实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定.doc

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1、实验一 生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 目的 初步掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。 实验原理 1可溶性还原糖+斐林试剂(浅蓝-棕-)砖红色沉淀 呈色反应 2脂肪+苏丹染液橘黄色(+苏丹染液红色) 3蛋白质+双缩脲试剂紫色反应 实验程序 一、可溶性还原糖的鉴定 选材:含糖类较高、白色或近于白色的植物组织。 制浆 制备组织液 过滤(用一层纱布) 取液 呈 色 反 应 (注:斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后使用) 结论:可溶性还原糖与斐林试剂在加热煮沸的过程中生成砖红色沉淀。 关键步骤:斐林试剂现用现配及用量。 二、脂肪的鉴定 取材:花生种子(浸泡 3-4 小时)将

2、子叶削成薄片 (1)最理想的薄片 (2)在薄片上滴 2-3 滴苏丹染液(2-3min ) 制片 (3)去浮色 (4)制成临时装片 观察:在低倍镜下寻找已着色的圆形小颗粒,然后用高倍镜观察。 结论:脂肪能被苏丹染液染成橘黄色。 关键步骤:子叶削成理想薄片。 三、蛋白质的鉴定 选材与制备组织样液:卵清或黄豆(浸泡 1-2d) 呈 色 反 应 结论:蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应。 关键步骤:先加试剂 A 再加试剂 B。 实验的注意事项 1 还原性糖:分子中含有醛基的糖。如葡萄糖、果糖、麦芽糖。但是蔗糖不是。 2 斐林试剂很不稳定,帮应将组成斐林试剂的甲液(01g/ml 的 NaOH 溶液)和乙液 (005g/ml 的 CuSO4 溶液)分别配制、储存,使用时,再临时配制,将 4-5 滴乙液滴 入 2ml 甲液中,配完后立即使用。 3 双缩脲试剂的使用,应先加试剂 A(01g/ml 的 NaOH 溶液) ,造成碱性的的反应环境 后,再加试剂 B(001g/ml 的 CuSO4 溶液) 。否则,紫色会被 Cu(OH)2 的蓝色遮蔽。

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