玻片、盖玻片、铁架台、石棉网、火柴、酒精灯、吸水纸、显微镜质量分数为 0.9%的 NaCl 溶液，质量分数为 8%的盐酸，吡罗红甲基绿染色剂（取 A 液 20mL，B 液 80mL 配成染色剂，使用时现配。 A 液：取吡罗红甲基绿粉 1g，加入 100mL 蒸馏水中溶解，放入棕色瓶中备用。B 液：取乙酸钠 16.4g，用蒸馏水溶解至 1000mL。取乙酸 12mL，用蒸馏
3、水稀释至 1000mL。取稀释的乙酸钠溶液 30mL 和乙酸 20mL，加蒸馏水 50mL，配成 pH 为 4.8 的溶液） ，蒸馏水五、方法步骤：1、取口腔上皮细胞制片在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为 0.9%的 NaCl 溶液。用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻轻地刮几下，把牙签上附有碎屑的一端，放在上述载玻片上的液滴中涂抹几下。点燃酒精灯，将涂有口腔上皮细胞的载玻片烘干。 （固定细胞）2、水解在小烧杯中加入 30mL 质量分数为 8%的盐酸，将烘干的载玻片放入小烧杯中。在大烧杯中加入 30温水。将盛有盐酸和载玻片的小烧杯放在大烧杯中保温 5min。3、冲洗涂片用蒸馏水缓水流冲洗载玻片
4、10s。4、染色用吸水纸吸去载玻片上的水分。将吡罗红甲基绿染色剂滴 2 滴在载玻片上，染色 5min。吸去多余染色剂，盖上盖玻片。5、观察低倍镜观察：选择染色均匀，色泽浅的区域，移至视野中央，将物像调节清晰。换用高倍物镜观察：调节细准焦螺旋，观察细胞核和细胞质的染色情况。六、考点提示：1、取口腔上皮细胞之前，应先漱口，以避免装片中出现太多的杂质；2、取洋葱表皮细胞时，尽量避免材料上带有叶肉组织细胞；3、冲洗载玻片时水的流速要尽量慢，切忌直接用水龙头冲洗；4、用酒精灯烘烤载玻片时，不要只集中于材料处，而应将载玻片在火焰上来回移动，使载玻片均匀受热，以免破裂；5、烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐
5、酸的烧杯中，最好先自然冷却 1 分钟。实验二 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（必修一 P18）一、实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。1、生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多，有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原糖；蔗糖分子内没有，为非还原糖。实验中所用的斐林试剂，只能鉴定生物组织中可溶性还原糖，而不能鉴定可溶性非还原糖。糖类中的还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的 Cu2O 沉淀。用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液变化过程为：浅蓝色棕色砖红色沉淀淀粉遇碘变蓝色（直链）或紫（红
6、）色（支链） 。2、脂肪和类脂（磷脂、糖脂、固醇脂等）统称为脂类。它是构成人体组织的正常成分，不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。在化学组成上，脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。脂类的主要功能是氧化供能。 脂肪主要存积于脂肪组织中，并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。 脂肪可以被苏丹染液染成橘黄色（或被苏丹染液染成红色） 。3、 蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生 紫色反应。 （蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性 NaOH 溶液中能与双缩脲试剂中的 Cu2+作用，产生紫色反应。 ）因此，可以根据与某些化学试剂所产生的颜色反应，检测生物组织中糖类，脂肪或蛋白质的存在。二、实验目的： 尝试
7、用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质。三、实验材料：1、做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色为白色的植物组织，如苹果或梨匀浆。 （因为组织的颜色较浅，易于观察。 ）经试验比较，颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。2、做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花生种子、花生种子匀浆为最好，实验前一般要浸泡 34 小时（也可用蓖麻种子） 。3、做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的豆浆、鲜肝提取液。4、淀粉的鉴定：马铃薯匀浆。四、实验用具：双面刀片、试管（最好用刻度试管） 、试管夹、试管架、大小烧杯、小量筒、滴管、酒精灯、三脚架、石棉网、火柴、载玻片、盖玻片、毛笔、吸水纸
8、、显微镜五、实验试剂：1斐林试剂（甲液：质量浓度为 0.1g/ mL NaOH 溶液，乙液：质量浓度为 0.05g/ mL CuSO4 溶液）2苏丹或苏丹染液3双缩脲试剂（A 液：质量浓度为 0.1g/ mL NaOH 溶液，B 液：质量浓度为 0.01g/ mL CuSO4 溶液）4 体积分数为 50%的酒精溶液5碘液6蒸馏水六、方法步骤：1.实验材料、仪器和试剂的选择 每小组从老师提供的实验材料中选择一两种，预测其中含有哪些化合物，再选择所需要的仪器和试剂。2.设计记录表格，记录预测结果，然后按照试验步骤进行检测，用“+”或“-”记录实测结果。3.检测的方法步骤（1 ）可溶性糖的检测和观察
9、1. 制备组织样液。（去皮、切块、研磨、过滤）苹果或梨组织液必须临时制备。因苹果多酚氧化酶含量高，组织液很易被氧化成褐色，将产生的颜色掩盖。2. 取 1 支试管，向试管内注入 2mL 待测组织样液。3. 向试管内注入 1mL 新制的斐林试剂，振荡。 （应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、乙液等量混合均匀后在注入） 。 （切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。斐林试剂很不稳定，甲、乙液混合保存时，生成的 Cu ( OH )2 在 70 900oC 下分解成黑色 CuO 和水，甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应，无 Cu ( OH )2 生成） 。4.试管放
10、在盛有 50-65oC 温水的大烧杯中，加热约 2min。5.观察试管中出现的颜色变化：浅蓝色 棕色 砖红色（沉淀） 。（好用试管夹夹住试管上部，使试管底部不触及烧杯底部，试管口不要朝向实验者。也可用酒精灯对试管直接加热，短实验时间。 。防止试管内的溶液冲出试管，造成烫伤。 ）（2 ）脂肪的检测和观察方法一：向待测组织样液中滴加 3 滴苏丹 III 染液，观察样液被染色的情况。方法二：制作子叶临时切片，用显微镜观察子叶细胞的着色情况（以花生为例） 。取材 取一粒浸泡过的花生种子，去掉种皮。 （干种子要浸泡 34 小时，新花生的浸泡时间可缩短。因为浸泡时间短，不易切片；浸泡时间过长，组织较软，切
11、片不易成形。切片要尽可能薄些，便于观察）切片 用刀片在花生子叶的横断面上平行切下若干薄片，放入盛有清水的培养皿中待用。制片 从培养皿中选取最薄的切片，用毛笔蘸取放在载玻片中央；在花生子叶薄片上滴 23 滴苏丹，染色 3min（如果用苏丹染液，染色 1min） ， （染色时间不宜过长） ，薄片周围染液，再滴加 12 滴体积分数为 50%的酒精溶液，洗去浮色， （酒精用于洗去浮色，不洗去浮色，会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时，酒精是脂溶性溶剂，可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。 ）用吸水纸吸去花生子叶周围的酒精，滴上一滴蒸馏水（滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡） ，盖上盖玻片，制成临时装片。观察
12、 在低倍显微镜下找到花生子叶的最薄处，移至视野中央，将影像调节清楚；换高倍镜观察，视野中被染成橘黄色的脂肪颗粒清晰可见。 （装片不宜久放，时间一长，油滴会溶解在乙醇中）（3 ）蛋白质的检测和观察制备组织样液（浸泡、去皮研磨、过滤） 。黄豆浸泡 1 至 2 天，容易研磨成浆，也可购新鲜豆浆以节约实验时间。可用蛋清代替豆浆，蛋清要先稀释。如果稀释不够，在实验中蛋清粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗干净。向试管内注入 2mL 待测组织样液。向试管内注入双缩脲试剂 A 液 1mL，摇匀。向试管内注入双缩脲试剂 B 液 4 滴，摇匀。（先加 NaOH 溶
13、液，为 Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。A、B液混装或同时加入，会导致 Cu2+变成 Cu ( OH ) 2 沉淀，而失效。CuSO 4溶液不能多加，否则 CuSO4 的蓝色会遮盖反应的真实颜色）观察试管中出现的颜色变化。 （溶液变紫色）（4 ）淀粉的检测和观察向试管内注入 2mL 待测组织样液。向试管内滴加 2 滴碘液，观察颜色变化。 （碘液不要滴太多，以免影响颜色观察）七、考点提示：1、常见还原性糖与非还原性糖有哪些？答：葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖；淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。 2、还原性糖植物组织取材条件？答：含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如：苹果、梨、白色甘蓝叶
14、、白萝卜等。 3、研磨中为何要加石英砂？不加石英砂对实验有何影响？答：加石英砂是为了使研磨更充分。不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少，使鉴定时溶液颜色变化不明显。 4、斐林试剂甲、乙两液的使用方法？混合的目的？为何要现混现用？ 答：混合后使用；产生氢氧化铜；氢氧化铜不稳定。 5、还原性糖中加入斐林试剂后，溶液颜色变化的顺序为？ 答：浅蓝色 棕色 砖红色。6、花生种子切片为何要薄？答：只有很薄的切片，才能透光，而用于显微镜的观察。 7、转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什么？答：切片的厚薄不均匀。 8、脂肪鉴定中乙醇作用？ 答：洗去浮色。 9、双缩脲试
15、剂 A、B 两液是否混合后用？先加 A 液的目的怎样通过对比看颜色变化？ 答：不能混合；先加 A 液的目的是使溶液呈碱性；先留出一些大豆组织样液做对比。10、在鉴定蛋白质的实验中，若用鸡蛋清作实验材料，必须稀释，以免实验后黏住试管，不易洗刷。11、斐林试剂与双缩脲试剂的区别：（1 ）溶液浓度不同（斐林试剂乙液：质量浓度为 0.05g/ mL CuSO4 溶液，双缩脲试剂 B 液：质量浓度为 0.01g/ mL CuSO4 溶液）（2 ）使用原理不同斐林试剂是新配制的 Cu(OH)2 溶液，它在加热的条件下与醛基反应，被还原成砖红色的 Cu2O 沉淀，可用于鉴定还原糖的存在，实验中溶液颜色的变化
16、过程为：浅蓝色-棕色-砖红色鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂，发生的是双缩脲反应。双缩脲反应的实质是在碱性条件下，Cu 2+与双缩脲发生的紫色反应。而蛋白质分子中有很多与双缩脲（H 2NOC-NH-CONH2）结构相似的肽键，所以蛋白质都能与双缩脲发生颜色反应，可以使用双缩脲试剂鉴定蛋白质的存在。（ 3）使用方法不同：斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、乙液等量混合均匀后在注入；双缩脲试剂先向试管内注入A 液 1mL，摇匀，再向试管内注入 B 液 4 滴，摇匀。实验三 用显微镜观察多种多样的细胞（必修一P7）一、目的要求：1.使用高倍显微镜观察几种
17、细胞，比较不同细胞的异同点2.运用制作临时装片的方法二材料用具：1.建议选用的观察材料：真菌（如酵母菌）细胞，低等植物（如水绵的丝状绿藻）细胞，高等植物细胞（如叶的保卫细胞） ，动物细胞（如鱼的红细胞或蛙的皮肤上皮细胞） 。以上这些材料，做成临时装片后就可以观察。也可以使用其他替代材料。2.用具：显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、滴管、清水。如果实验过程中需要染色，应准备常用的染色液。三方法步骤：转动反光镜使视野明亮。在低倍镜下观察清楚后，把要放大观察的物像移至视野中央。转动转换器，换成高倍物镜。观察并用细准焦螺旋调焦。四：讨论：1.使用高倍镜观察的步骤和要点是什么？答：（1）首先用低倍镜观察，找
18、到要观察的物像，移到视野的中央。2.试归纳所观察到的细胞在结构上的共同点，并描述它们之间的差异，分析产生差异的可能的原因：答：这些细胞在结构上的共同点是：有细胞膜、细胞质和细胞核，植物细胞还有细胞壁。各种细胞之间的差异和产生差异的可能原因是：这些细胞的位置和功能不同，其结构与功能相适应，这是个体发育过程中细胞分化产生的差异。3.P8 图是一个大肠杆菌的电镜照片和结构模式图，大肠杆菌与你在本实验中观察到的细胞有什么主要区别？答：从模式图中可以看出，大肠杆菌没有明显的细胞核，没有核膜，细胞外有鞭毛，等等。五、考点提示：（1 ）是低倍镜还是高倍镜的视野大，视野明亮？为什么？提示：低倍镜的视野大，通过
19、的光多，放大的倍数小；高倍镜视野小，通过的光少，但放大的倍数高。问（2）为什么要先用低倍镜观察清楚后，把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观察？提示：如果直接用高倍镜观察，往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。因此，需要先用低倍镜观察清楚，并把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观察。问（3）用转换器转过高倍镜后，转动粗准焦螺旋行不行？提示：不行。用高倍镜观察，只需微调即可。转动粗准焦螺旋，容易压坏玻片。注：1.目镜无旋转螺丝，镜头越长，放大倍数越小；物镜有旋转螺丝，镜头越长，放大倍数越大。2.获取蛙皮肤上皮细胞的方法，是把蛙养在无水的玻璃缸内 23h，待蛙的皮肤稍干后，再移
20、入有水的玻璃缸内。数分钟后，蛙的部分上皮开始龟裂并脱落到水中。用肉眼可以看见水中有浅灰色、透明的上皮膜。取一小块上皮膜用于制片、观察，看到的就是蛙皮肤的单层上皮细胞。这种制备方法不会对蛙造成伤害。实验四 用高倍镜观察线粒体和叶绿体（必修一P47）一、实验原理：1、叶肉细胞中的叶绿体，散布于细胞质中，呈绿色、扁平的椭球形或球形。可以在高倍显微镜下观察它的形态和分布。2、线粒体普遍存在于动物细胞和植物细胞中，线粒体的形态多样，有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。健那绿（Janus green B）染液是将活细胞中线粒体染色的专一性染料，可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色。线粒体能在健
21、那绿染液中维持活性数小时，通过染色，可以在高倍显微镜下观察到处于生活状态的线粒体的形态和分布。二、目的要求：使用高倍显微镜观察叶绿体、线粒体的形态和分布。三、材料用具：新鲜的藓类的叶（叶子薄而小，叶片是绿色的单层细胞，叶绿体清楚，可取整个小叶直接制片，不需加工即可进行观察，所以作为实验的首选材料）或菠菜叶（若用菠菜叶作实验材料，要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。因为表皮细胞不含叶绿体）、黑藻叶等。新配 制 的 质 量 分 数 为 1%的 健 那 绿 染 液 （ 将 0.5g 健 那 绿 溶 解 于50mL 生 理 盐 水 中 ， 加 温 到 30-40 摄 氏 度 ， 使 其 充 分 溶 解 ）
22、显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、镊子、消毒牙签四、方法步骤：1.制作藓类叶片临时装片 在洁净的载玻片中央滴一滴清水。用镊子取一片藓类的小叶，或者取菠菜叶稍带些叶肉的下表皮，放入水滴中，盖上盖玻片。注意：临时装片中的叶片不能放干了，要随时保持有水状态（保证细胞器的正常形态并能悬浮在细胞质基质中，否则细胞或叶绿体失水收缩，将影响对叶绿体形态和分布的观察） 。2.观察叶绿体 将制作好的叶片临时装片放在低倍显微镜下观察，找到叶片细胞后，换用高倍显微镜，仔细观察叶片细胞内叶绿体的形态和分布情况。3. 制作人的口腔上皮细胞临时装片 在洁净的载玻片中央滴一滴健那绿染液。用消毒牙签在自己漱净的口腔内壁上轻轻地刮
23、几下，将牙签上附有碎屑的一端，放在染液中涂抹几下，盖上盖玻片。4.观察线粒体 在高倍显微镜下观察经过染色的人的口腔上皮细胞临时装片，可以看到蓝绿色的线粒体，细胞质接近无色。四、讨论：1、细胞质基质中的叶绿体，是不是静止不动的？为什么？答：不是。呈椭球体形的叶绿体在不同光照条件下可以运动，这种运动能随时改变椭球体的方向，使叶绿体既能接受较多光照，又不至于被强光灼伤。2、叶绿体的形态和分布，与叶绿体的功能有什么关系？答：叶绿体的形态和分布都有利于接受光照，完成光合作用。如叶绿体在不同光照条件下改变方向。又如叶子上面的叶肉细胞中的叶绿体比下面的多，这可以接受更多的光照。实验五 观察植物细胞的质壁分离
24、和复原（必修一P61 探究）一、实验目的：1学会观察植物细胞质壁分离与复原的方法。2了解植物细胞发生渗透作用的原理。二实验原理：把白菜剁碎做馅时，常常要放一些盐。放盐后稍等一会就可见有水分渗出。对农作物施肥过多，会造成“烧苗”现象。1质壁分离的原理：当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而失水，细胞液中的水分就透过原生质层进入到溶液中，使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。由于原生质层比细胞壁的收缩性大，当细胞不断失水时，原生质层就会与细胞壁分离。2质壁分离复原的原理：当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而吸水，外界溶液中的水分就通过原生质层进入到细胞液
25、中，整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态，紧贴细胞壁，使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。二、实验材料：紫色洋葱鳞片叶的外表皮。因为液泡呈紫色，易于观察。也可用水绵代替。质量浓度为 0.3g/ml 的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做质壁分离剂对细胞无毒害作用。刀片、镊子、滴管、载玻片、盖玻片、吸水纸、显微镜，清水三、实验步骤：步 骤 注 意 问 题 分 析1制作洋葱表皮的临时装片。在载玻片上滴一滴水，撕取洋葱鳞片叶外表皮放在水滴中展平（也可挑取几条水绵放入水滴中） 。盖上盖玻片。盖盖玻片应让盖玻片的一侧先触及载玻片，然后轻轻放平。防止装片产生气泡。2用低倍显微镜观察洋葱鳞片叶外表皮细胞中字的的中央液泡的大
26、小，以及原生质层的位置可看到：液泡大，呈紫色，原生质层紧贴着细胞壁。 （或水绵细胞中有带状叶绿体，原生质层呈绿色，紧贴着细胞壁。液泡含花青素，所以液泡呈紫色。先观察正常细胞与后面的“质壁分离”起对照作用。3观察质壁分离现象。从盖玻片的一侧滴入0 3g/ml 的蔗糖溶液，在另一侧用吸水纸吸引，重复几次。镜检。观察到：液泡由大变小，颜色由浅变深，原生质层与细胞壁分离。原生质层与细胞壁之间充满蔗糖溶液。重复几次糖液浓度不能过高蔗糖溶液浓度大于细胞液浓度，细胞通过渗透作用失水，细胞壁伸缩性小原生质层的伸缩性大，液泡和原生质层不断收缩，所以发生质壁分离。为了使细胞完全浸入蔗糖溶液中。否则，细胞严重失水死
27、亡，看不到质壁分离的复原。4观察细胞质壁分离的复原现象。从盖玻片的一侧滴入清水，在另一侧用吸水纸吸引，重复几次。镜检。观察到：液泡由小变大，颜色由深变浅，原生质层恢复原状。发生质壁分离的装片，不能久置，要马上滴加清水，使其复原。重复几次。细胞液的浓度高于外界溶液，细胞通过渗透作用吸水，所以发生质壁分离复原现象。因为细胞失水过久，也会死亡。为了使细胞完全浸入清水中。四、实验结论：当外界溶液浓度大于细胞液浓度时，水分会由细胞液中渗出到外界溶液中，通过渗透作用失水；由于细胞壁和原生质层的伸缩性不同，细胞壁伸缩性较小，而原生质层性较大，从而使二者分开；反之，当外界溶液浓度低于细胞液浓度时，则细胞通过渗
28、透作用吸水，分离后的质和细胞壁又复原。实验讨论1如果将上述表皮细胞浸润在与细胞液浓度相同的蔗糖溶液中，这些表皮细胞会出现什么现象？答：表皮细胞维持原状，因为细胞液的浓度与外界溶液浓度相等。2当红细胞细胞膜两侧的溶液具有浓度差时，红细胞会不会发生质壁分离？为什么？答：不会。因为红细胞不具细胞壁。3.质壁分离实验的拓展应用（1 ）判断成熟植物细胞的死活（2 ）测定细胞液浓度范围（3 ）比较不同植物细胞的细胞液浓度（刚刚发生质壁分离所需时间越短。细胞液浓度越小）（4 ）鉴别不同种类的溶液（如 KNO3 溶液和蔗糖溶液）（5 ）证明原生质层具有选择透过性（6 ）证明细胞壁的伸缩性小于原生质层的伸缩性（
29、7 ）检测杂种细胞是否再生出细胞壁，是否具有活性实验六 探究影响酶活性的因素（必修一 P78、P83）实例 1：比较过氧化氢酶和 Fe3+的催化效率一实验原理：新鲜肝脏中有较多的过氧化氢酶。经计算，质量分数为 3.5%的 FeCl3 溶液和质量分数为 20%的肝脏研磨液相比，每滴 FeCl3 溶液中的 Fe3+数，大约是每滴肝脏研磨液中过氧化氢酶分子数的 25 万倍。二实验目的：通过比较过氧化氢在不同条件下分解的快慢，了解过氧化氢酶的作用和意义。三. 材料用具质量分数为 20%的肝脏（如猪肝、鸡肝）研磨液，新配制的体积分数为 3%的过氧化氢溶液，质量分数为 3.5%的 FeCl3溶液量筒，试管
30、，滴管，试管夹，试管架，卫生香，火柴，酒精灯，大烧杯，三脚架，石棉网，温度计四. 方法步骤：步骤 注意问题 解释取 4 支洁净试管，分别编号 1，2 ，3 ，4，向试管内分别加入 2ml不让H2O2 接触皮肤H2O2 有一定的腐蚀性过氧化氢溶液,按序号依次放在试管架上将 2 号试管放在 90左右的水浴中加热，观察气泡冒出的情况，并与 1 号试管作比较。向 3 号试管内滴入 2滴 FeCl3溶液，向 4 号试管内滴入 2 滴肝脏研磨液，观察哪支试管产生的气泡多。不可用同一支滴管肝脏研磨液必须是新鲜的肝脏要制成研磨液由于酶具有高效性，若滴入的FeCl3 溶液中混有少量的过氧化氢酶，会影响实验准确性
31、因为过氧化氢酶是蛋白质，放置过久，可受细菌作用而分解，使肝脏组织中酶分子数减少，活性降低研磨可破坏肝细胞结构，使细胞内的酶释放出来，增加酶与底物的接触面积23min 后，将点燃的卫生香分别放在 3、4号试管内液面的上方，观察哪支试管中的卫生香燃烧更猛烈。放卫生香时，动作要快，不要插到气泡中现象：3 号试管产生气泡多，冒泡时间短，卫生香猛烈复燃，4 号试管产生气泡少，冒泡时间长，卫生香几乎无变化避免卫生香因潮湿而熄灭实验：影响酶活性的条件细胞中几乎所有的化学反应都是由酶来催化的。酶对化学反应的催化效率称为酶活性（enzyme activity） 。唾液淀粉酶、胃蛋白酶等消化酶都是在消化道中起作用
32、的。不同部位消化液的 pH 不一样。唾液的 pH 为 6.27.4，胃液的 pH 为 0.91.5，小肠液的 pH 为 7.6。唾液淀粉酶会随胃液流入胃，胃蛋白酶会随食糜进入小肠。实例 2：温度对酶活性的影响（一）实验目的：1初步学会探索温度对酶活性的影响的方法。2探索淀粉酶在不同温度下催化淀粉水解的情况。（二）实验原理：1淀粉遇碘后，形成紫蓝色的复合物。2淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖（淀粉水解过程中，不同阶段的中间产物遇碘后，会呈现红褐色或红棕色。 ）麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。注：市售 a-淀粉酶的最适温度约 60（三）方法步骤：操作 注意问题 解释取 3 支试管，编上号，然后
33、分别注入 2mL 可溶性淀粉溶液另取 3 支试管，编上号，然后分别注入 1mL 新鲜淀粉酶溶液将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成 3 组，分别放入热水（约 60） 、沸水和冰块中，维持各自的温度 5min不能只用不同温度处理淀粉溶液或酶溶液防止混合时，由于两种溶液的温度不同而使混合后温度发生变化，反应温度不是操作者所要控制的温度，影响实验结果。分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中，摇匀后，维持各自的温度 5min保持各自温度时间不能太短淀粉酶催化淀粉水解需要一定时间在 3 支试管中各滴入 1-2 滴碘液，摇匀后观察这 3 支试管中溶液颜色变化并记录碘液不能滴加太多防止影响实验现象的观察实例
34、 3：PH 值对酶活性的影响1、取三支洁净的试管，编上号 1，2，3，并分别注入 1ml 的新鲜的淀粉酶溶液。2、依次向 1 号，2 号，3 号试管中注入蒸馏水，氢氧化钠溶液，稀盐酸各 1ml 并摇匀。3、分别向 1 号，2 号，3 号试管中各注入 2ml 可溶性淀粉溶液，震荡摇匀。4、将三支试管的下半部浸到 37左右的温水中，保温 5 分钟。5、向三支试管中各加入 2ml 斐林试剂，震荡摇匀。实验现象：一、温度对酶活性的影响1 号试管中的液体未变蓝，2 号和 3 号试管中的液体变蓝，且 2 号试管蓝色比 3 号试管深。二、pH 对酶活性的影响2 号和 3 号试管中的液体未变蓝，1 号试管中的
35、液体变蓝。实验结论：1、在最适宜的温度和最适宜的 ph 条件下，酶的活性最高。2、温度和 ph 偏高或偏低，酶的活性明显下降。注意：探索淀粉酶对淀粉和蔗糖水解的作用。注意事项：1、实验目的：证明酶的专一性 2、遵循等量性原则3、酶催化结果的检验：因为淀粉的水解产物中有还原性糖，故可以用斐林试剂检验还原糖的存在，从而说明淀粉酶催化水解了淀粉；而蔗糖则不能水解，其本身不能与斐林试剂反应。所以此实验的关键在于蔗糖的纯度和新鲜度，如果其中混有少量的葡萄糖或果糖，或蔗糖放置久了受细菌作用，部分分解成了单糖，则与斐林试剂共热时能生成砖红色的沉淀，使人产生错觉实验七 叶绿体色素的提取和分离（必修一 P97）
36、一、实验原理绿叶中的色素能溶解在有机溶剂无水乙醇中，所以，可以用无水乙醇提取叶绿体中的色素。绿叶中的色素不只一种，它们都能溶解在层析液中。然而，它们在层析液中溶解度不同：溶解度高的随层析液在滤纸上的扩散得快；反之则慢。这样，几分之后，绿叶中的色素就会随着层析液在滤纸上的扩散而分离开。 （分子量小的溶解度高）二、实验目的1.进行绿叶中色素的提取和分离。2.探索叶绿体中有几种色素。三、材料用具新鲜的绿叶（如菠菜的绿叶）干燥的定性滤纸，试管，棉塞，试管架，研钵，玻璃漏斗，尼龙布，毛细吸管，剪刀，药勺，量筒（10ml），天平。无水乙醇（若没有无水乙醇，也可用体积分数为 95%的乙醇，但要加入适量的无水
37、碳酸钠，除去水分） ，层析液（由 20 份在 6090下分馏出来的石油醚、2 份乙醇和 1 份苯混合而成。93 号汽油也可代用） ，二氧化硅和碳酸钙。四、方法步骤步 骤 注 意 问 题 分 析1提取色素（1 ）称取 5g 绿叶，剪碎，放入研钵中。 （2）在研钵中放入少许 SiO2、CaCO3，再加入10mL 无水乙醇，进行迅速、充分研磨。加 SiO2加 CaCO3加无水乙醇迅速加 SiO2 有助于研磨得充分。加 CaCO3 防止研磨时叶绿素受到破坏。因为叶绿素含镁，可被细胞液中的有机酸产生的氢代替，形成去镁叶绿素，CaCO3 可中和液泡破坏释放的有机酸，防止叶绿体被破坏。叶绿体色素易溶于有机溶
38、剂。减少研磨过程叶绿素的分解2收集滤液将研磨液迅速倒入玻璃漏斗（漏斗基部放一单层尼龙布）中进行过滤。将滤液收集到试管中，及时用棉塞将试管口塞严。尼龙布起过滤作用。试管口用棉花塞塞紧是为了防止挥发和色素氧化3制备滤纸条将干燥的定性滤纸剪成略小于干燥可吸收更多的滤液。试管长与直径的滤纸条，一端剪去两个角，并在距这一端1cm 处划一铅笔线。顺着纸纹剪成长条一端剪去二个角层析时，色素分离效果好。可使层析液同时到达滤液细线。4划滤液细线用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线划出细、齐、直的一条滤液细线，待滤液干后再画一两次。滤液细线越细、越齐越好。重复三次。防止色素带之间部分重叠。增加色素在滤纸上的附着量，使
39、分离的色素带清晰分明，实验结果更明显。5 纸层析法分离色素将适量的层析液倒入试管中，将滤纸条（有滤液细线的一端朝下）轻轻插入层析液中，随后用棉塞塞紧试管口。注意，不能让滤液细线触及层析液。（也可用小烧杯代替试管，用培养皿盖住小烧杯）层析液不能没及滤纸条。烧杯要盖培养皿盖。防止色素溶解在层析液中层析液中的苯、丙酮、石油醚易挥发。为避免过多吸入层析液中的挥发性物质，本实验应在通风条件下进行。实验结束时及时用肥皂洗手。6观察实验结果最宽：叶绿素 a；最窄：叶绿素 b；相邻色素带最近：叶绿素 a 和叶绿素 b；相邻色素带最远：胡萝卜素和叶黄素。五、考点提示：1、二氧化硅：为了使研磨充分；碳酸钙：保护色
40、素免受破坏；丙酮：色素的溶剂。 2、扩散最快的是胡萝卜素（橙黄色） ，扩散最慢的是叶绿素 b（黄绿色）。3、裁取定性滤纸时，注意双手尽量不要接触纸面，以免手上的油脂或其他脏物污染滤纸。4、制备滤纸条时，要将滤纸条的一端剪去两角,这样可以使色素在滤纸条上扩散均匀,便于观察实验结果。5、根据烧杯的高度制备滤纸条，让滤纸条长度高出烧杯 1cm ，高出的部分做直角弯折。6、滤纸上的滤液细线如果触到层析液，细线上的色素就会溶解到层析液中，就不会在滤纸上扩散开来，实验就会失败。7、画滤液细线时，用力要均匀，速度要适中8、研磨要迅速、充分。a.因为丙酮容易挥发; b.为了使叶绿体完全破裂.从而能提取较多的色
41、素;c.叶绿素极不稳定，能被活细胞中的叶绿素酶水解而被破坏。实验八 探究酵母菌的呼吸方式（必修一 P91）一实验原理：1酵母菌是一种单细胞真菌，在有氧和无氧的条件下都能生存，属于兼性厌氧菌，因此便于用来研究细胞呼吸的不同方式。2 CO2 可使澄清石灰水变混浊，也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变成黄色的时间长短，可以检测酵母菌培养 CO2 的产生情况。3 橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与乙醇（酒精）发生化学反应，在酸性条件下，变成灰绿色。三方法步骤：1酵母菌培养液的配制取 20g 新鲜的食用酵母菌，分成两等份，分别放入锥形瓶 A（500mL）和锥形
42、瓶 B（500mL）中 ，再分别向瓶中注入 240mL 质量分数为 5%的葡萄糖溶液2检测 CO2 的产生用锥形瓶和其他材料用具组装好实验装置（如图） ，并连通橡皮球（或气泵） ，让空气间断而持续地依次通过 3 个锥形瓶（约 50min） 。然后将实验装置放到 25-35的环境中培养 8-10h。3检测洒精的产生各取 2mL 酵母菌培养液的滤液，分别注入 2 支干净的试管中。向试管中分别滴加 0.5mL 溶有 0.1g 重铬酸钾的浓硫酸溶液（体积分数为 95%-97%）并轻轻振荡，使它们混合均匀，观察试管中溶液的颜色变化。实验九 观察细胞的有丝分裂（必修一 P115）一实验原理：1在高等植物体
43、内，有丝分裂常见于根尖、芽尖等分生区细胞。由于各个细胞的分裂是独立进行的，因此在同一分生组织中可以看到处于不同分裂时期的细胞。2染色体容易被碱性染料（如龙胆紫溶液）着色，通过在高倍显微镜下观察各个时期细胞内染色体（或染色质）的存在状态，就可判断这些细胞处于有丝分裂的哪个时期，进而认识有丝分裂的完整过程。染色体容易被碱性染料（如龙胆紫染液）着色二实验目的：1制作洋葱根尖细胞（或植物形成层）有丝分裂装片2观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期，比较细胞周期不同时期的时间长短。3绘制植物细胞有丝分裂简图。三材料用具： 洋葱（可用葱、蒜代替） 。因为根尖生长点属于分生组织，细胞分裂能力强，易观察到有丝分裂各个时期的细胞。
