1、1如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 第一节 概述 一、食品中常见的肠道致病菌 沙门氏菌 志贺氏菌 大肠艾希氏菌 变形杆菌 耶尔森菌 2如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 二、生物学特性 1、形态与染色 均为革兰氏阴性杆菌,中等大小,无芽胞,多数具有周身鞭毛 能运动,志贺氏菌属无鞭毛无动力。 2、培养和生化反应 ( 1)、需氧或兼性厌氧,菌落中等大小,表面光滑,液体培 养基混浊生长。 ( 2)、肠道致病菌一般不分
2、解乳糖,而非致病菌多能分解乳 糖、葡萄糖产酸或产酸产气。 ( 3)、可还原硝酸盐为亚硝酸盐。 3如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 三、抗原类型 O抗原 也称菌体抗原, 细 胞壁脂肪糖,耐 热 100 不 被破坏 H抗原 也称鞭毛抗原,鞭毛蛋白,不耐 热 , 60 30 可破坏 K抗原 也称表面抗原( 荚 膜抗原),多糖,具有阻抑 O抗原 发 生凝集的 现 象,加 热 60 30 可消除 抑阻作用 菌毛抗原 4如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变
3、 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 四、 致病性 (一)、致病物质 1、内毒素:能引起机体发热,白细胞减少,低血糖, 血压降低,严重者休克。 2、外毒素 :对小肠粘膜细胞具有物殊毒害作用,引起 腹泻。 5如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 (二)、所致病疾 1、伤寒和副伤寒 2、食物中毒 3、细菌性痢疾 6如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 五、微生物检验的基本程序 检样 处理 增菌培养 分离培养 生化试验 血清学
4、鉴定 报告 7如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 思考题 1、肠道致病菌具有哪些生物学特性 ? 2、肠道致病菌具有哪些抗原?又称为什么?有 什么特点? 3、写出肠道致病菌检验的基本程序 8如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 第二节、沙门氏菌检验 一、概况 (一)沙门氏菌的发现与食物中毒 (二)沙门氏菌的命名 根据所致疾病命名 根据菌的发现地区命名 以发现者的名字命名 (三)沙门氏菌的抵抗力 60 30 可杀死 9
5、如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 (四)沙门氏菌的分类地位及定义 1、地位:是肠杆菌科、埃希氏菌族、沙门氏 菌属中的细菌 2、定义 是肠杆菌科中形态和培养特征,生化反应及 抗原结构相似,被 O1噬菌体裂解的一群革兰 氏阴性杆菌。 10如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 二、生物学特性 (一)、形态与染色: 革兰氏染色阴性,无荚膜,无芽胞,多数 有鞭毛,有动力,短小杆菌。 (二)、培养特性 1、需氧或兼性厌氧,最
6、适温度 37 , PH7.27.4。 11如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 (沙门氏菌(红色)侵入人体细胞 12如果你喜欢它,那么享受它。不喜欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 2、对营养要求不高,在普通培养基生长良好 , 37 , 24h,能形成菌落中等大小,直径 2 3mm,圆形或卵形,表面光滑湿润,无色半 透明,边缘整齐的菌落 3、在液体培养基中,呈均匀混浊性生长,无 菌膜。 13如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,
7、那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 (三)、生化特性 1、发酵 GLU,甘露醇,山梨醇产酸产气(伤寒鸡伤 寒沙门氏菌少数不产气) 2、不发酵乳糖,蔗糖,侧金黄花醇 3、多数产生 H2S( +),不产靛基质( -),不分解尿 素( -),不产生乙酰甲基甲醇( VP )( -), 4、能还原硝酸盐为亚硝酸盐( +) 5、在 KCN培养基中生长( -),苯丙氨酸脱氨酸( -) 14如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 (四)、抗原结构 主要两种: A、 O抗原 B、 H抗原
8、C、表面抗原( K抗原) D、菌毛抗原 15如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 2 、 O抗原 ( 1) O抗原的表示方法 共有 58种,用字母 O和阿拉伯数字标记: O1 、 O2 、 O3、 O4 如: 伤寒杆菌: O9 、 O12 16如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 ( 2)沙门氏菌的分群及表示方法 用大写字母及相关符号表示: A、 B、 C、 D、 E、 F Z 、 O51 O63、 O65 O67
9、17如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 ( 3)沙门氏菌中的主要菌群及其群特异性抗原 A群 -O2 B群 -O4 C群 -O6 C1群 -O7、 C2群 - O6 O8 、 C3群 -O8 、 C4群 -O6 O7 O14 D群 -O9 F群 -O11 E群 -O3 E2群 -O3、 O10族 E3群 -O3、 O15 E4群 -O1 、 O3 、 O19 18如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 3、 H抗原(鞭
10、毛抗原) 耐热性差: 60 15 或酒精处理可破坏 沙门氏 H抗原有两种: 第 1相:特异相,用英文小写字母表示 a、 b、 cz z1z55 第 2相 :非特异相,用阿拉伯数字表示 1、 2、 3 其 中也有用小写字母 a、 n、 x等表示。 19如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 4、表面抗原: 沙门氏菌有三种: Vi、 M、 5抗原、 K抗原 Vi抗原位于菌体的最表层,包围了 O抗原,可阻碍 O抗原的血清 学凝集试验。破坏 Vi抗原: 60 30 , 100 5 含有 Vi 抗原的 沙 门 氏 菌
11、: 伤 寒沙 门 氏菌、丙型副 伤 寒沙 门 氏菌、都柏林沙 门 氏菌 20如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 三、沙门氏菌食物中毒 ( 一)、引起食物中毒最常见的沙门氏菌: 鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌 (二)、易引起沙门氏菌中毒的食品 肉、蛋、乳类食品 行业关注:美国两种花生酱含沙门氏菌 21如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 (三 )、中毒原因 1、食用病畜禽的肉制品食品 2、病畜禽、带菌人
12、和动物使食品受污染 3、用不洁净水外理食品 22如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 (四)、临床病状(所致病菌) 1、肠热病:伤寒与副伤寒病,为慢性发热的菌血病。 由伤寒与副伤寒菌引起,潜伏期 720天 2、急性肠胃类:主要症状:头痛、发热、恶心、呕吐、 腹泻、出冷汗、及全身不适,病程 23天 3、败血病 :高烧、寒战、厌食、局部发炎、由猪霍乱沙 门氏菌等引起 23如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 四、微生物检
13、验 (一)、基本步骤(程序) 检样 增菌(前增菌) 分离培养 生化 试验初步鉴定 血清学反应最后鉴定 报告 24如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 1、前增菌:用无选择性的培养基使处于濒死状态的 M 恢复活力 ; 2、选择性增菌:使沙门氏菌优势繁殖,基它细菌变到 抑制 ; 3、选择性平板分离培养:分离出所需的细菌 ; 4、生化试验:鉴定分离出来的细菌是否符合所检项目 的细菌 ; 5、血清学鉴定:进一步鉴定。 25如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改
14、变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 (二)、检验操作关键点 1、增菌:使待检菌复壮,抑制杂菌生长,提高检出率。 前增菌:用于加工过的食品, 37 , 48h 或 1824h,长有杂菌 。 增菌培养基:增菌液一般用 MM和 SC两种,如可能是伤寒沙门 氏菌用 TTB,用 42 培养。 26如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 2、平板分离 选择性培养基: BS、 DHL、 HE、 WS 、 SS BS中最好, DHL、 HE、 WS 很好, SS最差 一般要用: BS和 WS/SS 两个平板, BS主要用
15、于伤寒沙门氏菌的分离 27如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 BS上的菌落DHL上的菌落 SS上的菌落 28如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 3、五项生化试验 H2S、靛基质 、 PH7.2尿素酶、 KCN 、 赖氨酸脱羧酶 29如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 ( 1)三糖铁培养的培养 典型沙门氏菌在三糖铁培养上的特
16、征: 表面( -)粉红色、底层( +)黄色、 H2S ( +)底层有黑色、有动 力。 在 TSI培养基中 :表面( +)黄色、 H2S ( -)的培养物可 排除 ,其 它培养物均有可能是沙门氏菌。 30如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 ( 2)其余四项生化实验 靛基质 PH7.2尿素酶 KCN 赖氨酸脱羧酶 反应序号: A1、 A2多见, B1少见 31如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 ( 3)、典型沙门氏菌
17、的五项生化反应及其检验的利用 A、典型五项生化反应: A1 H2S( +) 靛基质( -) PH7.2尿素酶( -) KCN( -) 赖氨酸脱羧 E( +) 32如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 B、利用五项生化反应鉴定沙门氏菌的最简单方案 a、对于 H2S阳性菌,利用五项生化反应试验可判别沙 门氏菌和柠檬酸杆菌。 b、对于 H2S阴性菌,查到 B1时即: H2S( -) 靛基质( -) PH7.2尿素酶( -) KCN( -) 赖氨酸脱羧 E( +),补做 ONPE试验,可判定沙门 氏菌属和埃希氏菌
18、属( ONPE( -)为沙门氏菌, ONPE( +)大肠艾希氏菌 33如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 5、血清学试验(最后鉴定) ( 1)、沙门氏菌诊断血清的种类: 10种组合血清:主要用于伤寒和副伤寒沙门氏菌鉴 定 26种组合血清:常见致病菌的定群与分型 57种组合血清:常见定型,初步鉴定 AF 群以外 的菌型 144种组合血清 :全套装 34如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 ( 2) 、血清学检验步骤
19、抗原准备 AF 多价血清检验(判定是否是 沙门氏菌) 群特异性抗体血清(如 O2、 O4、 O3、 O7、 O8、 O9、 O10、 O11(判定 O群别) O单因子血清检查 H因子血清检查(分型 ) 报告 35如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 五、检验结果的报告 1、凡血清学鉴定与生化反应均符合者,报告 发现沙门氏菌。 经检验, 食品发现有沙门氏菌 2、凡血清学鉴定与生化反应均不符合者, 报告未发现沙门氏菌。 36如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受
20、它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 思考题: 1、典型沙门氏菌的五项生化试验结果如何? 2、沙门氏菌的形态特征,培养特性是什么? 3、沙门氏菌检验时为什么要进行前增菌和增菌 ? 4、沙门氏菌有哪些抗原?各有何特点? O、 H抗 原如何表示, AF 群沙门氏菌中,代表每群 O 特异性抗原的独特因子是什么? 37如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 5、沙门氏菌哪几个菌型具有 Vi抗原, Vi抗原对 O抗 原血清涟试验有何影响,对含 Vi抗原菌,如何做 O 抗原血清学试验。 6、沙门氏菌在 SS平板,
21、TSI培养基上生长的现象如何 ,说明其原理。 7、分离纯化后怎样选用最少的生化试验方法初步鉴 定检验菌是否是沙门氏菌属的细菌。 8、如何进行沙门氏菌的血清学试验。 38如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 第三节、志贺氏菌的检验 一、生物学特性 (一)、形态与染色 革兰氏阴性短杆菌、无荚膜,无芽胞,无鞭毛 23um*0.50.7um 39如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 (二)、培养特性 1、需氧或兼氧性厌氧,最
22、适温度 37 , PH7.27.4 2、在普通琼脂和 SS平板上,能形成圆形、微凸、 光滑湿润、无色半透明、边缘整齐、在中等大小 的菌落 3、宋氏志贺氏菌菌落较大,较不透明,粗糙而扁 平,在 SS平板上可迟发酵乳糖,菌落呈玫瑰红色 。 4、在肉汤中呈均匀混浊生长,无菌膜。 40如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 (三)、生化反应 1、发酵葡萄糖,产酸不产气,除宋氏志贺 氏菌外,均不发酵乳糖。 2、不发酵侧金盏花醇、肌醇、水杨苷。 3、不产生 H2S,不分解尿素, V-P试验阴性 ,不能利用柠檬酸盐。 4
23、、甲基红阳性。 41如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 (四)、抗原结构 1、抗原构成: O抗原: 群特异性抗原: A、 B、 C、 D K抗原:除 B群外,一般有 K抗原 42如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 2、志贺氏菌的分群与血清型 志贺氏菌分为四群: A群(痢疾志贺氏菌): 110型 B群(福氏志贺氏菌): 16型 +X、 Y两个变种, C群(鲍氏志贺氏菌 ): 115型 D群(宋内氏志贺氏菌) : 1
24、个型 43如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 志贺氏菌属抗原的分类 菌 名 血 清 分 类 生 化 特 性 群 型 亚 型 甘露醇 鸟 氨酸 脱 羧 酶 志 贺 氏菌 A 1 10 - 福 氏 菌 B 1 6 x、 y变 种 1a、 1b、 2a 、 2b、 3a、 3b 3c、 4a、 4b + - 鲍 氏 菌 C 1 15 + - 宋内氏菌 D 1 + 44如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 葡萄糖 + 乳糖
25、 - 甘露醇 - 痢疾志贺 氏菌 1、 3 、 4、 5、 6、 9、 10 型 痢疾志 贺氏菌 2、 7、 8型 福氏 6型, 鲍氏 1、 2 、 3、 4、 5 、 6、 8、 10、 12、 14型 福氏痢疾菌( 1、 2、 3、 4、 5型)鲍氏 5、 7、 9、 11、 13 、 15型 靛基质 - 乳糖 + 宋氏志 贺氏菌 靛基质 - 靛基质 + 靛基质 - 靛基质 + 甘露醇 + 45如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 3、属内外抗原关系 ( 1)群内抗原关系: A群: 2与 10型,具有
26、密切关系 C群: 1与 4和 11型, 10与 11相关 B群:群抗原是 B群各型之间的共同抗原 ( 2)群间抗原关系: C群 17型与 A群 3型相关 C群 18型与 A群 11型相关 46如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 ( 3)属外抗原关系: 志贺氏菌与艾希氏菌属的 O抗原关系 非常密切,除 A群 9型和 D群宋氏菌与埃氏 希菌的 O抗原关系未见报道外,每一个型 都与一定的艾希氏菌的 O抗原有关 。 47如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改
27、变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 4、 K抗原对 O抗原血清学试验的影响 可 阻碍 O抗原 的血清学凝集试验,煮沸 处理即可。 48如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 (五)志贺氏菌的抵抗力 志贺氏菌属在外界环境中的生存力,以宋内氏最强,福氏菌次之,志 贺氏菌最弱。 一般在潮湿土壤中能存活 34天, 37 水中存活 20天,在粪便内( 室温)存活 11天。日光直接照射 30分钟, 56-60 10分即被杀死,对高 温和化学消毒剂很敏感, 1%石炭酸中 15-30分钟即被杀死,对氯霉素 、磺胺类、链霉素
28、敏感,但易产生耐药性。 49如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 二、志贺氏菌的致病性与食物中毒 (一)流行病学 50如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 传染源 食物、病人、粪便、苍蝇等 51如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 (二)志贺氏菌的致病性 致病因素 : 侵袭力、菌体内毒素、外毒素 52如果你喜欢它,那么享受它。不
29、喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 (二)临床症状 A、急性细菌性痢疾: 急性典型、急性非典型、急性中毒性菌痢。 B、慢性细菌性痢疾: 慢性迁延型、慢性隐伏型、慢性急性发作型 。 53如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 三、微生物检验 (一)检验步骤(程序) 检样 样品 处理 增菌培养 SS、 EMB平板分离培养 初步生化鉴定 最 后血清学鉴定 报告 54如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受
30、它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 (二)检验操作要点 志贺氏菌在常温中生存的时间较短,应尽快进 行试验。 如 24h内不能检验,样品应在冰箱内 长时间不能检验,放在低温冰箱内。 55如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 1、增菌培养 培养基: GN增菌液 在 361 68h ,当培养液出 现轻微混浊即中止培养。 56如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 2、分离培养 强选择性平板: SS或 HE、 WS 弱选
31、择性平板: EMB或麦康数 在工作中 361 培养 1824h , 菌落特征: 无色透明,中等大小,光滑圆形菌落。 57如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 HE平板原理及反应 发酵乳糖的某种肠杆菌 不发酵乳糖的某种肠道菌,而且产生 硫化氢,可能是沙门氏菌 不发酵乳糖的肠道菌,可能就是志 贺氏菌 58如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 SS平板原理及反应 SS Agar (Salmonella Shigella A
32、gar) 大肠杆菌或者别的发酵乳糖的肠杆菌 是沙门氏菌。有黑色中心。 如果没有黑色中心,就很可能 是志贺氏菌了 59如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 麦康凯琼脂平板 60如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 EMB平板照片及原理 61如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 3、初步生化鉴定 从平板上挑取 34 个可疑菌落,接种
33、于 TSI 和葡萄糖半固体培养基各一管, 36 , 18 24h , 62如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 三糖铁( TSI)琼脂试验的原理 2志贺氏菌 3沙门氏菌 4大肠杆菌 葡萄糖半固体原理及结果 。 Organism Test Result 1. Pseudomonas aeruginosa(铜绿假 单胞菌): Motile 2. Staphylococcus aureus: Non-motile 3. Bacillus subtilis: Motile 63如果你喜欢它,那么享受它。不喜欢,那
34、么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 志贺氏菌在 TSI生长的结果(现象): ( 1)斜面产碱仍为红色或粉红色; ( 2)底层产酸不产气,变黄色; ( 3)不产 H2S,不出现黑色。 志贺氏菌在 半固体培养基生长:沿线生长,无 动力。 64如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 在志贺氏菌检验中可弃去的培养物: ( 1)在 TSI表面上呈现蔓延生长的培养物 ( 2)在 1824h发酵乳糖、蔗糖的培养物 ( 3)不分解葡萄糖,只在半固体培养基表面生长 的培养
35、物。 ( 4)产气的培养物 ( 5)有动力的培养物 ( 6)产 H2S的培养物 65如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 4、血清学试验和生化鉴定试验 ( 1)血清学分型: 凡凝为志贺氏菌, 挑取三糖铁琼脂上的培养物,做玻片凝集试 验。 先用 4种志贺氏菌多价血清检查,如果由于 K抗原的存在而不出 现凝集,应将菌液煮沸后再检查 ; 如果呈现凝集,则用 A1、 A2、 B群多价和 D群血清分别试验。 如系 B群福氏志贺氏菌,则用群和型因子血清分别检查。 福氏志贺氏菌各型和亚型的型和群抗原见表 1。可先用群因
36、 子血清检查,再根据群因子血清出现凝集的结果,依次选用 型因子血清检查。 4种志贺氏菌多价血清不凝集的菌株 ,可用鲍氏多价 1、 2、 3分 别检查,并进一步用 1 15各型因子血清检查。如果鲍氏多 价血清不凝集,可用痢疾志贺氏菌 3 12型多价血清及各型 因子血清检查。 66如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 ( 2)进一步的生化试验 葡萄糖铵 - 西蒙氏柠檬酸盐 - 赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶 - pH7.2尿素 - KCN生长 - 水杨苷和七叶苷的分解 - 67如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避
37、开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 ( 3)生化分群 五项生化试验: 乳糖 甘露醇 棉子糖 甘油发酵 靛基质试验 , 68如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 5、结果报告: 综合生化血清学试验结果判定菌群 ,菌型,并做出报告。 69如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏 思考题: 1、志贺氏菌分几个群各称为什么?抗原结构如何? K抗原 对 O抗原试验有何影响? 2、写出志贺氏菌、沙门氏菌、大肠杆菌在 SS、 EMB平板 上生长的菌落特征? 3、志贺氏菌在三糖铁培养基上生长的结果如何? 4、在志贺氏菌中,接种三糖尿病铁培养基和葡萄糖半固体 培养基后,哪些培养物可认为不属于本菌生长现象的范 围而可弃去? 5、如何用生化反应来区分志贺氏菌各群? 6、写出沙门氏菌、志贺氏菌的检验程序及所用培养基。 70如果你喜欢它,那么享受它。不喜 欢,那么避开它。避不开,那么改 变它。改不了,那么接受它。改变 观念,你就能接受它 喜欢就收藏