1、高考资源网( ) 您身边的高考专家 版权所有高考资源网- 1 - 基因工程基本操作流程图 基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤: 1.目的基因的获取 2.基因表达载体的构建 3.将目的基因导入受体细胞 4.目的基因的检测与鉴定 其中在第一步目的基因获取部分之前的内容意在指出获取 目的基因的三种方法,即从基因文库中获取目的基因、利用 PCR 扩增目的基因、人工合成目的基因。但书中的图不容易让人看懂, 教学中不妨对此图这部分稍作改动(如图)既可帮助学生梳理知识, 高考资源网( ) 您身边的高考专家 版权所有高考资源网- 2 - 而且有助于后面 PCR扩增目的基因的学习。 基因工程的基本操作步骤
2、目的基因的获取 从基因文库中提取 PCR 技术扩增 人工合成 从基因文库中获取 利用 PCR 技术扩增 人工合成 鸟枪法 反转录 根据已知的 氨基酸序列 合成 DNA 法 基因表达载体的构建 基因表达载体的组成: 复制原点+目的基因 +启动子+终止子+ 标记基因 第一步 第二步 高考资源网( ) 您身边的高考专家 版权所有高考资源网- 3 - 将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法 植物 基因枪法 花粉管通道法 动物:显微注射法 微生物:钙离子处理法 目的基因的检测与鉴定 分子水平检测 个体生物学水平鉴定 导入检测:DNA 分子杂交技术 ,即 使用放射性同位素标记的含目的基 因的 DNA 片段作探针检测。 表达检测 转录检测:分子杂交法, 翻译检测:抗原抗体杂交法 第三步 第四步 对转基因生物进行抗虫或 抗病的接种实验。