1、 自 2002年微生物专业委员会成立至今，我国药品微生物检验有了革命性的进步， 2005版药典明确了对检测环境的要求、对标准的制订原则做了科学的修订及引入验证理念等； 2010版药典增加对培养基适用性检查、新增了药品微生物实验室规范指导原则等 4个附录。从人员、培养基、菌种、实验室的布局和运行、设备、文件、实验记录、结果的判断等方面提出了明确的要求。山东省药品检验所1n 微生物实验室建设问题n 无菌检查常见问题n 微生物限度检查常见问题n 抑菌效力检查法山东省药品检验所2微生物实验室建设问题n 基本原则防止微生物污染事件的发生（包括对环境、实验人员、试验样品等的）。n 有利于试验操作的进行山东
2、省药品检验所3USP对于实验室布局和运作的规定n Layout of the lab should enhance operationsu Prevent corss-contaminationu Separation of activitiesn Promote Saftyn Lab area should have separate “clean” and “ live culture ”areaspoints, barriersn When a sample has growth , all further work in the “ live culture” arean Sampli
3、ng should take place carefully aseptic conditionsn EM equipment should be loaded enviroment to be sampled, and carefully handledn Isolator technology may be useful山东省药品检验所4n 微生物实验室可单独建设也可共用普通建筑，但应自成一区，单独设立一层，或一层楼的一端。与建筑物其它区域相通的部分应有门相隔。n 可按四区域划分：核心实验区、缓冲辅助区、 PII级生物安全区、一般实验及准备区 。n 核心实验区可按具体工作需要划分为数个试验
4、单元，核心区各实验单元最好独立运行 ，核心区与 PII级生物安全区不得共用一套换风系统，严格控制交叉污染的发生。n 各房间应功能明确，不得混用。n 药品检验、食品检验、化妆品检验等不得共用无菌室和缓冲间，防止交叉污染。n 准备室、洁净室、培养室等布局，应方便物品的传送，设置可以互锁的洁净双扉传递窗，坚决避免直接的空气交换防止交叉污染。 n 微生物实验室房门应尽量实现自动关闭，缓冲区门为互锁。同一区域内各实验单元房门应朝向同一方向或交错布局，防止直接的空气交换。山东省药品检验所5n 除地面、墙面、顶棚和工作台外，传递窗、物品台、坐凳、门把手等细微环节，也应做到易于清洁，耐腐蚀、不起尘、不开裂、光
5、滑防水，便于消毒。n 洁净室内照明、紫外、超净工作台等仪器设备开关易设置在第 1缓冲间以外，便于控制。n 洁净室内各区域的风速、压差、温度、湿度显示等易设置在第 1缓冲间以外或第 1缓冲间外可以观察到的地方，便于观察纪录，实时提示屏障系统的有效性 。n 洁净区内部和外部宜设置对讲设备，便于实验人员的信息交流和协作。n 洁净室内不应安装水槽、水管、上下水道等，避免滋生微生物。n 微生物实验室空调系统的设计应充分考虑生物安全柜、恒温水浴、培养箱、冰箱、高压蒸汽灭菌器等冷、热、湿和污染负荷。n 无菌室内不宜放置水浴等对湿度影响较大的仪器，如需要放置应加盖，并经常换水 ，防止微生物滋生n 由于实验室建
6、成后，结构布局很难变更，所以应对未来的人员编制、检验内容、工作量、所需仪器做出规划，充分考虑实验室的承载能力，必要时预留部分空间。山东省药品检验所6山东省药检所微生物实验室平面图山东省药品检验所 7微生物实验室的环境监控n 保证微生物实验室安全、有效运行n 对实验结果的可靠性做出有力支持微生物实验室建成后，必须配备相应的环境监控设备：浮游菌采集器、尘埃粒子计数器、风速仪、压差计、照度计和噪声计等等，对于微生物实验室环境保持，以定期监控为主要手段。过多的消毒、熏蒸会对无菌室的通风系统管路和试验仪器造成一定的腐蚀，影响使用寿命，不合理的擦拭反而可能会增加无菌室污染的机会，同一种消毒剂的反复使用可能
7、会使微生物对消毒剂的耐受力增强。因此，应根据监测情况制定相应的清洁计划。 山东省药品检验所8微生物实验室的环境监控 环境菌库的建立 n 方法定期采集洁净室沉降菌及浮游菌，采用适宜的方法对搜集到的菌株进行鉴定，包括 形态观察、生化鉴定、遗传信息分析（ 16sRNA测序、 DNA脉冲场电泳分析等）、傅里叶红外光谱分析等，对每一株菌建立详细档案。n 目的1.分析无菌室环境菌种类、数量、分布随时间的变化关系，制定相应的消毒计划和工作计划。2.判断药品检出微生物是否是环境相关菌，是否与本实验室环境菌相关。山东省药品检验所9企业生产区域环境菌库的建立当企业产品的灭菌条件和产品稳定性之间产生矛盾时，该如何处理？山东省药品检验所10
