选择性培养基.doc

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资源描述

1、葡萄糖肉浸液肉汤 Dextrose Meat Infusion Broth用途:用于溶血性链球菌的增菌培养配方:(g/L) 牛肉粉 3.0 氯化钠 5.0 蛋白胨 10.0 磷酸氢二钾 2.0 葡萄糖 10.0 pH 值 7.5 0.1 25原理: 蛋白胨、牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸氢二钾为缓冲剂;葡萄糖提供碳源。用法: 称取本品 30.0g,煮沸溶解于 1000ml 蒸馏水中,121 高压 灭菌 15 分钟,备用。 质量控制: 在 36 1培养 24 小时。 质控菌株 溶血性链球菌 单增李斯特氏菌 大肠杆菌 沙门氏菌 27853 25922 14028 生

2、长情况 (10-8)+ (10-8)+ +/+/匹克氏肉汤基础 A Picks Broth BaseA用途:用于溶血性链球菌的增菌培养配方:(g/L)胰蛋白胨 10.0 牛心浸粉 20.0 叠氮钠 0.065 结晶紫 0.002pH 值 7.3-7.5 原理:25胰蛋白胨、牛心浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子;脱纤维兔血(或羊血)为溶血性链球菌提供大 量生长因子;结晶紫和叠氮钠为选择性抑菌剂。 用法: 称取本品 30.0g,加热溶于 1000ml 蒸馏水中,分装, 121高压灭菌 15 分钟, 冷至 50左右时 ,加入脱纤 维羊血, 混匀。质量控制: 在 36 1培养 18-24 小时。 肉浸

3、液肉汤培养基 Meat Infusion Broth用途:用于溶血性链球菌、蜡样芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的增菌培养(GB 标准)配方:(g/L) 牛肉粉 3.0 氯化钠 5.0 蛋白胨 12.0 磷酸氢二钾 2.0 pH 值 7.5 0.1原理: 蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;磷酸氢二钾为缓冲剂;氯化钠可维持均衡的渗透压。 用法: 称取本品 20.0g,溶解于 1000ml 蒸馏水中,121高压灭菌 15 分钟,备用。质量控制: 在 36 1培养 18-24 小时。 25质控菌株 溶血性链球菌 金黄色葡萄球菌 大肠埃希氏菌 沙门氏菌菌株编号 ATCC32210 ATCC2592

4、3 ATCC25922 ATCC14028生长情况 + + + + 浑浊 浑浊 浑浊 浑浊叠氮钠葡萄糖肉汤 Azide Dextrose Broth 用途:用于链球菌的增菌培养配方:(g/L) 胰蛋白胨 15.0 牛肉浸粉 4.5 氯化钠 7.5 葡萄糖 7.5 叠氮钠 0.2 pH 值 7.0 - 7.4 原理: 胰蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;葡萄糖提供碳源;叠氮化钠可抑制革兰氏阴 性菌。用法: 称取本品 34.7g,加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水中 ,分装, 121高压灭菌 15 分钟,备用。质量控制: 在 36 1培养 18-24 小时。质控菌株 肠球菌 大肠埃

5、希氏菌 粪肠球菌 金黄色葡萄球菌 ATCC25922 ATCC29212 乙基紫叠氮钠肉汤 用途:用于链球菌的增菌培养配方:(g/L) 酪蛋白胨 13.5 酵母浸粉 6.5 葡萄糖 5.0 氯化钠 5.0 磷酸氢二钠 2.7 磷酸二氢钠 2.7 叠氮钠 0.4 乙基紫 0.00083 pH 值 7.0 0.2 原理: 酪蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖提供碳源;叠氮化钠可抑制革兰氏阴性菌; 氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸氢二钠和磷酸二氢钠做缓冲剂;乙基紫作为指示剂。用法: 取本品 35.8g,溶解于 1000ml 蒸馏水中,121高压灭菌 15 分钟,备用。质量控制: 25KF

6、 链球菌琼脂 KF Streptococcus Agar 用途:用于链球菌的选择性分离及计数(GB、SN 标准)配方:(g/L) 月示蛋白胨 10.0 酵母粉 10.0 甘油磷酸钠 10.0 氯化钠 5.0 麦芽糖 20.0 乳糖 1.0 叠氮钠 0.4 琼脂 13.0 溴甲酚紫 0.015 pH 值 7.2 0.2 原理: 月示胨和酵母粉提供氮源、维生素和生长因子;麦芽糖和乳糖为可发酵糖类;氯化钠维持均衡的渗透 压;叠氮化钠可抑制革兰氏阴性菌;琼脂是培养基的凝固剂;溴甲酚紫为指示剂染料。 用法:称取本品 69.4g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,121 高压 灭菌 15 分钟,冷却至

7、50-60时,加入无菌 1%TTC 溶液 10ml, 混匀, 倾入无菌平皿 ,备用。质量控制: 在 36 0.5下培养 48h。 菌 名 菌 号 生长状况 良好 被抑制 培养特征 红色或粉红色中心粪性链球菌 大肠埃希氏菌CMCC(B)32223 ATCC25922肠球菌琼脂(胆盐七叶苷叠氮钠琼脂) Enterococcus Agar(Bile Esculin Azide Agar) 用途:用于食品和水中肠球菌的计数货号:HB0133-3 配方:(g/L) 牛肉浸粉 3.0 胰酪蛋白胨 17.0 酵母粉 5.0 牛胆粉 10.0 氯化钠 5.0 七叶苷 1.0 柠檬酸铁铵 0.5 叠氮化钠 0.

8、25 柠檬酸钠 1.0 琼脂 13. pH 值 7.1 0.2 原理: 胰酪蛋白胨和牛肉浸粉、酵母粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;细菌水解 七叶苷与柠檬酸铁铵中铁离子反应形成黑色的 6,7-二羟基香豆素;柠檬酸钠、牛胆粉和叠氮化钠为选择性 抑菌剂,抑制非链球菌的细菌;琼脂是培养基的凝固剂。用法: 称取本品 56.3g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,121 高压灭菌 15 分钟,冷至 45 1,倾入含 1ml 样品 液平皿中约 15ml 培养基,混匀,凝固。35 2倒置培养基培养 24 2h。注:从保温开始至做成平板时间不要超过 4h。质量控制: 在 36 0.5培养

9、 24 小时。 菌 名 菌 号 生长状况 良好 被抑制 被抑制 培养特征 棕黑色,具有棕色晕轮 粪链球菌 金黄色葡萄球菌 大肠埃希氏菌CMCC(B)32223 ATCC6538 ATCC25922CATC 琼脂 CATC Agar 用途:用于食品和饮料肠球菌的分离培养配方:(g/L) 胰酪蛋白胨 15.0 酵母浸粉 5.0 磷酸二氢钾 5.0 柠檬酸钠 15.0 吐温 80 1.0 碳酸钠 2.0 叠氮钠 0.4 红四氮唑(TTC)0.1 琼脂 15.0 pH 值 7.00.2 原理: 胰酪蛋白胨、酵母浸粉提供氮源、维生素和矿物质,磷酸二氢钾是缓冲剂。琼脂是培养基凝固剂。 用法: 称取本品 5

10、8.5g ,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,121高压灭菌 15 分钟, 冷至 5055时, 倾入无菌平皿, 备用。 质量控制: 25胆盐七叶苷琼脂 Bile Esculin Agar 用途:用于肠球菌和肠道致病菌的分离培养配方:(g/L)蛋白胨 8.0 牛胆盐 20.0 柠檬酸铁 0.5 七叶苷 1.0 琼脂 15.0 pH 值 7.1 0.2 原理:蛋白胨提供氮源、维生素和生长因子;细菌水解七叶苷与柠檬酸铁中铁离子反应形成黑色的 6,7-二羟 基香豆素;牛胆盐为选择性抑菌剂,抑制非链球菌的细菌;琼脂是培养基的凝固剂。 用法: 称取本品 44.5g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,1

11、21 高压灭菌 15 分钟,备用。 质量控制: 在 36 1培养 22-24 小时。质控菌株 肠球菌 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 25922 25923 生长情况 (10-7)+ (10-7)+ 黑色 + /哥伦比亚血琼脂基础 Columbia Blood Agar Base 用途:营养非常丰富,用于各种细菌的基础培养基配方:(g/L) 酪蛋白胰酶消化物 10.0g 心胰酶消化物 3.0g 玉米淀粉 1.0g 肉胃酶消化物 5.0g 酵母浸出粉 5.0g 氯化钠 5.0g 琼脂 10.0g PH 值 7.3 0.2原理: 酪蛋白胰酶消化物、肉胃酶消化物、心胰酶消化物和酵母浸出粉提供碳氮源、维生素

12、和氨基酸;淀粉 能促进奈瑟氏菌的生长和增强链球菌的溶血特性;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。 用法: 称取本品 39 克,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装,121 高压灭菌 15 分钟,冷至 45-50左右时, 加入相当于 20mg 庆大霉素的无菌硫酸庆大霉素,混匀,倾入无菌平皿。 质量控制: 在 30-35培养 18-24 小时。 质控菌株 金黄色葡萄球菌 单增李斯特氏菌 大肠埃希氏菌 沙门氏菌 铜绿假单胞菌 菌株编号 ATCC 25923 ATCC 19114 ATCC 25922 ATCC 14028 CMCC 10104 生长情况 良好 良好 良好 良好 良好 有

13、黄色色素 无色透明小菌落 无色透明大菌落 无色大菌落 有绿色色素 其它特征LIM 培养基 LIM Medium 用途:用于链球菌的分离培养(Japan 方法)配方:(g/L) 牛肉粉 10.0 胰蛋白胨 20.0 葡萄糖 2.0 碳酸氢钠 2.0 氯化钠 2.0 磷酸氢二钠 0.4 pH 值 7.8 0.1 原理: 胰蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖提供碳源;氯化钠维持均衡的渗透压磷酸氢 二钠作为缓冲剂。用法: 取本品 36.4g,溶解于 1000ml 蒸馏水中,121高压灭菌 15 分钟,待培养基冷至 45-50时,加入多粘 素 E10mg 和萘啶酮酸 15mg ,混匀 质量

14、控制: 25BETA-SSA 琼脂 BETA-SSA Agar 用途:用于链球菌的选择性分离培养配方:(g/L) 蛋白胨 15.0 大豆蛋白胨 5.0 氯化钠 5.0 麦芽糖 0.25 琼脂 13.0 抑菌剂 0.0262 pH 值 7.1 - 7.5 原理: 蛋白胨和大豆蛋白胨提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基 的凝固剂。 用法: 取本品 38.3g,溶解于 1000ml 蒸馏水中,115高压灭菌 20 分钟,冷至 50左右时,无菌加入 5-10%的脱 纤维羊血,混匀,倾入无菌平皿。 质量控制: 25粪肠球菌琼脂 Enterococcus faecalis

15、 Agar用途:用于粪肠球菌的选择性分离配方:(g/L) 月示胨 0.1 麦芽糖 13.0 酵母浸粉 10.0 甘油磷酸钠 20.0 氯化钠 10.0 乳糖 10.0 溴甲酚紫 5.0 叠氮钠 1.0 TTC0.015 琼脂 0.4 pH 值 7.2 0.2 原理: 月示胨和酵母浸粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;乳糖是大肠菌群可发酵的糖类;叠氮化钠可抑 制革兰氏阴性菌;溴甲酚紫和 TTC 作为指示剂;琼脂是培养基的凝固剂。用法: 取本品 70.0g , 加热溶解于 1000ml 蒸馏水中, 煮沸 5 分钟,冷至 50左右,倾入无菌平皿,备用。 质量控制:25缓冲蛋白胨水 Buffered P

16、eptone Water用途:用于阪崎杆菌前增菌培养(GB2008 标准)配方:(g/L) 蛋白胨 10.0 氯化钠 5.0 磷酸氢二钠(含 12 个结晶水)9.0 磷酸二氢钾1.5 pH 值 7.2 0.2 25 原理: 白胨提供碳源和氮源满足细菌生长的需求;氯化钠可维持均衡的渗透压;磷酸二氢钾和磷酸氢二钠是 缓冲剂 用法: 称取本品 20.0g ,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,121高压灭菌 15 分钟备用。 质量控制: 在 36 1培养 18-24 小时。 质控菌株 单增李斯特氏菌 沙门氏菌 菌株编号 ATCC19114 ATCC14028 生长情况 + + 浑浊 浑浊 其它特征胆

17、汁液态培养基 Bile broth 用途:用于粪链球菌的胆汁耐受试验。配方:(g/L) 猪胆粉 20.0 脑心浸液肉汤 23.1 pH 值 7.4 0.1 用法: 称取本品 43.1g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装试管,121高压灭菌 15 分钟,备用。 质量控制: 在 36 1培养 18-24 小时。M-肠道菌琼脂 M-Enterococcus Agar 用途:用于水中或其它物质中肠球菌分离培养和计数(滤膜法或划线法)配方:(g/L) 胰酪蛋白胨 15.0 大豆蛋白胨 5.0 酵母浸粉 5.0 葡萄糖 2.0 磷酸氢二钾 4.0 叠氮化钠 0.4 TTC 0.1 琼脂 10.0

18、pH 值 7.2 0.2 原理: 胰酪蛋白胨、大豆蛋白胨、酵母浸粉提供氮源、维生素和矿物质,葡萄糖提供碳源,磷酸盐是缓冲剂, 琼脂是培养基凝固剂。用法: 称取本品 42g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,煮沸 1 分钟,冷至 45-50左右时, 倾入无菌平皿。无需高压 灭菌。 质量控制: 25THB 培养基 THB Medium用途:用于链球菌增菌培养配方:(g/L) 牛肉粉 10.0 胰蛋白胨 20.0 葡萄糖 2.0 碳酸氢钠 2.0 氯化钠 2.0 磷酸氢二钠 0.4 pH 值 7.8 0.1 原理: 牛肉粉、胰蛋白胨提供氮源、维生素和矿物质,葡萄糖提供碳源,氯化钠维持均衡的渗透压,

19、磷酸盐 是缓冲剂。 用法: 称取本品 36.4 g,溶解于 1000ml 蒸馏水中,121 高压灭菌 15 分钟, 待培养基冷至 45-50时, 加入多粘 素 E 10mg 和萘啶酮酸 15mg ,混匀。 25PS 琼脂 PS Agar用途:用于消化球菌的培养配方:(g/L) 蛋白胨 10.0 牛肉浸粉 3.0 酵母浸粉 3.0 葡萄糖 2.0 半胱氨酸盐酸盐0.5 氯化钙 0.008 硫酸镁 0.008 磷酸氢二钾 0.04 磷酸二氢钾 0.04 碳酸氢钠 0.4 氯化钠 0.08 吐温 80 1.0 琼脂 13.0原理:蛋白胨、牛肉浸粉 、酵母浸粉提供氮源、维生素和矿物质,葡萄糖提供碳源,

20、磷酸氢二钾和磷酸二氢 钾是缓冲剂。氯化钠维持均衡的渗透压,琼脂是培养基凝固剂。 用法: 称取本品 33.1g,加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水中 ,分装 , 121高压灭菌 15 分钟,备用。质量控制:肠球菌肉汤 Enterococcus Broth用途:用于肠球菌增菌培养配方:(g/L) 胰蛋白胨 17.0 牛肉浸粉 3.0 酵母浸粉 5.0 牛胆粉 10.0 氯化钠 5.0 柠檬酸钠 1.0 七叶苷 1.0 柠檬酸铁铵 0.5 叠氮化钠 0.25 pH 值 7.1 0.2 原理: 胰蛋白胨和酵母浸粉、牛肉浸粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;细菌水解 七叶苷与柠檬酸铁

21、铵中铁离子反应形成黑色的 6,7-二羟基香豆素;柠檬酸钠、牛胆盐和叠氮化钠为选择性 抑菌剂,抑制非链球菌的细菌。 用法: 称取本品 42.8g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装,121 高压灭菌 15 分钟, 备用。质量控制: 在 36 0.5培养 24 小时。 菌 名 菌 号 生长状况 良好 被抑制 被抑制 培养特征 棕黑色,具有棕色晕轮 粪链球菌 金黄色葡萄球菌 大肠埃希氏菌CMCC(B)32223 ATCC6538 ATCC25922脑心浸液肉汤(BHI) Brain Heart Infusion Broth 用途:用于细菌的增菌培养配方:(g/L) 蛋白胨 10.0 脱水小牛脑

22、浸粉 12.5 脱水牛心浸粉 5.0 氯化钠 5.0 葡萄糖 2.0 磷酸氢二钠 2.5 pH 值 7.4 0.2 25 原理: 蛋白胨、脱水小牛脑浸粉、脱水牛心浸粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖可为多种细菌提供能 源;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸氢二钠为缓冲剂。 用法: 称取本品 38.5g,加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水中 ,121高压灭菌 15 分钟,备用。 质量控制: 质控菌株接种后于 35 0.5培养 24h,结果如下: 菌 名 菌 号 生长状况 良好 良好 良好 培养特征 肉汤混浊 肉汤混浊 肉汤混浊粪性链球菌 乙型溶血性链球菌 大肠埃希氏菌CMCC(B)32223 CM

23、CC(B)32210 ATCC25922脑心浸萃液肉汤 Brain Heart Infusion Broth 用途:用于营养苛求细菌的增菌培养配方:(g/L) 月示(shi)蛋白胨 10.0 牛脑浸出粉 10.0 牛心浸出粉 9.0 氯化钠 5.0 葡萄糖 2.0 磷酸氢二钠 2.5 pH 值 7.4 0.2 25 原理: 月示蛋白胨、牛脑浸出粉、牛心浸出粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖可为多种细菌提供能源; 氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸氢二钠为缓冲剂。 用法: 称取本品 38.5g,加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水中 , 121高压灭菌 15 分钟, 备用。 质量控制: 在 35 0

24、.5培养 24h, 菌 名 菌 号 生长状况 良好 良好 良好 培养特征 肉汤混浊 肉汤混浊 肉汤混浊粪性链球菌 乙型溶血性链球菌 大肠埃希氏菌CMCC(B)32223 CMCC(B)32210 ATCC25922脑心浸液琼脂(BHIA) Brain Heart infusion Agar 用途:用于营养苛求细菌的增菌培养配方:(g/L) 牛脑浸粉 4.0 牛心浸粉 4.0 蛋白胨 5.0 酪蛋白胨 16.0 氯化钠 5.0 葡萄糖 2.0 磷酸氢二钠 2.5 琼脂 13.5 pH 值 7.4 0.2 原理: 牛脑浸粉、牛心浸粉、蛋白胨、酪蛋白胨提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖可为多种细菌提

25、供能 源;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸氢二钠为缓冲剂,琼脂为凝固剂。 用法: 称取本品 52.0g,加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水中 ,121高压灭菌 15 分钟,备用。 25质量控制: 控菌株接种后于 35 0.5培养 24h 菌 名 菌 号 生长状况 良好 良好 良好粪性链球菌 乙型溶血性链球菌 大肠埃希氏菌CMCC(B)32223 CMCC(B)32210 ATCC25922Pfizer 肠球菌选择性琼脂(PSE 琼脂) Pfizer Enterococcus Selective Agar 用途:用于粪链球菌的选择性分离和计数(SN 标准)配方:(g/L) 蛋白胨 20.0g 酵母

26、浸粉 5.0g 牛胆汁物 10.0g 氯化钠 5.0g 柠檬酸钠 1.0g 柠檬酸铁铵 0.5g 叠氮化钠 0.25g 七叶苷 1.0g 琼脂 15.0g pH 值 7.1 0.2原理: 蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;细菌水解七叶苷与柠檬 酸铁铵中铁离子反应形成黑色的 6,7-二羟基香豆素;柠檬酸钠、牛胆汁物和叠氮化钠为选择性抑菌剂,抑 制非链球菌的细菌;琼脂是培养基的凝固剂。用法: 称取本品 57.75 克,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装, 121高压灭菌 15 分钟,备用。 质量控制: 质控菌株接种后,于 35 0.5培养 24h, 菌 名

27、菌 号 生长状况 良好 培养特征 棕黑色,具有棕色晕轮 粪链球菌CMCC(B)32223金黄色葡萄球菌 大肠埃希氏菌ATCC6538 ATCC25922被抑制 被抑制 MEI 培养基 MEI Medium用途:用于一步滤膜法显色检测或计数水中的肠球菌配方:(g/L) 10.0 蛋白胨 15.0 氯化钠 1.0 七叶苷 0.05 放线菌酮 0.15 叠氮化钠 30.0酵母浸粉 0.75 显色剂 15.0 琼脂 pH 值 7.1 0.2 原理:用法:称取本品 72.0g ,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中, 分装三角瓶,每瓶 200ml,121高压灭菌 15 分钟,冷 至 50左右时, 每瓶加入 4.8%萘啶酮酸溶液 1ml(加入几滴 0.1N NaOH 溶液溶解)和 0.4%TTC 溶液 1ml,混 匀, 倾入无菌平皿,备用。

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