1、辅导教案 导学诱思 DAOXUEYOUSI 一、植物组织培养 1生殖类型：_、_、_都是植物无性繁殖的方法。 2植物组织培养的概念：取一部分植物组织，如叶、_、茎、根、_或_ 等，在_的条件下接种在三角瓶中的_上，给予一定 的_和_，使之 产生_，或进而生根发芽。 3激素在植物组织培养过程中的作用： (1)培养基中加入的植物激素是_ _素和_素。 (2)两者的_决定组织是生根还是生芽。细胞分裂素/生长素的比例_时，诱 导芽的生成；细胞分裂素/生长素的比例_ _时，愈伤组织继续生长而不分化；细胞 分裂素/生长素的比例_时，会趋于生根。 4实验设计的思路： (1)材料：菊花 (2)过程： 答案：1
2、.扦插 嫁接 组织培养 2芽 花瓣 花粉 无菌 琼脂培养基 温度 光照 愈伤组织 3(1)生长 细胞分裂 (2)摩尔比浓度 高 基本相等 低 4细胞分裂 生长 分株 生长 根 草炭土 蛭石 二、菊花的组织培养实验 1实验药品材料：_培养基、_酸、发芽培养基、生根培养基。 2实验步骤： (1)放置组织培养材料： 在_中，取出一瓶已进行过_的菊花幼苗，在无菌培养皿上用无菌镊子 和无菌解剖刀切成几段，每段上至少有_。 (2)培养成丛状苗： 在_ _旁，将每段放入 1瓶_中，使茎的一部分_，盖上 _。每瓶也可放入 23 段幼菌切段。在_下保持_的温度 培养，每天 的光照不少于_h。23 周后长成健壮的
3、丛状苗 (3)生根培养： 将健壮的丛状苗在无菌条件下一个个转入生根培养基中，在上述条件下继续培养。 (4)瓶外培养： 将生根的苗移至草炭土或蛭石中，用_或_保持 80%以上的湿度，23 天后打开玻璃罩逐渐_，直到将罩全部打开处于自然湿度下为止。 (5)移至土中培养。 答案：1.MS 萘乙 2(1)超净台 无菌培养 1 张叶片 (2)酒精灯 生芽培养基 插入培养基内 封口 膜 日光灯 1825 14.5 (4)玻璃罩 塑料布 降低湿度进行锻炼 三、实验补充部分 若材料为自然生长的茎，则与上述过程有以下不同： 需要在实验前对自然生长的茎进行处理如下：先在_中浸泡 10 min，再放入 _溶液中浸泡
4、 5 min，然后用_溶液浸泡 5 min，最后在超净台中用 _清洗，再将茎的切段培养在_培养基中。 答案：70%乙醇 5%次氯酸钠 另一 5%次氯酸钠 无菌水 生芽 核心解读 HEXINJIEDU 1植物组织培养所依据的原理是什么？ 植物组织培养所依据的原理是：细胞的全能性(植物细胞的全能性)。 (1)细胞的全能性：一个细胞具有发育成完整个体的潜能。 (2)细胞具有全能性的原因： 生物体细胞一般都是由受精卵经有丝分裂形成的，因而都含有生物一整套遗传物质， 都具有发育成完整个体的潜能。 (3)细胞全能性表达的条件： 在生物体上时不能表现出其全能性，只 能通过细胞分化形成不同的组织、器官，这 是
5、在特定的环境、激素等的影响下基因选择性表达的结果。 细胞表现其全能性的条件 首要条件是脱离母体，另有以下几点： A植物细胞 a植物组织培养时，培养基中除含有一定的水分、无机盐外，还要添加一定的植物激 素(如生长素、细胞分裂素)，这有助于愈伤组织分化为不同组织、器官。 b在植物组织培养的前期对光照无需求，在后期需要光照条件，这有利于细胞生长、 分化。 B动物细胞：由于受到某些因素的制约，其全能性不易表达，但其核仍具有全能性。 2进行植物组织培养时应注意的问题有哪些？ (1)所有实验用具严格灭菌。 (2)接种过程要求严格的无菌操作。 (3)愈伤组织培养。最初避光培养，后期见光 培养。 (4)试管苗
6、培养。要先进行生芽培养，再进行生根培养，试管苗培养要在光照条件下进 行。 3由花粉经植物组织培养成的植株与由植物营养器官(如：茎)培养成的植株一样吗？ 这两个植物组织培养的过程基本相同，但其实质相差甚远，具体请参看下表理解。 花粉植株的产生和植物茎的组织培养的比较 菊花茎的组织培养 月季的花药培养 理论论据 植物细胞的全能性 基本过程 脱分化、再分化 影响因素 选材、营养、激素、pH、温度、光照等 操作流程 制备固体培养基外植体消 毒接种培养移栽栽 培 选材材料消毒接种和培 养筛选和诱导移栽栽 培选育 生殖类型 无性生殖 有性生殖(花药离体培养法) 植株属几倍体 与原材料植株相同(二倍体或 四
7、倍体等) 是原材料植株的单倍体植株 4.为什么说无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键？ 植物组织培养不同于扦 插、分根、叶插等常规无性繁殖。由于植物组织培养所利用的 植物材料体积小、抗性差，所以对培养条件的要求较高，对无菌操作的要求非常严格。如 果不小心引起污染，将可能造成培养工作前功尽弃。 无菌技术包括培养基消毒灭菌和植物材料(外植体)的消毒灭菌。对培养材料进行表面 灭菌时，一方面要考虑药剂的消毒效果；另一方面还要考虑植物材料的耐受能力。不同药 剂、不同植物材料，甚至不同器官要区别对待。 5任何植物组织培养所使用的生长素和细胞分裂素的浓度都相同吗？ 不同物种的植物不可贸然使用与本实验相同
8、的生长素和细胞分裂素浓度，要探索使用 何种激素(合成激素)以及激素的浓度才成。可以参考已发表文献上成熟的经验，也可自己 探索。 6本实验用人工合成的激素，而不用植物中存在的天然激素，为什么？ 植物中存在的天然激素都有相应的使之分解的酶，这样，天然激素在植物体内作用和 存在的时间就较短，而人工合成激素在植物中没有相应分解它的酶，所以作用和存在的时 间长，作用效果明显。 7影响植物组织培养的因素有哪些？ 不同的植物组织，培养的难易程度差别很大。例如，烟草和胡萝卜的组织培养较为容 易，而枸杞愈伤组织的芽诱导就比较难。因此，植物材料的选择直接关系到实验的成败。 对于同一种植物材料，材料的年龄、保存时间
9、的长短等也会影响实验结果。菊花的组织培 养，一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。 离体的植物组织和细胞，对营养、环境等条件的要求相对特殊，需要配制适宜的培养 基。常用的一种培养基是 MS培养基，其主要成分包括：大量元素，如 N、P、K、Ca、Mg、S；微量元素，如 B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co；有机物，如甘氨酸、 烟酸、肌醇、维生素以及蔗糖等。在配制好的 MS培养基中，常常需要添加植物激素。 植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。在 生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。按照不同的顺序使用这两类激 素，会得到不同的实验结果。 使
10、用顺序 实验结果 先使用生长素，后使用细胞分裂 素 有利于细胞分裂，但细胞不分化 先使用细胞分裂素，后使用生长 素 细胞既分裂也分化 同时使用 分化频率提高 当同时使用这两类激素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向。可见，植 物激素的浓度、使用的先后顺序以及用量的比例等，都会影 响实验结果。植物激素的应用 要做到得心应手，还得靠大量实践。 除了上述因素外，pH、温度、光照等条件也很重要。不同的植物对各种条件的要求往 往不同。进行菊花的组织培养，一般将 pH控制在 5.8左右，温度控制在 1822 ，并且 每日用日光灯照射 12 h。 题例领悟 TILILINGWU 【例题 1】 植物组织培
11、养一般情况下属下列的哪种生殖方式( ) A卵式生殖 B分裂生殖 C无性生殖 D有性生殖 解析：本题考查了植物组织培养在生殖上的地位。由于植物组织培养所取的材料一般 是植物的根、茎、叶、芽等营养器官，因此培养的方式属于生殖，但也有例外，若取花药 为材料，则属于有性生殖了。但一般情况下，还是无性生殖。 答案：C 植物组织培养属于有性生殖 还是无性生殖，取决于所选用植物材料。并不都属于无性 生殖。 【例题 2】 植物组织培养的培养基中的什么将决定组织是生根，还是生芽( ) A生长素和细胞分裂素是否齐全 B是生长素先加入还是细胞分裂素先加入 C生长素与细胞分裂素的体积比 D生长素与细胞分裂素的摩尔比
12、解析：植物组织培养的过程受很多因素的影响，其中植物激素就是影响分裂、分化方 向的关键因素。一般来说，这两种激素的摩尔比是决定分化成根还是芽的因素。 答案：D 植物激素是通过生长素与细胞分裂素之间的摩尔比关系来影响植物分化的。一般来说， 若细胞分裂素与生长素的比例高时，诱导芽的生成；低时，会诱导根的生成；相等时，生 长而不分化。 【例题 3】 实验 中对已长出的健壮丛状苗，紧接下去应该进行怎样的处理( ) A移入日光下，在生芽培 养基中培养 B移入日光下，在生根培养基中继续培养 C转入黑暗遮阴环境中，在草炭土或蛭石中栽种 D转入遮阴环境中，在 80%以上湿度下，在任意自然泥土中栽种 解析：植物的
13、组织培养过程按照以下的流程进行：植物组织 丛状苗 生 芽 培 养 基 生根苗 幼苗 成体。本题考查的 生 根 培 养 基 草 炭 土 、 蛭 石 先 遮 阴 ， 保 持 80%湿 度 自 然 土 自 然 光 就是其中的一个环节，即丛状苗长出后，紧接着怎么培养。从上述的流程不难发现，只有 选项 B是正确的。 答案：B 将菊花的植物组织培养全过程化繁为简，用上述的流程图简化理顺。 随堂训练 SUITANGXUNLIAN 1下列属于有性生殖方式的是( ) A用水稻的花药进行组织培养 B用水稻的茎进行组织培养 C扦插、嫁接、分根 D细菌的分裂生殖 答案：A 解析：本题 C、D 均属无性生殖，A 和 B
14、都是组织培养，但是，由于组织培 养的材料不同，生殖类型也因而不同。A 选用的是花药，属有性生殖，B 选用的是营养器官 茎，属无性生殖。 2下面细胞分裂素与生长素的摩尔比，哪一种将促使组织生根( ) A细胞分裂素与生长素的比高时 B细胞分裂素与生长素的比相等时 C细胞分裂素与生长素的比低时 D任意一种情况都可以，取决于是否先施用 生长素 答案：C 解析：这是植物激素：生长素、细胞分裂素对组织生根还是生芽的影响，若 趋于生根，应选择 C。 3在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪项条件是不 需要的( ) A消毒灭菌 B适宜的温度 C充足的光照 D适宜的养料和激素 答案：A 解析：植物组织培养的过程 中，温度、光照、养料和激素对其均有影响。 而消毒和灭菌是培养前进行的，培养过程中只要保证无菌操作即可。
