1、农残检测专题培训 目 录 n 农药及农药残留的知识 n 样品的前处理知识 n 仪器分析 GCMS的基础与操作 n 农残检测应注意的问题 农药及农药残留的知识 一、农药概述 二、农药残留的概念 三、农药残留的危害 四、农残分析的目的 五、有机氯农药的性质、危害、允许残留量、所用分析仪器 六、农残分析程序 一、农药概述 （一）农药的概念 农药农药 (pesticides)是指用于 防治 危害农作物 及农副产品病虫害、杂草及其他有害生物的 药物 总称。 现在农药不仅应用于农业，而且也广泛应 用于畜牧业、林业和公共卫生事业等方面。 1.按化学成分 可分为有机氯、有机磷、氨基甲酸 酯类、拟除虫菊酯类及砷
2、、汞、铜、硫磺等制剂 。 2.按用途 可分为杀虫剂、杀菌剂、除草剂、植物 生长调节剂和粮食熏蒸剂等。 （二）农药的分类 （三）农药的作用 n 农药在防治农作物病虫害和杂草、提高农业产量方面具有 显著的效果。 n 农药与人、动物的健康有着密切的关系。农药的使用 ，杀灭了一些病原及传播媒介，使某些疾病得到了控制，在 一定程度上提高了人类的健康水平。提高农畜产品的产量和 质量等方面，起着重要的作用。但是，大量广泛施用农药也 会造成对食物的污染。 n 农药还存在残毒和污染的严重问题，农药对食品，特别是动物性 食品的污染。长期食用被农药污染的食品，人类健康会受到严重的 危害。 食品中残留农药过高会导致
3、癌症和帕金森症。 n 每年，我国农药中毒人数超过 10万人，大部分是由于农药残留 而引起。死亡 20003000人。近 170种农药被列入致癌物。 注： 目前全世界实际生产和使用的农药品种为 500多种，其中大量 使用的有 100种，主要是化学合成的。 n 因此，我国相继制订了一系列措施，来控制农药对食品的污染 。 二、农药残留的概念 农药残留 (pesticide residues)是指农药施用后， 残 存 在生物体、农副产品和环境中的 微量农药原体 、有毒代谢产物、降解物和杂质 的总称。残留的 数量叫残留量。 产生农药残留的根本原因： n 部分种植者违反农药用规范，滥用高毒和剧毒农药或接近
4、收获期 使用农药。 农药残留毒性的类型： n 化学稳定性：难以生物降解、脂溶性强、生物体富集有机氯 农药，如六六六、 DDT n 三致性：致癌、致畸、致突变杀虫脒的代谢产物（ N-4-氯邻 甲苯胺）、代森类杀菌剂代谢产物（乙撑硫 脲）、敌枯双、三环 锡等 n 环境激素化合物：也称内分泌干扰化合物美国 EPA提出 60种环 境激素化合物，其中除草醚等农药 39种。 n 迟发性神经毒性：下肢麻痹、肌肉无力、食欲不振摄入溴苯 磷、 TOCP（三邻甲苯磷酸酯， 1930年美国引起姜酒事件） n 一般来说，农药对人体健康的影响分为急性中毒与慢 性中毒。 n 急性中毒往往容易造成死亡，成为最明显的农药危害
5、 。中毒的症状亦比较明显，具体表现为头痛、恶心、多 汗、呼吸困难、肌肉痉挛、神志不清，如不及时抢救便 会危及生命。 n 长期食用含有农药的食品能引致农药在体内不断累积 而引起慢性中毒，触发多种慢性疾病，包括癌症、生殖 和神经疾病，以及降低免疫力等。因为慢性中毒在人体 没有明显症状，往往不能引起人们的注意。 三、农残的危害 农药残留分析的目的 n 研究农药使用后在环境中的代谢和降解，制定农药 残留限量标准、农药安全使用标准； n 检测食品和饲料中农药残留的种类和水平，以确定 其质量和安全性，满足对食品质量和安全的管理需要； n 检测环境介质和生态系生物构成的农药残留种类和 水平，以了解环境质量和
6、评价生态系统的安全性，满足 环境监测与保护的管理需要。 农药残留分析是分析化学中最复杂的领域，原因是： n 残留水平低 , ng(10-9g)、 pg(10-12g)水平 ； n 使用农药历史的未知性和样品种类的多样性 ，造成分析过程的复杂性； n 农药品种的不断增多，对农药多残留分析提 出了更高的技术适应性要求。 有机氯农药及其对食品的危害 有机氯农药 (organochlorine pesticides)是具有杀虫活性的 氯 代烃 的总称， 常用的有机氯农药有 666、 DDT、氯丹、艾氏剂等 。有机氯农药一般不溶于水。易溶于有机溶剂，在生物体内的 蓄积具有高度选择性，多贮存于机体脂肪组织
7、或富含脂肪的部 位，性质非常稳定，在环境中残留期长，并不断迁移和循环， 从而遍及全球的每个角落。 目前，有机氯农药广泛地污染了世界环境。在我国， 造成农药污染的主要是有机氯农药。由于许多国家停止生产 和使用有机氯农药，食品中的有机氯残留量明显下降。我国 已于 1983年停止生产有机氯农药。 有机氯农药对人和动物来说，其急性毒性仍属于中等 毒性。食用有机氯农药污染的食品主要存在慢性中毒问题， 其慢性毒性作用主要表现在侵害肝、肾和神经系统，可引起 贫血、肝病、神经炎等病症。 食品中有机氯农药的允许残留量 n 以前国际上对 666和 DDT的使用情况未作统一的规定。 n 2001年 5月 22日在斯
8、德哥尔摩来自 100多个国家环境官 员参加的联合国环境会议上通过了 关于持久性有机污 染物的斯德哥尔摩公约 ，决定在全世界范围内禁用或 严格限用 12种有机污染物。这 12种有机污染物中的 9种为 有机氯农药，即艾氏剂、狄氏剂、异狄氏剂、氯丹、七 氯、灭蚁灵、毒杀芬、六氯苯、滴滴涕。 我国制定的各类食品中有机氯农药的允许残留量见表。 食品中有机氯农药的最大残留限量 /（ mg/kg） 食物 最大允 许 残留量 六六六 滴滴涕 原粮 0.05 0.05 蔬菜、水果 0.05 0.05 豆 类 、薯 类 0.05 0.05 水 产 品 0.1 0.5 蛋品 0.1 0.1 肉及肉制品 0.1 0.
9、2 脂肪含量 10%以下（以原 样计 ） 1 2 牛乳 0.02 1.0 乳制品脂肪含量 10%以下（以原 样计 ） 0.01 0.01 脂肪含量 10%以上（以脂肪 计 ） 0.5 0.5 茶叶 0.2 0.2 食品中有机氯农药的测定方法 n 食品中有害物质常用的检测方法 薄层色谱法 气相色谱法 高效液相色谱法 质谱法 色 质联用 酶联免疫吸附剂测定 早期，有机氯农药的定量测定，一般用分光光度法，但这种方 法操作繁琐，选择性差，灵敏度不高。 其后又发展了柱色谱，纸色谱和薄层色谱。而且薄层色谱 有比较快的发展。由于它简单易行，可作为易于普及的一种定 性和半定量测试手段。 气相色谱法给有机氯农药
10、残留量的检测提供了一个灵敏、 快速、准确的方法（灵敏度为 10-910-12g）现已广泛使用。 农药残留分析程序 样品采集 ：采样、样品运输和保存； 样品预处理：缩分、剔除或粉碎样品，成为检测样品； 样品制备：提取：从试样中分离残留农药的过程； 净化：提取物中的农药与干扰物质分离的过程； 分析测定：上机。 一、 取样方法 二、 样品的预处理 样品的样品的 采集与采集与 预处理预处理 一、取样方法：一、取样方法： a.取样原则 - 代表性 - 方法与目的保持一致 - 精度要求 - 防止化学变化或丢失 - 防止污染 b.商业取样分类 - 监测调查取样：随机、概率、分 布水平 - 执法取样：强制性、
11、超标与否 c.取样量要求 -小的或轻的产品 1.0 1.5Kg -中等大小产品 2.02 5Kg -大的产品 4.0 5.0Kg -肉、禽、鱼 1.0 1.5Kg -谷物和制品 0.5 1.0Kg d.采集要求 - 根茎类蔬菜 采集整个果实 - 豆类 整个果实 - 果类蔬菜 去除茎部 - 谷物 整个籽粒 - 肉类 整体 粉状物：粉碎、过 40目筛或匀浆，取 250-500g样品 谷物：研磨后按四分法进行 液体样品：充分混合，过滤除去漂浮物、沉淀物和泥土 样品提取样品提取 是指通过溶解、吸附（吸着）或挥发等方式将样品中的 残留农药分离出来的操作步骤，也叫 萃取 。 提取方案的选定主要考虑残留农药
12、的 理化特性 而决定。 其外还有试样类型、样品组分（脂肪、水含量）、农药在样 品中存在形式以及检测方法。 二、 样品预处理样品预处理 提取方法 n 匀浆法：称取 5 g样品于高速组织捣碎机中，加入 25 mL100%纯甲醇，充分匀浆捣碎 2 min，取上清液，待净化 n 机械振荡法：称取 5 g样品，加入 25 mL100%纯甲醇，于 电动振荡机上振荡 1 h，静置（或离心），取上清液，待净化 。 n 人工手摇法：称取 5 g样品，加入 25 mL100%纯甲醇，手 动摇晃 5 min，静置（或离心），取上清液，待净化。 制备过程中避免组分发生化学变化； 要防止和避免欲测定组分的沾污； 尽可能
13、减少无关化合物引入制备过程； 尽可能简单易行。 提取原理 利用残留农药与样品基质的 物理化学差异 ，使其从检测系统有干扰作用的样品基质中提 取分离出来（相似相溶）。 极性 -溶解度、分配系数； 挥发性 -蒸汽压。 提取原则 溶剂提取法 根据农药与样品组分在不同溶剂中的溶解性差异，选 用对残留农药溶解度大的溶剂，经过震荡、捣碎等方式将 分析物从样品基质中提取出来的方法。 按提取对象分 液 -液提取 液 -固提取 液 -气提取 液液 - 固提取固提取 指通过溶解、扩散作用使固相物质中的化合物 进入溶剂中的过程。 液液 - 液提取液提取 原理： 利用样品中不同组分分配在两种不混溶的溶 剂中 溶解度
14、或 分配比 的不同来达到分离、提取或纯 化的目的。 a.水样：液液提取 (生物液体，如尿液、奶液、血浆，加入乙醇或盐 ) b. 植物和动物样品：固液提取 +液液提取 c. 土壤样品：固液提取 +液液提取 d. 食品样品：固液提取 +液液提取 不同样品中残留农药的提取 净化 是指通过物理的或化学的方法除去提取物中对测 定有干扰作用的杂质的过程。 在净化过程中，加入 H2SO4的目的，是除去提取液中的杂质，如色素、 脂类、蜡质等。 脂类：蜡质、脂肪、油脂 色素：叶绿素、叶黄素、花青素 氨基酸衍生物：蛋白质、肽、生物碱、氨基酸 碳水化合物：糖、淀粉、醇 木质素：酚类及其衍生物 农药残留分析中常见的干
15、扰物质： 磺化法操作流程说明 n 加入 100ml2%硫酸钠水溶液 （作用是洗去极性大的杂质） /50ml正己烷 （提取） 二者无先后顺序。 n 加入浓硫酸 10ml（硫酸：正己烷 =1:10）轻摇，放置时间要长一些，视情况最好静置过夜（ 吸附效果好，因硫 n 酸是强氧化剂，它能使脂肪、蛋白质变性） 弃去硫酸层，漏斗下口用水洗一下，继续加入硫酸直至硫酸层为乳 n 白色，弃去硫酸层。 n 再次加入 100ml2%硫酸钠水溶液 ，（洗酸） 振荡 3min静置 10min，放下层。 n 过无水硫酸钠（ 650 灼烧 4h）柱 ,（ 脱水， ECD检测器怕水 ）最后用正己烷 10ml冲洗与鸡心瓶中。
16、n 加 PT溶液（浓度为： 1%PEG+2%TEG，介质 50%丙酮 /己烷） 40ul。（掩盖柱子的活性点） n 减压浓缩 44 旋转蒸发至干。 n 配线性： 50ppb、 250ppb、 500ppb。 n 进气相用 ECD分析，若有检出进 GC-MS。 n 附磺化法的操作流程。 样品的提取流程样品的提取流程 称量（ 1） 液固提取（ 2） 减压过滤（ 3） 浓缩（ 6）液液提取（ 4） 净化（ 5） 气相色谱 质谱联用 n 第一节 气相色谱 /质谱基础 n 第二节 开关机介绍 n 第三节 GCMSD调谐 n 第四节 样品采集技术 n 第五节 定性与定量技术 n 第六节 仪器维护及日常保养
17、 第一章 气相色谱 /质谱基础 气相色谱 原理 气相色谱的流动相为惰性气体，气 -固色谱法中以表面积大且 具有一定活性的吸附剂作为固定相。当多组分的混合样品进入色谱柱 后，由于吸附剂对每个组分的吸附力不同，经过一定时间后，各组分 在色谱柱中的运行速度也就不同。吸附力弱的组分容易被解吸下来， 最先离开色谱柱进入检测器，而吸附力最强的组分最不容易被解吸下 来，因此最后离开色谱柱。如此，各组分得以在色谱柱中彼此分离， 顺序进入检测器中被检测、记录下来。 气相色谱法的特点 （ 1）分离效能高 （ 2）检测灵敏度高 （ 3）分析速度快 （ 4）应用范围广 （ 5）样品用量少 因此，气相色谱法已成为石油、
18、化学、化工、生化、 医药、食品、农业、环境保护等生产及科研部门中不可缺少 的分析手段 。 质谱原理 质谱分析法是通过对被测样品离子的质荷比的测定来进行分析 的一种分析方法。被分析的样品首先要 离子化 ，然后利用 不同离子 在 电场或磁场的运动行为的不同，把离子按 质荷比（ m/z） 分开而得到 质谱，通过样品的质谱和相关信息，可以得到样品的定性定量结果。 气质联用（ GC/MS） 气质联用的有效结合既充分利用色谱的分离能力，又发挥了质 谱的定性专长，优势互补，结合谱库检索，可以得到较满意的分离机 鉴定结果。 INTERFACE GC MSD 10-5 Torr M/Z 69丰度的 40%;M/
19、Z 502的丰度 M/Z 69丰度的 2%； n 对于标准谱图调谐，要求 M/Z 69丰度的 40%M/Z 219的丰度 M/Z 69丰度的 80%; M/Z 69丰度的 2%M/Z 502的丰度 M/Z 69丰度的 5%； 重要的是对调谐做出正确评价： 质量数的峰宽 平滑对称的峰 合适的电子倍增器电压 适当的丰度值 低水峰及空气峰 正确的质量分配 合适的相对丰度 合适的同位素比例 标准谱图调谐报告 有权使用 MS参数 易于建立用户调谐文件 诊断 手动调谐 通过手动调谐检漏 手动调谐允许交互设置自己的调谐参数。它使您非常灵活地改变自动调谐中的参数 。 当在 MSD 中执行诊断时，手动调谐非常重
20、要。手动调谐对于检漏也非常有用处手 动调谐允许交互设置自己的调谐参数。它使您非常灵活地改变自动调谐中的参数。 影响质量轴 影响峰宽 (分辨与灵敏度 ) 影响灵敏度 (传输效率 ) 要进行手动调谐 ,进入 参数 /手动调谐 。通过执行 轮廓图 或 扫描 观察调节结果。继续调整参数直至得到满意的结果。产生一份报告并 创建一个调谐文件存贮这些参数。 记住质量峰宽通过调节 AMU 增益和补偿 来调整。还要记住 AMU 增益 对高质量数更有效，而 AMU 补偿 对整个质量范围都同样有效。 这最好通过 轮廓图 来实现 。 记住质量轴校正是通过 质量增益 和 质量补偿 来完成。同样要记住 质量增益 对高质量
21、数更有效，而 质量 补偿 对整个质量范围同样有效。 这最好通过 P轮廓图来完成。 记住 EM 电压 用来调节整个质量范围的丰度 .。 推斥极、离子聚焦 及 入射透镜补偿 是用来调整一个质量对另一个质量的相对丰度。这最好通过 扫描 来完成。 通过手动调谐检漏 发现漏气时先检查气相色谱进样口的状态。进样口在分流状态时质谱仪仍然表现为漏气时再用以下方法捡漏。 在前一幻灯片所示的窗口点击 参数 /编辑调谐并显示参数 即出现当前窗口 .将其中至少一个质量数改写为捡漏物质 (如 丙酮 )的特征离子 (M/Z58)，点击 OK。回到手动调谐窗口，点击 轮廓图 。用棉签蘸捡漏物质（丙酮）接近怀疑漏气的 位置。
22、如果某处漏气，捡漏物的特征离子峰（ 58）强度立即明显增大。注意棉签接近而不是接触漏气部位，避免过 多溶剂进入分析管道。 编辑调谐和显示参数菜单 质量数 1,2,3：分别显示轮廓图中所要观察的质量数。 窗口：为每个质量数窗口宽度。 采样 2N： 采样点数。以 2的 N次方计。例如 N选择 5，则在每个质量数采集 32次。 平均值：对每个轮廓质量平均的次数。次数越多，调谐时扫描速度越慢。 步长： 质量数变化的步长。它越大，扫描速度越快，但牺牲了分辨率。 阈值： 0 500 该值越大，被遴选下去的峰越多，显示的峰越少。 第四章 样品采集技术 数据采集方法编辑 : n 开始编辑完整方法 从 “Met
23、hod/方法 ”菜单中选 择 “Edit Entire Method/编辑完整方法 ” 项，如下 图所示，选中除 “Data Analysis/数据分析 ”外的 三项，点击 “OK/确定 ”，进入下一画面。 编辑气相参数 n 柱箱 n 检测器 n 进样口 编辑扫描方式质谱参数 n 编辑溶剂延迟时间以保护灯丝，调整倍增器电压模式（共有三种模式：绝对值，相对值和增 益因子），选择要是用的数据采集模式，如扫描（ Scan）、选择离子（ Sim）等。 更改 EM电压 溶剂延迟 采集方式 编辑采集参数 离子源与四极杆温度 编辑时间事件 表 MS采集参数（ SCAN） n MS SIM / Scan 参数
24、对话框允许您设置质谱采集数据是用全扫描 (Scan) 或选择离子检测 (SIM) 方式。 n 全扫描方式监测在选择的整个质量范围内每 0.1 amu 质量单位的丰度。在 正常的全扫描方式中，从数据平均产生的峰记入硬盘中。 n EM（电子倍增器）电压决定加在电子倍增器上的电压和质谱的响应。电压 值越高，响应（信号和噪音）越大。 EM 的电压可以设置为相对于当前调谐文 件中给出的相对值 (Rel)，也可以是绝对值 (Abs)。当设置为 Rel 时，调谐 文件中的倍增器电压就按在这里输入的值调整，当输入是 Abs 时，这个值即 为使用的实际值。 n 溶剂延迟指从分析开始到打开质谱的时间（分钟）。直到
25、溶剂峰从柱子中 出来并通过质谱 MS 后才能打开质谱。 SIM是什么 ? 只监视所选择信息的质荷比 它如何做 ? 控制质量分析器，仅仅对感兴趣的质量进行分析 为什么做 ? 提高灵敏度 改善峰形 改善精确度 应用 痕量分析 复杂基质 常规定量 选择离子检测 SIM 数据采集 Dwell time SIMmass 1 SIM mass 2 SIM 循环时间 四极杆 电压 (amu) TIME SIM mass 3 空中时间 扫描数据采集 扫描时间 扫描循环时间 空中时间 四极杆 电压 (amu) TIME SIM 与 SCAN比较 选择 : 离子 /组数目 每个离子驻留时间 以便获得良好的数据采集
26、所 需的循环 /峰数目 目标 : 每个峰通过 15-25 次循环 每个离子驻留时间相同 运用时间规划 (SIM Groups) 使 采集 /循环离子数目最 少 设置 SIM 采集 SIM/Scan同步采集 n 一次进样，同时采集 SIM和 Scan的数据 : n SIM 数据用于目标化合物的定量 n Scan 数据用于未知化合物的谱库检索 n SIM and Scan 的数据保存在相同的数据 文件夹中（ data.ms和 datasim.ms) n 可以使用 AutoSIM 的指令自动将全扫描的方 法转换为 SIM的方法 n SIM 组和离子会被自动选择 n 不需要手动建立 第 七 章 定性
27、与定量 分析 农药的分析概述 n 农药分析的三个过程 n 定性 n 定量 n 确认 常用农药分析方法 n 常用农药分析方法气相色谱法 - FID, ECD, FPD and NPD n 液相色谱法 - UV and FLD n 气质联用技术 是目前最有效的方法 , 而且灵敏度很高。色质 联用是最有效的农药确认方法 校正（定量） 校正即是利用某个峰的峰高或峰面积来确定其对应组分的浓度或含量 当检测器灵敏度针对不同的组分而变化；及检测器对同一组分不同含量响应值发生 变化时须做校正 校正方法 *面积百分比法 AREA% *峰高百分比法 HEIGHT% 归一化法 NORM% 外标法 ESTD 内标法
28、ISTD *不是校正方法 面积百分比法 AREA% AREA(pk) AREA%= x100% AREA(pk) 假定 检测器响应都相同 所有组分都流出 所有组分都被检测到 优点 缺点 无需做校正 以上所有的假定 简单、快速的定量过程 需测量所有的组分 进样量不要求严格 所有的面积都必须准确 色谱条件 n 色谱柱：毛细柱， HP-5（ DB-5或相当极性柱 30m0.32mm0.25m。 n 柱温： 程序升温 n 速率 / /min 温度 保持时间 /min 运行时间 /min n 初始 - 60.0 2 2 n 1 15 180.0 0 10 n 2 5 260.0 0 26 n 3 20
29、280.0 0 27 n 进样口温度： 260.0 n 载气： 氦气 99.995%， 1mL/min. n 进样量： 1L n 检测器温度： 300.0 定性确认 在保留时间窗口内出现与对应目标化合物一致的峰，视为疑似检出。 测定 结果计算 n 以外标法定量，按下式计算： n n AiCV n X = n Asm n 式中： n X - 试样中目标化合物含量， mg/kg； n Ai -样液中目标化合物峰面积； n As-标准溶液中目标化合物峰面积； n C-标准工作液中目标化合物的浓度， g/mL； n V-最终样液体积， mL； n m-最终样液所代表的试样量， g。 数据采集 l 采集
30、方法 l 调谐文件 l GC 参数 l MS 参数 l 注射器参数 方法流程 定性分析 l 选择检索 l 检索策略 l 报告选项 l 对自动产生的报告中检 索的结果进行检查 定量分析 l 积分选择 l 积分参数文件 l 定量资料库 l 报告规格 l 检查自动产生的定量报告 用户报告和资料库 l 设计用户报告和 /或资料 库 l 检查所产生或更新的报告 第 六 章 维护与保养 日常维护 - GC 色谱柱在不使用时要安全保存起来。 安全保存中有两大要点： 1. 保存柱子切勿划伤。划伤后的柱子可能由于高温加热而足以使之从 划痕处断裂。 2. 堵上柱子两端以保护柱子中的固定液不被氧气和其它污染物所污染
31、 。 当使用熔凝硅柱时，记住这是一种玻璃材质，一定注意保护眼睛。 色谱柱保存 MSD维护 清洗离子源程序 所有真空室内的操作须戴不掉毛的手套 (要非常干净） 从工作站 中 tune and vacuum/vacuum/power-on temps将离子源和四极杆温度设 为 0 ,拆卸离子源 用专用绿色砂纸或三氧化二铝粉（ 用 无水乙醇混成糊状）打磨除灯丝及螺丝外的 金属零件表面，特别注意离子轨道内各部分。 用水仔细冲洗 HPLC级甲醇清洗，再用二氯甲烷清洗，最后用丙酮或正己烷清洗 将所有离子源部件（包括未打磨的部件）放入洁净烧杯，分析纯无水乙醇超声波 清洗 4次，每次 10分钟。注意：如果使用
32、强溶解性溶剂如丙酮等，不要清洗透镜绝缘 体和加热块导线。 放于洁净烧杯，置于 GC柱温箱内，将炉温设为 20C （使 风扇不停转动 ） 约 60分 钟 组装 ， 确认 无 短路 ，放回。插好各 部件电线 抽真空（确认泵工作正常，此时离子源与四极杆不加热）。 1小时后将温度升至 正常状态 至少 2小时后调谐 农残检测应注意的问题 样品制备 （ 1）样本应在冷冻状态下运送和保存，并避免在运 送期间解冻，样品储存一般需在 20 ，样品提取浓 缩液储存应在 0 5 。通常动植物样品需搅拌或匀浆 （籽粒需磨碎过 40目筛），土壤样本需去石块等杂物 ，阴干后充分混匀，过 40目筛。 n 样品检测前需混匀，
33、可用粉碎机搅拌混匀，颗粒尽 量小。 n 粉碎前应保持半冷冻状态，以免待测成份随水分流 失。 （ 2）提取： 用溶剂将待测样品中农药溶解、分离出来的操作步骤。根 据样本和待测农药种类，用不同溶剂和方法进行提取。 n 原理：相似相溶。选择与待测农药极性相似的溶剂，提取 剂沸点应 45 80 ，且不能与样本发生作用，毒性低，价格 便宜，必须能溶解待测农药。采用 ECD时，不能选带卤素的 溶剂。对含水量高的样本，一般选与水相混溶的溶剂（乙腈 、丙酮等），要求溶剂对样本有较强的渗透能力，以便能将 样本中农药充分提取。当单一溶剂效果不理想，可选择 2种 或 2种以上不同极性的溶剂，以不同比例配成混合提取剂
34、， 溶剂的级性由强到弱顺序：水 乙腈 甲醇 乙酸 乙醇 异丙醇 丙酮 正丁醇 正戊醇 乙酸乙酯 二氯甲烷 三 氯甲烷 苯 甲苯 二甲苯 四氯化碳 二硫化碳 环己烷 正己烷（石油醚）。 n 振荡法：在盛有样本的容器中加提取剂 ，振荡一定时间。 n 均质法：用均质机对加提取剂的样本快 速均质。快速、简便。 n 超声法：样本加入提取剂，以超声波提 取。 n 索氏提取：提取效果好，但时间长，干 扰物多。多用于动物样本。 n 快速混匀法：适用于液体样品。 提取方法： n 一般经三次提取，第一次约提取 70-90%，第二 次和第三次提取残渣中的剩余部分。无水硫酸钠和 氯化钠的盐析作用能提高待测组分的回收率
35、。干性 样品（含水量 10%）应加入适量水分再提取，采 用乙酸乙酯提取含水量高的样本中农药时需加一定 量的无水硫酸钠，提取浓缩菜汁或含糖量高的样本 中农药时需加适量水，提取干燥土壤中农药时也需 加适量水都能提高提取效果。 （ 3）净化：将样本中待测农药与干扰杂质分离的步骤。 原则是尽量完全除掉干扰杂质，而又使待测农药损失尽 量少。 n 液 液分配：乙腈 正己烷，丙酮 正己烷，丙酮 石油醚。 n 吸附柱层析：弗罗里硅土、三氧化二铝、硅胶、活 性炭、硅藻土等。存于干燥器中。 n 固相萃取：四步：固定相活化、样品上柱、洗涤和 洗脱。 （ 4）浓缩： n 氮吹仪 n 旋转蒸发仪：水浴温度，蒸发速度， 不能蒸干。 （ 5）定容：一定要准确。 方法评价指标：灵敏度（以方法最低检出浓度表示 ），准确度（添加回收率表示），精密度（标准偏差）。
