1、实验 7 -淀粉酶的固定化及淀粉水解 1.酶的生产 提取法：采用一定的技术直接从动植物或微生物的组织、细胞中将酶提取出来。 优点：简单易行，在动植物或微生物资源丰富的地区具有应用价值。 缺点：要有充足的原材料，广泛应用受到限制。 发酵法（常用方法）：通过微生物发酵获得所需要的酶。 优点：易培养、繁殖速度快、便于大规模生产。 2.酶制剂的优点：催化效率高、低能耗、低污染等。 酶制剂的缺点：通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感，容易失活；溶液中的酶很 难回收，不能被再次利用，提高了生产成本；反应后会混在产物中(难分离） ，可能影响产品质量。 3.固定化酶：固定化酶技术。即将酶固定在一定空
2、间内的技术（如固定在不溶于水的载体上） 。 固定化酶的优点：使酶既能与反应物接触，又能与产物分离；固定在载体上的没可以被反复利用。 4.固定化酶方法：吸附法、交联法、包埋法、共价偶连法等。 5.实验操作 实验原理：本实验是用吸附法将 a-淀粉酶固定在石英砂上，一定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱 后，可使淀粉水解成糊精，用淀粉指示剂溶液测试，流出物呈红色表明水解产物糊精生成。 设备及用品：5ml 塑料注射器、50ml 烧杯、滴管、自行车用气门心及夹子、注射器架、试管及微 量离心管 3 支。 材料：-淀粉酶的固定化:在烧杯中将 5mg-淀粉酶溶于 4ml 蒸馏水中.由于酶不纯,可能有些 不溶物。再加
3、入 5g 石英砂,不时搅拌,30min 后装入 1 支下端接有气门心并用夹子封住的注射器中 (石英砂体积约 4ml)。用 10 倍体积的蒸馏水洗涤此注射器以除去未吸附的游离淀粉酶,流速为 1ml/min。 可溶性淀粉溶液:取 50ml 可溶性淀粉溶于 100ml 热水中,搅拌均匀。 5mmol/L KI-I2 溶液：称取 0.127g 碘和 0.83g 碘化钾。加蒸馏水 100ml 完全溶解 后装入滴瓶中。 步骤：将灌注了固定化酶的注射器放在注射器架上,用滴管滴加淀粉溶液,使淀粉 溶液以 0.3ml/min 的流速过柱。在流出 5ml 后接收 0.5ml 流出液,加入 12 滴 KI- I2 溶液,观察颜色.用水稀释 1 倍后再观察颜色。 实验后,用 10 倍柱体积的蒸馏水洗涤此柱,放置在 4冰箱中,几天后再重复上述 实验,看是否有相同的结果。 实验反思： 如何证明洗涤固定化酶柱的流出液中没有淀粉酶? 可在试管中加入 1ml 可溶性淀粉，再加几滴淀粉酶柱流出液，保温几分钟后用碘液 检验。如仍显蓝色，则流出液中没有淀粉酶了。
