1、第 3 节 动物细胞工程 (二) 学习目标 1、简述动物细胞培养的过程、条件及应用（A） ；2、简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程（A） ；3、关注克隆技术的伦理问题（A） 。 四、细胞融合和单克隆抗体 细胞融合 1、细胞融合：指在一定的条件下将 或 细胞 为 的过程。 2、结果：形成 ，如 。 3、原理： 4、促融方法：物理法： ；化学法： ； 生物法： 。 其中应用 进行细胞融合效率较高，且对细胞伤害小，易操作、控制和观察。 5、用途： 动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较： 植物体细胞杂交（获得杂种植株） 动物细胞融合（制备单抗） 原理 融合前的处理 促融方法 意义和用途 单克隆抗
2、体： 1、概念：用单个 B 淋巴细胞与能在体外大量增殖的 细胞进行 ， 形成 ，其就可能产生出化学性质 、 的抗体 单克 隆抗体。 2、优点： 3、制备原理： 免疫的 B 淋巴细胞能产生 ；肿瘤细胞（如骨髓瘤细胞）在体外能 。 利用 使两种细胞融合。 4、制备过程： 思考：杂交瘤细胞有什么特点？ 5、应用： 用于治疗 ，如 ，治疗癌症 “生物导弹” ； 还用于治疗由于 ，如 。 例：如图是制备抗 X 抗体的过程图，根据图解回答问题： （1）给小鼠注射抗原的目的是_ _。 （2）在单克隆抗体制备过程中之所以选用 B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的 杂交瘤细胞具有_ _的特性。 （3）由
3、图中可看出，单克隆抗体制备过程运 用了_和_的动 物细胞工程技术手段，前者常用的诱导剂与 植物原生质体融合不同的是可用 _ _。 （4）单克隆抗体是由同样的抗体分子组成， 与一般的血清抗体相比，单克隆抗体的优点 是_ _。 （5）用本法制备出的单克隆抗体仍具有局限 性，因 为它是用小鼠的_ _细胞制备 的，其化学本质是_ _，对人类有异 物性和免疫原性。 （6）图中有两次筛选过程，其中步骤的目 的是筛选出_，步骤的 目的是筛选出_。 （7）请根据以下信息，设计一方法（不考虑 机械方法） ，从培养液中筛选出杂交瘤细胞。 已知细胞合成 DNA 有 D 和 S 两条途径，其中 D 途径能被氨基嘌呤阻
4、断。人淋巴细胞中有这两种 DNA 的合成途径，但一般不分裂增殖。 鼠骨髓瘤细胞中尽管没有 S 途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加聚 乙二醇促融，获得杂种细胞。 方法：_ _ _。原理：_ _ 。 巩固练习 1、制备单克隆抗体过程中，常用作诱导 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的是 A、灭活的仙台病毒 B、T 淋巴细胞 C、抗原物质 D、活性病毒 2、动物细胞融合技术最重要的用途是 A、养多倍体的经济动物 B、培养具有双亲优良性状的经济动物 C、制备单克隆抗体 D、A、B 两项 3、用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是 A、将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的
5、B 淋巴细胞 B、用纤维素酶处理 B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞 C、用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的 B 淋巴细胞与小鼠骨髓细胞融合 D、筛选杂交瘤细胞，并选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体 4、关于单克隆抗体不正确的是 A、化学性质单一 B、用有性繁殖获得 C、特异性强 D、可用于治病、防病 5、下列过程中，没有发生膜融合的是 A、植物体细胞杂交 B、受精过程 C、氧进入细胞中的线粒体 D、单克隆抗体的产生 6、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是 A、诱导融合的方法完全相同 B、所用的技术手段完全相同 C、所采用的原理完全相同 D、都能形成杂种细胞 7、单克隆抗
6、体制备过程中，骨髓瘤细胞和 B 淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出 杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是 淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 B 淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞 A、 B、 C、 D、 8、关于杂交瘤细胞的叙述中，不正确的是 A、有双亲细胞的遗传物质 B、无增殖的本领 C、可分泌出特异性抗体 D、有大量增殖的本领 9、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆 抗体。与骨髓瘤细胞融合的是 A、经过免疫的 B 细胞 B、没经过免疫的 T 细胞 C、经过免疫的 T 细胞 D、没经过免疫的 B 细胞 10、生产单克
7、隆抗体时，在培养基中加入某种试剂能筛选出杂交瘤细胞，因为该试剂 A、能抑制淋巴细胞和杂交瘤细胞的 DNA 复制 B、能阻止淋巴细胞的原癌基因被激活 C、选择性抑制骨髓瘤细胞的 DNA 复制 D、能阻止杂交瘤细胞核糖体上所有蛋白质的合成 11、 （多选） （2003 江苏）将小鼠骨髓瘤细胞与一种 B 淋巴细胞融合，可使融合的细胞经培 养产生单克隆抗体，其依据是 A、B 淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖 B、B 淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合后才能产生抗体 C、骨随瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体 D、骨髓瘤细胞可以产生抗体，但不能无限增殖 12、下图可表示细胞融合技术的一些过程，请据图回答：
8、 若 A、B 细胞为动物细胞，从 A 和 B 细胞到 C 细胞的过程中，常用 作为 来诱导融合。 若 A、B 细胞为植物细胞，那么这样的细胞已经用酶降解脱掉了 。这 种酶可能是 酶，由此生成的 A 和 B 细胞称为 。 若 A 细胞为骨髓瘤细胞，B 细胞为 B 淋巴细胞，那么 D 细胞称为 细胞。由 D 细胞连续分裂产生大量细胞的过程，称为 过程。这种细胞既能无限繁殖， 又能产生 。 13、动物的淋巴细胞(脾细胞)虽然能够合成特 异性抗体，但可惜它不能在体内繁殖，所以始 终只是一份“自身之物”，没有多大作为。另 一方面，癌细胞(如骨髓瘤)却刚好相反，它本 身虽然不能产生抗体，也没有什么用处，可
9、是 却能在体外长期生长，无限增殖。1975年，英 国剑桥大学分子生物学家实验室的科勒和米尔 C 细胞 D 细胞 A 细胞 B 细胞 斯坦别出心裁，把小鼠的淋巴细胞(脾细胞)和小鼠的骨髓瘤细胞融合起来，成为一株杂交 瘤细胞。这个杂交瘤，由于融合了两家之长，因此不但能稳定地分泌抗体(这是淋巴细胞的 特点)，而且也能在体外稳定地繁殖(这是肿瘤细胞的专长)，于是第一次实现了在体外大量 生产抗体的愿望，如右图所示。 杂交瘤细胞繁殖进行的是 分裂， 其遗传性状 。 单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原(病原体或癌变细胞)与之结合，而绝不攻击任 何正常细胞，故称为“生命导弹，这是利用了 。 (多选题)下列属于单克隆抗体在实践上应用的实例是 （ ） A将抗药菌的某基因引入小鼠细胞内 B培育成功转基因抗虫棉 C利用免疫毒素清除异体骨髓移植中的供体骨髓T细胞 D制成“生物导弹”，将药物定向地带到癌细胞所在部位
