1、专题 2 课题 1 微生物的实验室培养 一基础知识 1.培养基 （1）培养基的种类包括 培养基和 培养基等。 （2）培养基的化学成分一般都含有 、 、 、 四 类营养成分， （3）在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对 、 以及 等的要求。例如：培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加 ；培养霉菌时需要将培养基的 PH 调至 ；培养细菌时需要将培养基的 PH 调至 ；培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件 【思考】为什么各种营养基的具体配方不同，但一般都有水、无机盐、碳源和氮源？ 2.无菌技术 （1）获得纯净培养物的关键是 。避免杂菌污染的方法主要 包括以下四个内容： （2）消毒
2、是指 灭菌是指 【思考】消毒与灭菌的相同点与区别分别是什么？ （3）实验室常用的消毒方法是 ，此外，人们也常使用化学药剂进行消 毒，如用 、 等。常用的灭菌方法有 、 、 ，此外，实验室里还用 或 进行消毒。 二实验操作 1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 （1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤： 倒平板 【思考】 培养基灭菌后，需要冷却到 50 左右，才能用来倒平板。你用什么方法来估计培养基的 温度？ 为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 在倒平板的过程中，如果不小心瘵培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用 来培养微生物吗？为什么？ 2.纯化大肠杆菌
3、（1）微生物接种的方法中最 常用的是 和 。 平板划线法是指 。 稀释涂布平板法是指 。 【思考】 为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需 要灼烧接种环吗？为什么？ 在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 在作第二次以及其后的划线操作是赤什么总是从上一次划线的末端开始划线？ （3）平板划线法和稀释涂布平板法的优缺点： （4）平板划线法和稀释涂布平板法的适用范围： 1. 菌种的保存 为了保持菌种的纯净，需对菌种进行保藏。对于频繁使用的菌种，我们可以采用 法； 对于需要长期保存的菌种，可以采用 法。将菌种放在低温环境中保藏的目的 是 ，但时间长了菌种
4、还是要老化的，因此对临时保存的菌种 个月后 需重新接种 【疑难点拨】 1生物的营养 营养是指生物摄取、利用营养物质的过程。营养物质是指维持机体生命活动，保证发育、 生殖所需的外源物质。 在人及 动物，营养物质包括水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类；在植物，营 养物质包括矿质元素、水、二氧化碳等三类；在微生物，则有水、无机盐、碳源、氮源及 特殊营养物质五类。 2培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温 12 天后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的， 否则需要重新制备。 3无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？ 无菌技术还能有效避免操作者自
5、身被微生物感染。 4平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既 可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 5为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需 要灼烧接种环吗？为什么？ 操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前 灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环 上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数 目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种， 避免 细菌污染环境和感染操作者。
