板蓝根化学成分研究.DOC

1、收稿日期 基金项目 国家自然科学基金 面 上 项目 (30873381) 第一 作者 孙琴 (1976-)，博士 、 副教授 、硕士生导师， 从事中药制剂 与中药学 等学科方向的教学、科研工作。 Tel： (0830)3162291， E-mail： sdy- 板蓝根化学成分研究 孙琴 1*， 赵剑 2， 张诗静 1，姜黎 1 （ 1.泸州医学院 药学院 ，四川 泸州 646000； 2.泸州医学院附属中医医院 ， 四川 泸州 646000） 摘要 目的 ：研究板蓝根的化学成分。 方法 ：运用多种层析分离手段，通过 1H， 13C-NMR等波谱技术及理化数据 鉴定化合物的结构。 结果 ： 从板

2、蓝根中 分离并鉴定了 6个化合物，分别为 （ 1） 正二十一烷酸 、（ 2） 谷甾醇 、 （ 3） 靛玉红 、 （ 4） 腺嘌呤核苷 、 （ 5） 大黄素 、（ 6） Fructopyrano-(14) -glucopyranose。 结论 ：化合物 1和 6为首次 从 板蓝根 中分离得到。 关键词 ： 板蓝根 ； 化学成分 Isolation and identification of chemical constituents from lsatidis Radix Sun Qin1 , Zhao jian2, Zhang Shi-jing1,Jiang Li1 （ 1. Pharmacy

3、 of Luzhou Medical College, Luzhou 646000,China; 2.Affiliated Hospital of Chinese Medicine, Luzhou Medical College, Luzhou, 646000,China） Abstract Objective: To study the chemical constituents from lsatidis Radix. Methods: The chemical constituents of the plant were isolated and purified by column c

4、hromatography and their structures were elucidated by spectroscopic analysis. Results: Six compounds were isolated and identified as n-heneicosanoic acid, -sitosterol, indirubin, adenosine, emodin, Fruct opyrano-(14) -glucopyranose. Conclusion: Compounds 1 and 6 are isolated for the first time from

5、the plants of lsatidis Radix. Key words: lsatidis Radix; chemical constituents 板蓝根 Isatidis Radix为临床常用中药，始载于神农本草经，味苦，性寒，有清热解毒、凉血利咽之功能，临床常用于治疗病毒性及细菌感染性疾病，其抗病毒的疗效确切。已有学者 1-4对板蓝根的醇提物和水提取物的化学成分进行了分离鉴定。然而，其抗菌抗病毒的作用物质基础还并不明确，为进一步研究其抗病毒的作用物质，本论文对板蓝根的化学成分进行了进一步的分离，为下 一步药效学的研究奠定基础。 1 仪器和材料 ZF-90型暗箱式紫外透射仪（上海顾

6、村电光仪器厂）， X-4型显微熔点测定仪（上海精密科学仪器有限公司）， Bruker Avance 400和 500型 核磁共振仪（德国 Bruker公司）， Autospec Premier质谱仪（美国 Waters公司） ， 薄层层析和柱层析硅胶 （青岛海洋化工厂）， Sephadex LH-20(Amersham Biosciences)，其余试剂均为化学纯或分析纯。 板蓝根（ Isatidis Radix） 购于 泸州百草堂中药饮片公司，经泸州医学院 生药教研室税丕先教授鉴定为十字花科植物菘蓝 Isatis indigotica Fort.的干燥根。 2 提取与分离 10 kg 板蓝根

7、干燥饮片，分别用 10 倍量、 8 倍量的 95乙醇提取 2.0、 1.5 h，合并 两 次提取液，过滤并浓缩至干，减压干燥至恒重 ， 得浸膏 140 克。拌样上 200-300 目硅胶吸附，用二氯甲烷：甲醇梯度洗脱（ 100:0-1:1）共 101 组分，每组分 1000ml，其中二氯甲烷：甲醇 24:1 部分得到化合物 1（ 20mg）；二氯甲烷：甲醇 20:1 和二氯甲烷：甲醇 10:1 部分得到化合物 2（ 50mg） 和 3（ 25mg） ；二氯甲烷：甲醇 7:1 部分再经过硅胶柱色谱、凝胶柱色谱得到化合物 4（ 16mg） ；二氯甲烷：甲醇3:1 部分得到化合物 5（ 10mg）；

8、 二氯甲烷：甲醇 1:1 部分经反复重结晶得到化合物 6 （ 300mg） 。其中化合物 1 和化合物 6 为首次从该植物中分离得到。 3 结构鉴定 化合物 1， 分子式 C21H42O2， 无色油状 ， Negative ESI-MS: m/z = 325M-H -; 从该化合物核磁数据可以看出为长链结构 ， 碳谱 173.3 信号显示有羧基信号 ， 故推测为脂肪酸类化合物 ， 根据分子量325 可得到分子式为 C21H42O2，1H-NMR (500 MHz, CD3OD) : 2.29 (1H, t, J = 7.6 Hz), 0.87 (3H, t, J = 7.6 Hz); 13C-

9、NMR (100 MHz, CD3OD) : 173.3 (s), 34.0 (t), 31.9 (t), 24.8 (t), 22.7 (t), 14.1 (q)， 以上数据与文献 5报道一致，故鉴定为正二十一烷酸 (n-heneicosanoic acid)。 化合物 2，分子式 C29H50O， 白色晶体， mp 138 140 。 1H-NMR (500 MHz, CDCl3) : 5.35 (1H, br t, J = 2.5 Hz), 3.53 (1H, m), 1.00 (3H, s), 0.91 (3H, d, J = 6.2 Hz), 0.68 (3H, s); 13C-NM

10、R (100 MHz, CDCl3) : 140.7 (s), 121.7 (d), 71.8 (d), 11.8 (q), 11.9 (q)， 以上数据与文献 6报道一致， 与 -谷甾醇对照品共薄层 Rf 值相同， 混熔点无下降， 故鉴定为 谷甾醇 (sitosterol)。 化合物 3， 分子式 C15H10N2O2， 红色针状结晶 ， 熔点 347 349 。 1H-NMR(400MHZ, DMSO-d6 ): 11.02(1H, s, NH), 10.90(1H, s, NH), 8.76(1H, d, J =8.0Hz, H-4), 7.64(1H, d, J =7.2 Hz, H-

11、4), 7.56(1H, t, J =7.2, 8.0 Hz, H-6), 7.40(1H, d, J =8.4 Hz, H-7 ), 7.25(1H, t, J =7.6, 7.0 Hz, H-6), 7.00(2H, t, J =7.2, 7.6Hz, H-5, 5), 6.89(1H, d, J =7.6 Hz, H-7); 13C-NMR(100MHz, DMSO-d6) : 137.3, 129.5, 124.9, 124.6, 121.5, 120.0, 113.7, 109.8，以上数据与文献 7报道一致， 与靛玉红对照品共薄层 Rf 值相同， 混熔点无下降， 故鉴定为靛玉红 (

12、indirubin)。 化合物 4， 分子式 C10H13N5O4， 无色粉末 ， 根据给出的核磁碳谱，显示有 10 个信号，氢谱中 8.18和 8.30 的 2 个氢可以看出该化合物含有杂原子，分子量为 268，应该含有偶数个杂原子， Positive ESI-MS: m/z = 269M+H+; 1H-NMR (500 MHz, CD3OD) : 8.18 (1H, s, H-2), 8.30 (1H, s, H-8), 6.01 (1H, d, J = 6.0, 10.5 Hz, H-1), 4.75 (1H, t, J = 6.0, 10.5 Hz, H-2), 4.38 (1H, d

13、d, J = 6.0, 10.5 Hz, H-3), 4.26 (1H, dd, J = 6.0, 10.5 Hz, H-4), 3.89 (1H, dd, J = 6.0, 10.5 Hz, H-5a), 3.80 (1H, dd, J = 6.0, 10.5 Hz, H-5b); 13C-NMR (100 MHz, CD3OD) : 153.5 (d, C-2), 149.4 (s, C-4), 119.8 (s, C-5), 156.7 (s, C-6), 141.6 (d, C-8), 89.6 (d, C-1), 74.8 (d, C-2), 71.8 (d, C-3), 87.1

14、(d, C-4), 62.6 (t, C-5)， 以上数据与文献8报道一致， 与 腺嘌呤核苷 对照品共薄层 Rf 值相同 ， 故鉴定为腺嘌呤核苷 (adenosine)。 化合物 5，分子式 C15H10O5， 砖红色粉末 ， 该化合物为红色粉末，且核磁碳谱给出 15个碳信号，其中有 2个共轭的羰基信号 189.6和 181.1，除去 21.6的甲基和 2个羰基剩余 12个碳信号均在烯区，故推断该化合物为蒽醌类， 1H-NMR(400 MHZ, DMSO-d6 ): 11. 98(1H， s, 8-OH), 11.90(1H, s, 1-OH), 11.35(1H, s, 6-OH), 7.3

15、4(1H, s, 5-H), 7.04(1H, s, 4-H), 6.50(1H, s, 2-H), 7.00(1H, s, 7-H), 2.34(3H, s, CH3); 13C-NMR(100 MHZ, DMSO-d6) : 189 .6(C-9), 181.1(C-10), 165.7(C-6), 164.5(C-8), 161.5(C-1), 148.2(C-3), 135.0(C-11), 132.6(C-14), 124.1(C-2), 120.5(C-4), 113.2(C-13), 108.9(C-5), 108.9(C-12), 107.9(C-7), 21.6(CH3)，

16、与文献 9数据分析比较，化合物结构为 1， 3， 8一三羟基 -6-甲基蒽醌 (1， 3，8-trihydroxy-6-methylanthraquinone)，即大黄素。 与 大黄素 对照品共薄层 Rf值相同 ， 故鉴定为大黄素 (emodin)。 化合物 6， C12H22O11，无色 粉末 ， 综合核磁碳谱共有 12 个碳信号，且化学位移在 60-105ppm 范围，可能为二糖类， Negative ESI-MS: m/z = 341M-H - ; 1H-NMR (500 MHz, D2O) : 5.45 (1H, d, J = 3.8 Hz, H-1), 3.40-4.30 (13H,

17、 m); 13C-NMR (100 MHz, D2O) : 92.5 (d, C-1), 74.3 (d, C-2), 72.9 (d, C-3), 81.7 (d, C-4), 76.8 (d, C-5), 60.4 (t, C-6), 104.0 (s, C-1), 72.7 (d, C-2), 71.4 (d, C-3), 69.5 (d, C-4), 62.7 (t, C-5), 61.7 (t, C-6)， 以上数据与文献 10报道一致，故鉴定为 Fructopyrano-(14) -glucopyranose。 参考文献： 1左丽 ， 李建北 ， 徐景 ， 等 .板蓝根的化学成分研

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