1、实验五 离体蛙心灌流实验 一 实验目的 1、了解蟾蜍离体心脏的灌流的方法。 2、观察细胞外液钾离子、钙离子浓度变化对心脏活动的影响。 二 实验原理 心脏离体后，如用人工灌流的方法，保持其新陈代谢的顺利进行，则心脏 仍能有节律的自动收缩和舒张，并可维持较长的时间。离体心脏所需的条件应 与动物内环境的理化性质基本相近，因此改变灌流液的理化因素，则可引起心 脏活动的变化。 1、任氏液：正常对照 含有 NaCl、CaCl2、KCl、NaH2PO4、 Na2HPO4 和蒸馏水，其电解质、晶体渗透压、pH 值与蛙的组织液相近。 2、0.65%NaCl 灌流： 3、2%CaCl2 灌流 4、 1%KCl 灌
2、流 5、1:10000 E 灌流 6、1:10000 Ach 灌流 7、心得安 1 受体阻断剂，抑制肾上腺素与 1 受体结合，使 E 不能发挥作用。 8.、阿托品 M 受体阻断剂，抑制 Ach 减慢心率，加速房室传导，增加心房收缩力。 三 实验器材 微机生物信号处理系统， physiology 系统，学校服务器系统，蟾蜍离体蛙 心，任氏液，1%KCl，3%CaCl2，65%NaCl，1/10000 E，心得安 +1/10000,1/10000 Ach，阿托品+1/10000 Ach。 四 实验步骤 1、标本制备（观看视频） 2、仪器及标本的连接 3、具体软件操作： 1）离子试剂：任氏液0.65
3、%NaCl 溶液任氏液清洗1%KCl 溶液任 氏液清洗2%CaCl 2溶液任氏液清洗 2）药物试剂：肾上腺素（E）任氏液清洗心得安任氏液清洗 Ach，任氏液清洗阿托品任氏液清洗。 五 实验结果 图 1 离体蛙心灌流 表 1 离体蛙心灌流数据记录 收缩强度 心率 实验项目 处理前 处理后 处理前 处理后 任氏液 2.45 2.45 34 0.65% NaCl 2.45 1,65 34 34 2% CaCl2 1.27 3.43 34 38 1% KCL 2.43 2.43 35 21 1:10000E 0.9 3.46 33 35 E+心得安 1.13 2.49 33 34 1:10000Ach 1.05 1.11 33 0 Ach+阿托品 1.13 2.46 34 34 六 结果分析 此实验说明心脏具有自律性，兴奋性，传导性，收缩性，离体心脏静脉窦 还能产生兴奋并传导到心房和心室，引起心脏有节律的兴奋和收缩。体内细胞 所直接生存的环境较为稳定，内环境的稳态是细胞、器官维持正常生存和活动 的必要条件，所以改变灌流的溶液，会引起心脏收缩的改变。
