1、抗炎免疫药物的研究进展抗炎免疫药物的研究进展 邴飞虹邴飞虹 依据抗炎免疫药理学的新观依据抗炎免疫药理学的新观 点点 ,综述了非甾体类抗炎免疫综述了非甾体类抗炎免疫 药、甾体类抗炎免疫药和疾药、甾体类抗炎免疫药和疾 病调修药的药理作用、临床病调修药的药理作用、临床 应用及研究进展应用及研究进展 既往观点认为既往观点认为 ,炎症与免疫是炎症与免疫是 疾病过程中两个独立的过程疾病过程中两个独立的过程 , 我国学者近年提出我国学者近年提出 ,炎症与免炎症与免 疫是疾病的两个侧面疫是疾病的两个侧面 ,相互重相互重 叠不可分割叠不可分割 由此提出抗炎免疫药理学的新观点。由此提出抗炎免疫药理学的新观点。 根
2、据这一观点把抗炎免疫药物重新划根据这一观点把抗炎免疫药物重新划 分为分为 :非甾体类抗炎免疫药非甾体类抗炎免疫药 (Non- steroidal anti- inflammatory immunity drugs,NSAIDs)、甾体类抗炎免疫药、甾体类抗炎免疫药 (Steroidal anti-inflammatory immunity drugs,SAIDs)和疾病调修药和疾病调修药 (Diseasemodifying drugs,DMDs) 1 NSAIDs的研究进展的研究进展 NSAIDs的临床应用非常广泛。它能有的临床应用非常广泛。它能有 效减轻炎症性疾病的症状与体征。迄效减轻炎症性
3、疾病的症状与体征。迄 今为止仍是全球使用最多的药物之一今为止仍是全球使用最多的药物之一 。传统的此类药物包括水杨酸类、丙。传统的此类药物包括水杨酸类、丙 酸类、乙酸类、灭酸类、喜康类和吡酸类、乙酸类、灭酸类、喜康类和吡 唑酮类等。作用机制为抑制前列腺素唑酮类等。作用机制为抑制前列腺素 (PG)合成。因为合成。因为 PG具有扩张血管、促具有扩张血管、促 进炎性介质渗出、产生或增敏痛觉等进炎性介质渗出、产生或增敏痛觉等 作用作用 PG在慢性炎症反应中在慢性炎症反应中 有致炎与抗炎有致炎与抗炎 的双重作用。生理条件下的的双重作用。生理条件下的 PG能保能保 护胃黏膜、扩张肾血管。因此护胃黏膜、扩张肾
4、血管。因此 NSAIDs在应用中难免出现治标不治在应用中难免出现治标不治 本本 ,不良反应多的弊端。目前研究不良反应多的弊端。目前研究 的的 NSAIDs以不抑制以不抑制 PG合成合成 ,而主要而主要 影响影响 PG致炎作用为目标。致炎作用为目标。 PG还是环还是环 氧酶氧酶 (COX)的主要代谢产物的主要代谢产物 当当 COX途径受到抑制后途径受到抑制后 ,脂氧酶活性脂氧酶活性 相应增加相应增加 ,导致其代谢产物白三烯导致其代谢产物白三烯 增加增加 ,而后者也是一类重要的炎症而后者也是一类重要的炎症 介质介质 ,与与 PG有协同作用。理想的有协同作用。理想的 NSAIDs应该对应该对 PG和
5、白三烯的致炎作和白三烯的致炎作 用有双重拮抗作用。现已进入临床用有双重拮抗作用。现已进入临床 试验阶段的此类药物有替尼达喜试验阶段的此类药物有替尼达喜 (tenidap),苯恶洛酚等苯恶洛酚等 鉴于疗效相近的鉴于疗效相近的 NSAIDs常常具有不常常具有不 同的副作用同的副作用 ,而对乙酰氨基酚有解而对乙酰氨基酚有解 热镇痛作用热镇痛作用 ,却无抗炎作用。经过却无抗炎作用。经过 基础与临床的大量实验基础与临床的大量实验 ,最终发现最终发现 COX的重要亚型的重要亚型 COX-2在药物作用的在药物作用的 特性及炎症产生过程中起着重要作特性及炎症产生过程中起着重要作 用用 COX-2一般很少在正常
6、组织表达一般很少在正常组织表达 ,这是这是 因为内源性皮质激素对其发挥着抑制因为内源性皮质激素对其发挥着抑制 效应。当炎症发生时效应。当炎症发生时 ,COX-2在炎症组在炎症组 织中高度表达织中高度表达 ,而且表达水平与炎症程而且表达水平与炎症程 度密切相关度密切相关 ,有学者提出有学者提出 COX-2属于诱属于诱 导性表达导性表达 ,因此也称诱生性环氧酶。大因此也称诱生性环氧酶。大 量量 COX-2选择性抑制剂由此不断推出选择性抑制剂由此不断推出 ( 如二芳香吡唑类、二芳香咪唑类、庚如二芳香吡唑类、二芳香咪唑类、庚 烯类、环戊烯类等烯类、环戊烯类等 ) COX1 和 COX2的特性比较 CO
7、X1 COX2 生成 存在于正常组织 经细胞诱导，存 在于受损伤组织 功能 催化合成 PGE2 、 PGI2 有稳定 和保护细胞的 作用 催化合成 PGE2、 PGI2 是原炎性，具有强 烈的致炎、致痛作 用 FDA批准的第一个批准的第一个 COX-2特异性抑制剂特异性抑制剂 是三环类化合物塞来昔布是三环类化合物塞来昔布 (celecoxib),该药于该药于 1998年上市。随年上市。随 之而来的是罗非昔布等之而来的是罗非昔布等 “昔布类昔布类 ”(coxibs)药物的不断涌现。但临床应药物的不断涌现。但临床应 用实践证明该类药物疗效并不比传统用实践证明该类药物疗效并不比传统 NSAIDs乐观
8、乐观 ,同时仍具许多不良反应同时仍具许多不良反应 (ADR) 普遍认为普遍认为 COX-2特异性抑制剂比萘特异性抑制剂比萘 普生、双氯酚酸好普生、双氯酚酸好 ,但不比尼美舒但不比尼美舒 利和布洛芬等传统利和布洛芬等传统 NSAIDs好。好。 COX- 2特异抑制剂的利与弊提示体内参特异抑制剂的利与弊提示体内参 与炎症与免疫反应的与炎症与免疫反应的 COX系列还可系列还可 能存在更多亚型。另一类能存在更多亚型。另一类 NSAIDs是是 一氧化氮释放型一氧化氮释放型 NSAIDs。这类药物。这类药物 是基于一氧化氮是基于一氧化氮 (NO)药理学研究的药理学研究的 基础基础 ,根据拼合原理发展起来根
9、据拼合原理发展起来 硝酸酯类、亚硝酸盐类、硝酸酯类、亚硝酸盐类、 S巯基谷胱甘巯基谷胱甘 肽都是肽都是 NO适宜的供体适宜的供体 ,与阿司匹林等传与阿司匹林等传 统统 NSAIDs结合结合 ,进入体内后释放出进入体内后释放出 NO和和 NSAIDs。其中。其中 NSAIDs可在体内通过抑可在体内通过抑 制制 COX活性发挥抗炎作用活性发挥抗炎作用 ,而而 NO通过抑通过抑 制噬中性粒细胞聚集、增加黏膜血流制噬中性粒细胞聚集、增加黏膜血流 量促进黏液分泌量促进黏液分泌 ,减少自由基产生等减少自由基产生等 , 在胃肠道起到在胃肠道起到 PG相同的胃肠黏膜保护相同的胃肠黏膜保护 作用作用 ,从而减少
10、传统从而减少传统 NSAIDs的胃肠道的胃肠道 ADR 例如例如 :NO-双氯灭痛、双氯灭痛、 NO-Asprin等等 都显示良好的抗炎作用。无论小剂都显示良好的抗炎作用。无论小剂 量短期给药还是连续给药量短期给药还是连续给药 ,这些这些 NO 释放型衍生物都能有效降低胃肠道释放型衍生物都能有效降低胃肠道 副作用副作用 ,甚至对用药前已存在的溃甚至对用药前已存在的溃 疡也有一定愈合作用疡也有一定愈合作用 研究表明研究表明 ,NSAIDs的临床应用也在拓展的临床应用也在拓展 。除具有良好抗炎、解热和镇痛作用。除具有良好抗炎、解热和镇痛作用 , 用于各种炎性疾病如类风湿性关节炎用于各种炎性疾病如类
11、风湿性关节炎 、软组织风湿症、骨关节炎以外、软组织风湿症、骨关节炎以外 ,还发还发 现该类药物对肿瘤、阿尔茨海默病、现该类药物对肿瘤、阿尔茨海默病、 血栓性疾病等疗效显著。随着研究的血栓性疾病等疗效显著。随着研究的 不断深入不断深入 ,COX-2特异性抑制剂和特异性抑制剂和 NO释释 放型放型 NSAIDs是未来是未来 NSAIDs类的主要代类的主要代 表药物表药物 2 SAIDs SAIDs具有强大的抗炎作用和一定的免疫具有强大的抗炎作用和一定的免疫 抑制作用。它能阻止炎症细胞向炎症部抑制作用。它能阻止炎症细胞向炎症部 位集中、抑制炎性因子释放位集中、抑制炎性因子释放 ,抑制淋巴细抑制淋巴细
12、 胞的增殖与分化。由于胞的增殖与分化。由于 SAIDs严重的不良严重的不良 反应反应 ,临床一般不用于轻症的炎症免疫性临床一般不用于轻症的炎症免疫性 疾病的常规治疗疾病的常规治疗 ,但是治疗严重的炎症免但是治疗严重的炎症免 疫性疾病疫性疾病 (如多发性肌炎、皮肌炎、系统如多发性肌炎、皮肌炎、系统 性红斑狼疮、危重感染、病情急剧恶化性红斑狼疮、危重感染、病情急剧恶化 、急症危象、急症危象 )的首选药物的首选药物 近年国内外学者对采用低剂量糖皮质近年国内外学者对采用低剂量糖皮质 激素治疗风湿性关节炎激素治疗风湿性关节炎 (RA)的安全性的安全性 给予重新评价给予重新评价 ,发现低剂量糖皮质激素发现
13、低剂量糖皮质激素 治疗治疗 RA时时 很少很少 引起严重引起严重 ADR(如骨质疏如骨质疏 松松 ),而而 SARS治疗中治疗中 ,大剂量超常规剂量大剂量超常规剂量 使用糖皮质激素可能会带来较严重使用糖皮质激素可能会带来较严重 ADR 的事实的事实 ,均说明适量应用均说明适量应用 SAIDs对降低对降低 ADR的积极意义的积极意义 近有采用糖皮质激素近有采用糖皮质激素 “脉冲脉冲 ”疗法疗法 (pulsed corticostereids)治疗治疗 RA 患者患者 ,虽疗效不尽统一虽疗效不尽统一 ,但无明显药但无明显药 物物 ADR,对骨代谢只有短暂的抑制对骨代谢只有短暂的抑制 , 不会引起骨
14、质疏松。所以有学者建不会引起骨质疏松。所以有学者建 议这种议这种 “脉冲脉冲 ”疗法可用于严重疗法可用于严重 RA病病 情加剧或新的情加剧或新的 SAIDs应用之前应用之前 （ 用小用小 剂量剂量 脉冲疗法脉冲疗法 ，即每周，即每周 1次，第一周次，第一周 2 5 5毫克，以后每周增加毫克，以后每周增加 2 5毫克，至每周毫克，至每周 10 15 毫克。毫克。 ） 小剂量小剂量 SAIDs不仅具有免疫抑制作不仅具有免疫抑制作 用用 ,还有免疫调节作用。临床上联还有免疫调节作用。临床上联 合应用生理剂量合应用生理剂量 SAIDs和其他药物和其他药物 , 可以提高内源性防御机制可以提高内源性防御机
15、制 ,既能发既能发 挥抗炎作用挥抗炎作用 ,还能抵抗细胞自身免还能抵抗细胞自身免 疫反应疫反应 ,这是治疗这是治疗 RA的一种切实可的一种切实可 行的方法行的方法 SAIDs治疗治疗 RA的适应证可能有的适应证可能有 : 抗炎抗炎 :若应若应 用用 NSAID不能缓解不能缓解 RA的疼痛、晨僵、疲劳等的疼痛、晨僵、疲劳等 症状症状 ,或患者对或患者对 NSAID不能耐受不能耐受 ,可以考虑应可以考虑应 用低剂量用低剂量 SAIDs(如泼尼松如泼尼松 ); 介导疾病调介导疾病调 修药作用修药作用 :开始治疗开始治疗 RA时采用短期大剂量时采用短期大剂量 SAIDs,减量后配合应用减量后配合应用
16、DMDs; 特殊适应证特殊适应证 :SAIDs是孕期和哺乳期是孕期和哺乳期 RA最安全的抗炎药最安全的抗炎药 。有轻度肾衰、老年人、胃肠病患者。有轻度肾衰、老年人、胃肠病患者 ,使用使用 小剂量小剂量 SAIDs比比 NSAIDs好好 ;RA 的特殊类型的特殊类型 , 如风湿性关节炎如风湿性关节炎 /风湿性肌痛重叠综合征风湿性肌痛重叠综合征 一些用于治疗炎症免疫性疾病的外用一些用于治疗炎症免疫性疾病的外用 剂型相继被开发。如泼尼松尼酸酯局剂型相继被开发。如泼尼松尼酸酯局 部外用治疗类风湿炎疗效较好部外用治疗类风湿炎疗效较好 ,且且 ADR 很少发生。局部用药无或少有全身用很少发生。局部用药无或
17、少有全身用 药的严重药的严重 ADR,因此开发外用剂型仍是因此开发外用剂型仍是 今后今后 SAIDs发展的方向之一发展的方向之一 3 DMDs研究进展研究进展 疾病调修药疾病调修药 (DMDs)包括免疫抑制药、免包括免疫抑制药、免 疫增强药和免疫调节药三种。环孢素疫增强药和免疫调节药三种。环孢素 A 的发现使得免疫抑制药进入了新阶段的发现使得免疫抑制药进入了新阶段 。早期免疫抑制药临床多用于抗肿瘤。早期免疫抑制药临床多用于抗肿瘤 , 主要是利用此类药物能够抑制生长旺主要是利用此类药物能够抑制生长旺 盛的细胞盛的细胞 ,也包括免疫细胞。选择性不也包括免疫细胞。选择性不 高高 环孢素环孢素 A对对
18、 T淋巴细胞依赖性免疫反应淋巴细胞依赖性免疫反应 有选择性抑制作用有选择性抑制作用 ,可用于抑制器官移可用于抑制器官移 植后的排斥反应植后的排斥反应 ,同时也能用于炎症免同时也能用于炎症免 疫性疾病如疫性疾病如 RA,原发性肾小球疾病和支原发性肾小球疾病和支 气管哮喘。另一种从链霉菌发酵物提气管哮喘。另一种从链霉菌发酵物提 取出来的活性成分他罗利姆取出来的活性成分他罗利姆 (FK506), 其免疫抑制作用强度是环孢素其免疫抑制作用强度是环孢素 A的的 10100倍倍 与与 FK506结构相似的雷帕霉素在体结构相似的雷帕霉素在体 内外均具有抗免疫活性。最近发现内外均具有抗免疫活性。最近发现 某些
19、广谱抗生素某些广谱抗生素 ,如四环素和小诺如四环素和小诺 霉素也有抗炎和免疫调节作用霉素也有抗炎和免疫调节作用 ,对对 类风湿有一定疗效类风湿有一定疗效 ,可能会有新的可能会有新的 应用前景应用前景 免疫增强药可通过不同途径增强机免疫增强药可通过不同途径增强机 体免疫功能。如胞肽体免疫功能。如胞肽 (romuride)是是 一种比胞壁酰二肽具有更强免疫活一种比胞壁酰二肽具有更强免疫活 性的免疫增强药。可以激活巨噬细性的免疫增强药。可以激活巨噬细 胞诱导单核因子胞诱导单核因子 ,刺激造血活性刺激造血活性 ,使使 外周血白细胞和血小板增高外周血白细胞和血小板增高 ,还能还能 刺激补体生成刺激补体生
20、成 ,发挥非特异性抗感发挥非特异性抗感 染作用染作用 临床用于恢复一种结构类似左旋咪临床用于恢复一种结构类似左旋咪 唑的唑的 tilomisole,能促进淋巴细胞能促进淋巴细胞 恢复和增殖恢复和增殖 ,提高提高 IL-2,INF的产生的产生 , 可适用于治疗可适用于治疗 RA 免疫调节药具有抗炎和双向免疫调节作免疫调节药具有抗炎和双向免疫调节作 用。除一些已上市的免疫球蛋白外用。除一些已上市的免疫球蛋白外 ,值值 得注意的是许多中草药具有抗炎和免得注意的是许多中草药具有抗炎和免 疫调节作用。这些药物的主要成分包疫调节作用。这些药物的主要成分包 括多糖、苷类和生物碱等。多糖类药括多糖、苷类和生物
21、碱等。多糖类药 物如黄芪多糖、人参多糖、枸杞多糖物如黄芪多糖、人参多糖、枸杞多糖 、灵芝多糖、银耳多糖、香菇多糖、灵芝多糖、银耳多糖、香菇多糖、 猪苓多糖和云芝多糖等猪苓多糖和云芝多糖等 ,均有良好的免均有良好的免 疫调节作用疫调节作用 与化疗药物配合使用可增加抗肿瘤效与化疗药物配合使用可增加抗肿瘤效 果果 ,并能部分对抗化疗药物对正常淋巴并能部分对抗化疗药物对正常淋巴 细胞增殖的抑制作用细胞增殖的抑制作用 ,因此可用于一些因此可用于一些 免疫功能低下或肿瘤的辅助治疗。苷免疫功能低下或肿瘤的辅助治疗。苷 类药物如白芍总苷、人参总苷、黄芪类药物如白芍总苷、人参总苷、黄芪 甲苷、雷公藤多苷、三七总
22、皂苷甲苷、雷公藤多苷、三七总皂苷 ,也能也能 发挥抗炎和免疫调节作用发挥抗炎和免疫调节作用 ,特别是白芍特别是白芍 总苷对总苷对 RA有显著疗效有显著疗效 ,已获国家新药证已获国家新药证 书并进入临床使用书并进入临床使用 生物碱类药物包括苦豆碱川乌生物碱类药物包括苦豆碱川乌 总碱槐果碱雷公藤新碱总碱槐果碱雷公藤新碱 ,表现抗表现抗 炎和免疫抑制作用。虽目前上炎和免疫抑制作用。虽目前上 市品种较少市品种较少 ,但进入临床研究的但进入临床研究的 为数不少为数不少 ,相信会是一类有前途相信会是一类有前途 的植物来源的植物来源 DMDs 抗炎免疫药理实验方法抗炎免疫药理实验方法 学的某些进展学的某些进
23、展 抗炎免疫药理学是药理学一门新的抗炎免疫药理学是药理学一门新的 分支学科分支学科 ,其主要研究的目的是探其主要研究的目的是探 讨抗炎免疫药物的作用讨抗炎免疫药物的作用 ,作用机制作用机制 及作用的规律性及作用的规律性 ,寻找防治炎症免寻找防治炎症免 疫功能紊乱性疾病的有效药物疫功能紊乱性疾病的有效药物 ,从从 而有助于揭示炎症免疫功能紊乱性而有助于揭示炎症免疫功能紊乱性 疾病的病因和病理机制疾病的病因和病理机制 随着免疫学、分子生物学、病理随着免疫学、分子生物学、病理 学等相关学科的迅速发展学等相关学科的迅速发展 ,抗炎免抗炎免 疫药理学领域的研究十分活跃疫药理学领域的研究十分活跃 ,涉涉
24、及面很广及面很广 ,研究内容越来越丰富研究内容越来越丰富 ,而而 多学科的相互渗透多学科的相互渗透 ,使抗炎免疫药使抗炎免疫药 理实验方法学有了较大的进展理实验方法学有了较大的进展 ,这这 无疑对抗炎免疫药理学的发展起了无疑对抗炎免疫药理学的发展起了 积极的推动作用积极的推动作用 从整体动物模型和细胞分从整体动物模型和细胞分 子水平两个方面子水平两个方面 ,就近年就近年 来该领域的实验方法学中来该领域的实验方法学中 的某些主要进展的某些主要进展 1 关节炎动物模型关节炎动物模型 大鼠佐剂性关节炎大鼠佐剂性关节炎 (adjuvant arthritis)模型是一种模型是一种 T细胞介导的自细胞介
25、导的自 身免疫性疾病模型身免疫性疾病模型 ,是研究抗炎免疫药是研究抗炎免疫药 物及治疗人类风湿性关节炎药物的理物及治疗人类风湿性关节炎药物的理 想的动物模型想的动物模型 ,已普遍受到人们的重视已普遍受到人们的重视 实验提示实验提示 ,AA免疫反应高峰期脊髓背角免疫反应高峰期脊髓背角 及背根神经节及背根神经节 P物质物质 (substance P, SP)含含 量增多量增多 ,耗竭脊髓背角耗竭脊髓背角 SP,细胞免疫功细胞免疫功 能更为亢进能更为亢进 ,AA病情加重病情加重 ,人为增加脊人为增加脊 髓背角髓背角 SP含量含量 ,AA大鼠免疫水平降低。大鼠免疫水平降低。 推测推测 AA大鼠免疫反应
26、的同时也刺激了大鼠免疫反应的同时也刺激了 含含 SP的感觉神经末梢的感觉神经末梢 ,使脊髓背角使脊髓背角 SP含含 量增多量增多 ,通过未知通路向高级中枢神经通过未知通路向高级中枢神经 传递信息传递信息 ,整合后产生某种反馈抑制整合后产生某种反馈抑制 , 作用于免疫系统作用于免疫系统 ,使之不致于反应过强使之不致于反应过强 ,而起到一定的自身保护作用而起到一定的自身保护作用 提示免疫调节肽提示免疫调节肽 SP,特别是脊髓背特别是脊髓背 角角 SP参与参与 AA鼠免疫系统的调节。为鼠免疫系统的调节。为 从神经免疫调节探讨从神经免疫调节探讨 AA以及多种自以及多种自 身免疫性疾病的发病机理身免疫性
27、疾病的发病机理 ,开发新开发新 型抗炎免疫药物提供了新思路型抗炎免疫药物提供了新思路 型胶原关节炎型胶原关节炎 (collagen typeinduced arthritis, CA) 是是 Trentham等等 1977年首次建立的实验性年首次建立的实验性 关节炎模型。关节炎模型。 1980年代至年代至 90年代初期年代初期 , 国外大量重复国外大量重复 ,并在临床表现、病理组并在临床表现、病理组 织学和免疫学等方面进行了广泛深入织学和免疫学等方面进行了广泛深入 的研究使其不断成熟和完善的研究使其不断成熟和完善 鸡、小牛、大鼠的鸡、小牛、大鼠的 型胶原均能引型胶原均能引 起关节炎。一般可在啮
28、齿类动物和起关节炎。一般可在啮齿类动物和 灵长类动物中产生。本所先后用小灵长类动物中产生。本所先后用小 鼠、大鼠成功地建立了鼠、大鼠成功地建立了 CA 模型。模型。 CA 与与 AA有许多相似之处有许多相似之处 ,但在免但在免 疫指标上也有不同疫指标上也有不同 CA 的免疫功能变化兼有体液免疫和的免疫功能变化兼有体液免疫和 细胞免疫细胞免疫 ,动物体内存在针对自身动物体内存在针对自身 C 的高滴度的高滴度 IgG抗体抗体 ,这些特性更接近人这些特性更接近人 的类风湿性关节炎的类风湿性关节炎 ,因治此是筛选和研因治此是筛选和研 究治疗类风湿性关节炎药物的理想模究治疗类风湿性关节炎药物的理想模 型
29、型 , 为今后研究人类与自身免疫有关为今后研究人类与自身免疫有关 的疾病提供了一个极有价值的实验模的疾病提供了一个极有价值的实验模 型型 2 系统性红斑狼疮动物模型系统性红斑狼疮动物模型 系统性红斑狼疮系统性红斑狼疮 (SLE)是一种病因未明是一种病因未明 , 累及多个系统累及多个系统 ,病程迁延反复的自身免病程迁延反复的自身免 疫性疾病。多年来疫性疾病。多年来 ,理想的动物模型的理想的动物模型的 缺乏一直是影响缺乏一直是影响 SLE研究的主要原因。研究的主要原因。 自六十年代起自六十年代起 ,国内外学者逐渐建立一国内外学者逐渐建立一 系列系列 SLE病理模型病理模型 ,包括自发性和实验包括自
30、发性和实验 性两类性两类 (1)自发性模型自发性模型 : 主要包括三种品系小鼠主要包括三种品系小鼠 : NZB/NZWF1(B/W)、 MRL/MP-lpr(MRL- lpr) 和和 BXSB。 NZB/NZWF1小鼠是小鼠是 NZB 与与 NZW小鼠的杂交子代小鼠的杂交子代 ,可自发性出现免可自发性出现免 疫异常疫异常 ,主要表现为主要表现为 ,T、 B细胞的过早发育细胞的过早发育 与成熟与成熟 ,B细胞多克隆激活细胞多克隆激活 ,抗核抗体出现抗核抗体出现 及免疫复合物性肾炎及免疫复合物性肾炎 MRL-Lpr小鼠的基因组合小鼠的基因组合 75%来自来自 LG,13%来自来自 AKR,12%为
31、为 C3H,0.3%为为 C57BL/6,H-2单倍型为单倍型为 H-2K。该鼠。该鼠 能自发性形成免疫复合物性肾炎能自发性形成免疫复合物性肾炎 , 血清中有大量的抗核抗体血清中有大量的抗核抗体 ,淋巴组淋巴组 织高度增生织高度增生 BXSB小鼠是小鼠是 (C57BL/6JXSB/bLe)F1,其其 H -2单倍型为单倍型为 H-2b,可出现可出现 T、 B细胞异常细胞异常 增生增生 ,胸腺萎缩胸腺萎缩 ,亦可产生大量自身抗亦可产生大量自身抗 体及免疫复合性肾炎体及免疫复合性肾炎 ,后期可并发严重后期可并发严重 关节炎。这些小鼠的共同特征是自发关节炎。这些小鼠的共同特征是自发 性出现一些类似于
32、人性出现一些类似于人 SLE的症状及免疫的症状及免疫 学异常学异常 ,T细胞亚群在免疫功能紊乱中细胞亚群在免疫功能紊乱中 起重要作用。但这些模型发病较晚、起重要作用。但这些模型发病较晚、 周期长周期长 ,不易控制实验过程不易控制实验过程 (2)实验诱导实验诱导 SLE动物模型动物模型 :主要包括同种异体主要包括同种异体 淋巴细胞诱导的小鼠淋巴细胞诱导的小鼠 SLE模型模型 ,空肠弯曲菌空肠弯曲菌 诱导的小鼠诱导的小鼠 SLE模型、模型、 pristerne诱导小鼠诱导小鼠 SLE模型以及肽类及人抗模型以及肽类及人抗 DNA独特抗体诱导独特抗体诱导 的的 SLE模型。这些模型共同的特点是模型。这
33、些模型共同的特点是 :自身自身 抗体出现较早抗体出现较早 ,一般在再次免疫一般在再次免疫 14周内周内 ,12月内基本出现免疫复合物性肾炎等多月内基本出现免疫复合物性肾炎等多 器官慢性炎症表现器官慢性炎症表现 ,实验方法相对简单实验方法相对简单 ,而而 各模型各有特色各模型各有特色 尽管上述模型与人类尽管上述模型与人类 SLE还存在不少还存在不少 差距差距 ,但多种模型相互结合但多种模型相互结合 ,为从不为从不 同侧面研究同侧面研究 SLE的病理机制提供新途的病理机制提供新途 径。分别采用空肠弯曲菌径。分别采用空肠弯曲菌 CJ-S131和和 Pristane成功地建立成功地建立 SLE小鼠模型
34、小鼠模型 , 并初步探讨了免疫调节药白芍总甙并初步探讨了免疫调节药白芍总甙 和褪黑素对和褪黑素对 SLE小鼠的双向免疫调节小鼠的双向免疫调节 作用作用 3 免疫性肝损伤模型免疫性肝损伤模型 对肝脏疾病的病理过程仍缺乏足够的对肝脏疾病的病理过程仍缺乏足够的 认识。但肝内免疫反应已被公认为造认识。但肝内免疫反应已被公认为造 成肝损伤的重要机制之一。朱凡凡采成肝损伤的重要机制之一。朱凡凡采 用刀豆蛋白用刀豆蛋白 A(ConA)和和 2 -去氧鸟苷改变去氧鸟苷改变 小鼠免疫状态小鼠免疫状态 ,再用同系小鼠肝细胞膜再用同系小鼠肝细胞膜 特异性脂蛋白特异性脂蛋白 (LSP)免疫小鼠免疫小鼠 ,诱导小诱导小
35、 鼠自身免疫性肝炎模型鼠自身免疫性肝炎模型 采用异品系小鼠采用异品系小鼠 LSP并在免疫并在免疫 LSP的同的同 时辅以弗氏完全佐剂时辅以弗氏完全佐剂 (FCA),使血清使血清 谷丙谷丙 转氨酶转氨酶 SGPT和和 LSP抗体滴度显著升高。抗体滴度显著升高。 近年来近年来 ,先后建立了用异种血清先后建立了用异种血清 ,包括包括 猪、牛、马血清猪、牛、马血清 ,异体蛋白异体蛋白 ,包括猪白包括猪白 蛋白、血清球蛋白、人丙种球蛋白、蛋白、血清球蛋白、人丙种球蛋白、 人血白蛋白人血白蛋白 ,卡介苗卡介苗 BCG+LPS注射制作免注射制作免 疫肝纤维化病理模型疫肝纤维化病理模型 采用短小棒状杆菌采用短
36、小棒状杆菌 +LPS序贯静脉注序贯静脉注 射建立免疫性肝损伤射建立免疫性肝损伤 ,该模型发病该模型发病 快快 ,血血 SGPT在造模后在造模后 16-18 h达高峰达高峰 水平水平 ,并伴肝脾明显肿大并伴肝脾明显肿大 ,血浆血浆 NO水水 平升高和脾细胞致分裂素反应明显平升高和脾细胞致分裂素反应明显 下降的特点下降的特点 为模拟临床肝炎的细胞免疫病理过为模拟临床肝炎的细胞免疫病理过 程程 , 采用采用 1% 2,4,6-三硝基苯基三硝基苯基 Picryl chloriele(Pcl)乙醇溶液腹部涂药乙醇溶液腹部涂药 致敏致敏 ,再用再用 0.2%0.5% Pcl的橄榄油的橄榄油 溶液肝穿刺攻击
37、溶液肝穿刺攻击 ,18 h后模型组血后模型组血 清转氨酶显著上升清转氨酶显著上升 ,肝组织坏死肝组织坏死 ,炎炎 性细胞浸润性细胞浸润 ,甚至浸及整个肝脏甚至浸及整个肝脏 上述模型的建立上述模型的建立 ,为肝损伤的机制为肝损伤的机制 及药效评价开辟了新的途径及药效评价开辟了新的途径 ,但仍但仍 与病毒性肝炎免疫损伤所致的纤维与病毒性肝炎免疫损伤所致的纤维 化模型有相当大的差异。寻找新的化模型有相当大的差异。寻找新的 、在免疫及病理学等方面相比更接、在免疫及病理学等方面相比更接 近临床肝炎的动物模型仍是今后人近临床肝炎的动物模型仍是今后人 们努力的方向们努力的方向 艾滋病艾滋病 (AIDS)是是
38、 20世纪人类的头号世纪人类的头号 病魔。寻找合适的动物模型一直是病魔。寻找合适的动物模型一直是 AIDS研究的重大难题之一。理想的研究的重大难题之一。理想的 AIDS动物模型应是动物模型应是 :能感染能感染 HIV;动动 物体型小物体型小 ;遗传、免疫、代谢特性遗传、免疫、代谢特性 较清楚较清楚 ;靶细胞应该是靶细胞应该是 CD4+淋巴细淋巴细 胞和巨噬细胞为主胞和巨噬细胞为主 靶器官应包括血清、淋巴组织和脑靶器官应包括血清、淋巴组织和脑 ,传染方式应类似传染方式应类似 HIV,发病症状与发病症状与 人人 AIDS相似。但至今尚未发现理想相似。但至今尚未发现理想 的动物模型。近年来的动物模型
39、。近年来 ,有关艾滋病有关艾滋病 动物模型的研究取得了一些进展。动物模型的研究取得了一些进展。 常用的评价艾滋病治疗药物的鼠模常用的评价艾滋病治疗药物的鼠模 型主要有型主要有 (1)鼠白血病病毒模型鼠白血病病毒模型 鼠白血病病毒鼠白血病病毒 (Murine leukernia virus,MULV)属于反转录病毒属于反转录病毒 ,接种于接种于 敏感鼠后可以导致脾淋巴结增大敏感鼠后可以导致脾淋巴结增大 ,免疫免疫 抑制和机会性感染等症状抑制和机会性感染等症状 ,称为称为 鼠艾滋鼠艾滋 病病 (MAIDs)。该模型也被用于研究和评。该模型也被用于研究和评 价价 AIDS的治疗药物以及免疫调节剂的治
40、疗药物以及免疫调节剂 (2)嵌合鼠模型嵌合鼠模型 利用严重联合免疫缺陷小鼠利用严重联合免疫缺陷小鼠 (SCID)缺乏缺乏 功能性功能性 T、 B细胞细胞 ,而不发生异体移植排而不发生异体移植排 斥反应的特性斥反应的特性 ,将胚胎组织或末梢血细将胚胎组织或末梢血细 胞移植给胞移植给 SCID,从而建立嵌合型鼠模型从而建立嵌合型鼠模型 。其特点是对多种病人血液中。其特点是对多种病人血液中 HIV-1分分 离株和实验室离株和实验室 HIV-1株敏感株敏感 MAIDs模型具有易建立、重复性好、安模型具有易建立、重复性好、安 全周期短全周期短 ,不需特殊实验不需特殊实验 ,不造成生物不造成生物 灾害等特
41、点灾害等特点 ,作为筛选抗反转录病毒药作为筛选抗反转录病毒药 物和免疫调节剂的模型具有明显的优物和免疫调节剂的模型具有明显的优 势势 ,但但 MULV虽携带反转录病毒所具有虽携带反转录病毒所具有 gag、 pol、 env等共同基因等共同基因 ,没有没有 HIV-1 所特有的所特有的 nef等调节基因等调节基因 MULV/MAIDs系统只能用于评价那些系统只能用于评价那些 作用于反转录病毒共同基因的药物作用于反转录病毒共同基因的药物 。而。而 SCID/HIV-1模型系统尚处于建模型系统尚处于建 立时期立时期 ,操作复杂、病毒在体内复操作复杂、病毒在体内复 制过程和病理生理变化尚不清楚制过程和
42、病理生理变化尚不清楚 , 它是它是 HIV-1感染的小动物模型感染的小动物模型 ,具有具有 MULV/MAIDs系统不可比拟的优势系统不可比拟的优势 , 是一种很有希望的小动物模型是一种很有希望的小动物模型 5 早老性痴呆早老性痴呆 早老性痴呆早老性痴呆 (Alzheimer s disease,AD)是一种与年龄相关的、是一种与年龄相关的、 进行性神经退化而导致痴呆的疾病进行性神经退化而导致痴呆的疾病 。流行病学研究发现。流行病学研究发现 ,使用抗炎药使用抗炎药 物的人群物的人群 AD发病率发病率 ,症状及持续时症状及持续时 间均明显低于、轻于对照人群间均明显低于、轻于对照人群 炎症免疫机制
43、在炎症免疫机制在 AD的发生发展中起重要作的发生发展中起重要作 用。尤其是通过中枢小胶质细胞的激活用。尤其是通过中枢小胶质细胞的激活 ,释释 放放 IL-1及及 IL-6等炎症细胞因子等炎症细胞因子 ,促进脑内淀促进脑内淀 粉样前体蛋白粉样前体蛋白 (amyloid precursor peptide,APP)变为淀粉样蛋白变为淀粉样蛋白 (amyloid-peptide) 及老年斑及老年斑 (senile plaques,SPS)的形成的形成 ,使神经纤维缠结使神经纤维缠结 ,突突 触减少和神经元丧失。此外触减少和神经元丧失。此外 ,细胞凋亡、氧细胞凋亡、氧 化应激、化应激、 tau过度磷酸
44、化等均可能是过度磷酸化等均可能是 AD的发的发 病机制病机制 对对 AD发病机理尚缺乏根本的了解发病机理尚缺乏根本的了解 ,因此因此 尚缺乏真正的尚缺乏真正的 AD模型。目前常采用的模型。目前常采用的 主要有主要有 : 1)AlCl3灌胃灌胃 ,建立大鼠老年性痴呆模建立大鼠老年性痴呆模 型型 ,主要病理变化为在痴呆大鼠背海马主要病理变化为在痴呆大鼠背海马 结构各部位可见较多的结构各部位可见较多的 -AP 样免疫反样免疫反 应神经元和较强应神经元和较强 -APP 表达表达 2)毁损毁损 Wistar大鼠迈内特基底核大鼠迈内特基底核 (nucleus basalis of Meynert, nbM
45、)建立建立 AD动物模型动物模型 ,其表现为记其表现为记 忆力下降忆力下降 ,乙酰胆碱酯酶乙酰胆碱酯酶 (Ach E) 锐减锐减 ,-AP 和和 tau蛋白样免疫神经蛋白样免疫神经 元增加、变性、坏死细胞形成元增加、变性、坏死细胞形成 ,并并 有人有人 AD相似的老年斑相似的老年斑 3)采用海马内微量注射采用海马内微量注射 -AP 多肽诱发多肽诱发 AD 模型模型 ,注射一周注射一周 ,学习记忆发生改变学习记忆发生改变 ,出出 现大量胶质细胞反应现大量胶质细胞反应 ,神经原轴突退化神经原轴突退化 。此外。此外 ,还有鹅育覃氨酸基底前脑注射还有鹅育覃氨酸基底前脑注射 致胆碱能损伤大鼠致胆碱能损伤
46、大鼠 ,双侧颈总脉永久性双侧颈总脉永久性 结扎致脑缺血大鼠和结扎致脑缺血大鼠和 D-半乳糖皮下注半乳糖皮下注 射后自由基增多致脑老化小鼠等射后自由基增多致脑老化小鼠等 1995年以来年以来 ,发达国家已用基因技术培发达国家已用基因技术培 育出早老性痴呆动物模型育出早老性痴呆动物模型 ,国内已有单国内已有单 位引进日本快速老化小鼠位引进日本快速老化小鼠 (Senencence accelerated mouse,SAM)模型模型 ,但上述但上述 模型并不具备模型并不具备 AD的全部特征的全部特征 ,具有一定具有一定 局限性。因此局限性。因此 ,采用不同模型采用不同模型 ,多方面多方面 着手着手
47、,仍是研究该类药物的主要途径仍是研究该类药物的主要途径 6 移植免疫移植免疫 同种异体器官移植能导致受体动物同种异体器官移植能导致受体动物 产生排异反应。这种反应能被免疫产生排异反应。这种反应能被免疫 抑制剂抑制或延缓抑制剂抑制或延缓 ,在动物实验中在动物实验中 , 多种器官可以进行异体移植多种器官可以进行异体移植 ,如皮如皮 肤片、肾、心脏、小肠、肝等肤片、肾、心脏、小肠、肝等 ,可可 通过免疫抑制对排异反应的抑制程通过免疫抑制对排异反应的抑制程 度来评价免疫抑制性药物度来评价免疫抑制性药物 通过用药组和对照组的排异时间平均通过用药组和对照组的排异时间平均 值来评价免疫抑制的作用强度值来评价
48、免疫抑制的作用强度 .随着我随着我 国器官移植外科学的发展国器官移植外科学的发展 ,器官移植手器官移植手 术在我国较大医院已相当普及。相对术在我国较大医院已相当普及。相对 来说来说 ,移植免疫的动物模型研究相对滞移植免疫的动物模型研究相对滞 后后 ,研究开发免疫抑制药物对移植免疫研究开发免疫抑制药物对移植免疫 动物模型的影响相对较少动物模型的影响相对较少 开展药物对器官移植免疫动物模型开展药物对器官移植免疫动物模型 机理的研究机理的研究 ,对提高我国移植外科对提高我国移植外科 医生的临床用药水平医生的临床用药水平 ,发展我国自发展我国自 已的免疫抑制药物已的免疫抑制药物 ,尤其从中草药尤其从中
49、草药 中开发新型的免疫抑制具有重要的中开发新型的免疫抑制具有重要的 理论和现实意义理论和现实意义 7神经免疫功能紊乱疾病的动物模型神经免疫功能紊乱疾病的动物模型 神经系统部分疾病的发病机制和免神经系统部分疾病的发病机制和免 疫功能紊乱有关。已明确中枢神经疫功能紊乱有关。已明确中枢神经 脱髓鞘引起多发性硬化脱髓鞘引起多发性硬化 (multiple sclerosis,MS)及周围神经脱髓鞘及周围神经脱髓鞘 病格林病格林 -巴利综合症巴利综合症 (GBS)等疾病与等疾病与 免疫功能有关免疫功能有关 MS是以碱性髓鞘蛋白是以碱性髓鞘蛋白 (myelin basic protein,MBP)为自身抗原为自身抗原 ,GBP则以周则以周 围神经髓鞘中围神经髓鞘中 P2蛋白为重要的抗原蛋白为重要的抗原 实实 验性变态反应性脑脊髓膜炎和实验验性变态反应性脑脊髓膜炎和实验 性变态反应性神经炎模型是人们研性变态反应性神经炎模型是人们研 究神经免疫性疾病的常用模型究神经免疫性疾病的常用模型 (1)实验性变态反应性脑脊髓膜炎实验性变态反应性脑脊髓膜炎 (EAE) 是研究是研究 MS的理想动物模型。其发病的理想动物模型。其发病 机理机理 ,临床体征及病理组织
