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1、常见真菌的分离与鉴定 发表时间：2010-08-20 发表者：皮肤科 (访问人次：361) 作者：上海长征医院皮肤科 徐红 2005 年 6月 1319 日全国各地举行了第 8届中国护足周，主题是“积极治 疗足病，杜绝家庭传染”。 在中国,每 2个人中就有 1人罹患足病，其中成年人发病比例高达 75%；超 过 60%的足病为真菌感染，其中足癣发病率为 45.2%，甲真菌病(俗称甲癣)占 15.5%；40%的足癣患者是被家人传染的；在真菌患者中只有 23.8%寻求治疗， 其中 50%的患者症状稍有好转就不继续治疗。 真菌其实很常见，真菌就生活在我们身边。 病原真菌的一般特性 真菌（Fungi）是

2、微生物中的一个大类，是一群数目庞大的细胞生物，估计 全世界已有记载的真菌有 10万种以上。它们的子实体小者用显微镜才能见到， 大者可达数十厘米，它们共同特征是具有真正的细胞核，产生孢子和不含叶绿 素，以寄生或腐生等方式吸取养料，仅少数类群为单细胞，其他都有分支或不 分支的丝状体，能进行有性或无性繁殖，具有纤维素（或其他葡聚糖）或几丁 质的微纤维或两者兼有的细胞壁的有机体。对人类和动物致病的真菌大约 100 余种，属于病原真菌。 一、基本性状 （一）形态结构 真菌分单细胞真菌与多细胞真菌两大类，前者属于酵母菌（yeast）一般呈 球形或卵圆形，后者称为霉菌（mold）或丝状真菌，呈丝状分枝，菌丝

3、交织象 绒球状，另有一些真菌可因寄生环境及培养条件（养料、温度、氧气等）的不 同可交替出现两种形态，即在室温中呈霉菌型，在 37或体内呈单细胞的酵母 型，这类真菌有双相性，所以称之为双态真菌或二相真菌。 真菌的细胞结构与一般植物细胞相似，有定型的细胞核及完善的细胞器， 但胞壁与细菌胞壁不同，不含粘肽而是由角质及葡聚糖组成，也含有脂多糖蛋 白质，其中酵母菌及类酵母菌皆以出芽增殖，不生长真菌丝，革兰氏染色呈阳 性，丝状真菌分菌丝及孢子两部分，形态多种多样，分述如下。 1菌丝（Hypha） 真菌在合适的环境中，由 孢子生出嫩芽，称为芽管。芽管逐渐延长呈丝状， 称菌丝。菌丝继续生长并生长分枝，增殖的菌

4、丝交织组成菌丝体。其中一部分 菌丝深入被寄生的物体或培养基中吸取养料，称为营养菌丝体。另一部分菌丝 向空间生长，称为气生菌丝体。气生菌丝体能产生孢子者称为生殖菌丝体。菌 丝中各个细胞间有明显分隔者，称为有隔菌丝。主要见于病原性真菌。很多非 病原真菌的菌丝无明显分隔，称为无隔菌丝。有些菌丝可呈各种特殊形式，如 球拍状、破梳状、螺旋状、结节状、关节状、鹿角状、假菌丝。 2孢子 生成孢子是真菌扩大繁殖的一种方式。真菌孢子的抵抗力、形态 及作用等均与细菌芽胞不同，分为无性孢子及有性孢子两大类。不经过两性细 胞的结合而形成的孢子叫无性孢子，这一繁殖过程称为无性繁殖。常见的无性 孢子有 5种：关节孢子、厚

5、壁孢子、孢子囊孢子、芽孢和分生孢子。病原真菌 属于不完全菌纲，很少产生有性孢子，大多数是无性孢子。 （1）厚壁孢子：当真菌在不利环境中，由菌丝内胞浆缩浓和胞壁增厚而成， 呈圆形。当环境好转时可生成芽管成长为菌丝。 （2）关节孢子：菌丝断裂形成长方形两端略钝圆的孢子叫关节孢子。如白 地霉和粗球孢子菌。 （3）孢子囊孢子：为鞭毛菌和接合菌的无性生殖形式。孢子囊中所含的孢 子来源于分枝菌丝或胞囊梗顶端膨大形成孢子囊，囊内原生质浓缩集聚，割裂 而成，一般数目较多，孢子囊形态多样，因种而异。 （4）芽生孢子：由菌细胞出芽生成，见于念珠菌及隐球菌，前者（类酵母 菌）出芽后孢子伸长呈丝状，但不见与母细胞分离

6、，称为假菌丝，在假菌丝上 的收缩点也可出芽成芽生孢子。 （5）分生孢子：是子囊菌和半知菌的无性孢子，也是半知菌分类的主要依 据，单细胞的分生孢子称小分生孢子，有蒂或无蒂，侧生或游离，分散或成群， 圆形、梨形、卵圆形或其它形状，表面粗糙或光滑，或有或无各种纹饰。多细 胞的分生孢子称大分生孢子，有纺锤形、棒形、球棍形、镰刀形及其它形状， 两端尖或圆或一端圆，厚壁或薄壁，壁光滑或粗糙，有色或无色，分隔有多有 少。 （二）培养特性及繁殖方式 1培养特性 大多数真菌对营养要求不高， 只需要水、盐，简单的氮源及碳水化合物就可 生长，一般常用沙堡氏琼脂基（主要成分葡萄 糖 4%、蛋白胨 1%、琼脂 2%）培

7、养都能生长。但 需要弱酸性（pH 46）、较低孵育温度 （2228），充分温度和氧气供应才能生长 良好。侵害内脏的某些真菌在 37含血的培养基中生长良好。真菌生长都比较 缓慢，大多需孵育数天后才成明显菌落，菌落有下列三种类型： （1）酵母型菌落：外观湿润稠软致密，类似一般细菌菌落，镜检只见有圆 真 菌的哪些特性决定了其有极强 的生存能力？ 形或椭圆形生芽细胞（例如隐球菌的菌落）。 （2）类酵母型菌落：外观性状似酵母型菌落，镜检除见有出芽的细胞外， 尚可见到假菌丝（例如念珠菌的菌落）。 （3）丝状型菌落：由多数分枝的菌丝体向上生长组成疏松的绒球状，表面 有很多孢子，显示各种色泽，菌落可呈棉絮状

8、绒球状 粉末状或石膏样，其正 面和背面可显示各种不同色素，常作为鉴定菌种的参考。镜检可见有纵横交织 的菌丝及各种孢子（例如各种癣菌的菌落）。 2繁殖方式 有多样性，包括出芽增殖，菌丝增长，菌丝分枝和断裂，产 生无性孢子及有性孢子进行繁殖，因此它繁殖力很强，但生长速度较慢。 （三）变异性和抵抗力 真菌很容易发生变异，在人工培养基中多次移种或孵育过久，就可出现形 态结构、菌落性状、色素以及各种生理性状（包括毒力）的改变，用不同的培 养基和温度培养真菌，其性状也有改变，真菌对干燥阳光紫外线及一般化学消 毒剂耐受性却较强。但对热的抵抗力却不强。60以上 1小时即可杀死孢子及 其菌丝，在 1%3%石炭酸

9、、2.5%碘酊、0.1%升汞及 10%甲醛中可被灭活。用甲 醛气体熏蒸被真菌污染的衣物用具，可杀灭真菌菌丝及其孢子。但真菌对一般 抗菌素及磺胺药均不敏感。只对二性霉素、酮康唑、制霉菌素等非常敏感，治 疗真菌感染常用此药。 （四）致病性与免疫性 1致病性 病原真菌的致病机制还是一个未完全解决的问题；根据其侵害 部位，主要分为下列两类： （1）浅部真菌病：主要由癣菌引起，大多为外源感染，常易侵害皮肤、指 （趾）甲及须发等含角质的组织，引起癣症。 （2）深部真菌病：可由各种真菌引起，包括类酵母菌、二相真菌及丝状菌。 侵害粘膜、皮下组织、内脏及脑膜等处，有时扩散全身，主要是内源性感染， 也可由外源传染

10、；前者是因机体抵抗力降低，如患重病，长期使用免疫抑制剂， 广谱抗菌素或放射治疗，患恶性病，严重烧伤等时，造成体内菌群失调，以致 常居在体内的某些真菌（如白念珠菌），甚至平时不致病的环境中的真菌（如 曲霉、毛霉）等也会乘机侵害，一些传染性较强的内脏真菌病是内外源感染。 2免疫性 浅部真菌病一般在血中不产生特异性抗体，病后无免疫保护力， 只是儿童头癣等青春期后头皮皮脂增多时可以自愈，以后不再感染，其他部位 癣症治愈后仍可再感染。深部真菌病虽可产生抗体，但无明显免疫保护作用。 三 种癣菌从菌种鉴定上有何共同 和不同之处？ 临床常见的病原性真菌 一、 浅部真菌 （）皮肤癣菌 皮肤癣菌又称皮肤丝状真菌，

11、有下列三属（见表 1），都只侵犯体表角化 组织（皮肤，毛发及指甲和趾甲）。不侵害深部组织，或内脏，皆属外源性传 染，由接触患癣病人、动物（狗、猫、鼠、牛、马等）或染菌物体而感染。 1毛癣菌属 红色毛癣菌 （1）直接镜检：皮屑及甲屑，分枝分隔的菌 丝有时可断裂或关节孢子状，毛发：发外型感染 表现为发外孢子排列成串。少数为发内型感染孢子在发内排列成链状；毛发穿 孔试验阴性。 （2）培养特征：在葡萄糖蛋白胨琼脂，25，生长比较快，菌落形态有多 种表现，镜检也不完全一样，常见有下列四种：I 型：羊毛状：白色羊毛状菌 丝充满斜面，典型的卷成筒状，边缘贴牢管壁，呈鲜红色，背面开始在中心有 一红色小点，以后

12、形成深红色环，最后成片为葡萄酒色，色素边缘划界非常明 显。少数 I型菌株表现无红色色素，正面白色，背面呈淡黄色类似石膏 I型， 亦有正面白色而背面呈灰黑色。II 型：绒毛状：粉红色绒毛状菌丝生长，占斜 面 3/5，菌丝稀疏，透过菌丝可见粉红色的基底，背面颜色同 I型相同。III 型： 粉未状：菌落表面稍有凸起，呈粉末状，粉红色，约占斜面的 1/22/3，背面 同 I型。IV 型：沟纹状：菌落生长相对较慢，比以上三种类型为小，占斜面的 1/31/2，菌落中央凸起，从中央向四周有排列比较整齐的放射状沟纹，边缘 整齐，表面菌丝甚少。开始微带黄色，以后变粉红，背面同 I型。 （3）菌种鉴定：菌落特征及

13、色素；大小分生孢子的形态；玉米粉吐 温琼脂上产生红色色素；毛发穿孔试验阴性；尿素酶试验阴性。 须癣毛癣菌 （1）直接镜检：皮屑内见分枝分隔的菌丝，甲屑内为关节状菌丝。毛发感 染为发外型，发内有时有菌丝。 （2）培养特性：在沙氏上生长较快，菌落形态可分为两大类：毛型和粉型； 下列 I、II 型为毛型，III、IV、V 型属粉型。自炎症明显的皮损中所分离出的 菌株多属粉型。毛型菌落外观均似红毛，应注意鉴别。具体分型羊毛状（I 型），又称趾间毛癣菌，菌落生长快，白色羊毛状。气生菌丝较多且长，排列 紧密，充满斜面，好象红毛，正面雪白，背面淡黄色。镜检见较细分枝，分隔 的菌丝，胞浆浓。有少量球形或长形小

14、分生孢子，无螺旋菌丝和大分生孢子。 间或可见球拍菌丝及结节菌丝。绒毛型（II 型），生长快，菌落雪白。表面 有紧密的细短气生菌丝，中央可有乳头状突起，边缘如刀切，背面棕黄色或棕 红色。镜检见较细的分枝、分隔的菌丝，小分生孢子多，有时成葡萄串状，无 螺旋菌丝或大分生孢子；乳皮状（III 型），开始为乳白色菌丝，不久一部 分菌落变为粉末样，色微黄，光滑，似牛乳表面的一层薄膜，可一块块地挑取， 中央有少许褶叠，边缘不整齐，背面淡黄或棕黄色。镜检见粗细不一，分枝分 隔的菌丝和大量螺旋菌丝，间或可见破梳状菌丝，结节菌丝及球拍菌丝，大分 生孢子少，棒状，两端圆，与分生孢子梗的连接处较窄，薄壁光滑，小分生孢

15、 子多，球形或长形，有时成葡萄串状排列。粉末状（IV 型），菌落粉末状， 表面平坦、光滑。间或有少数白色气生菌丝，中央有乳头状凸起，边缘锯齿状。 菌落生长快，充满斜面，色黄或奶油色，外观像石小、背面棕黄或棕红色。 颗粒状（V 型）：生长快，菌落粉样，表面不平，呈颗粒状。有不规则的褶叠 或沟纹，边缘不整齐。下面色黄带红或棕黄。背面棕红色。IV、V 镜检均见大 量棒状大分生孢子及无数圆形的小分生孢子，少数长型。游离或葡萄状成串， 有螺旋菌丝和球拍菌丝。 （3）菌种鉴定：菌落形态；菌丝较细， 是皮肤癣菌中最细的一种；螺旋菌丝多见； 大分生孢子的形态和球形小分生孢子；尿素酶阳性；毛发穿孔阳性。 紫色毛

16、癣菌 （1）直接镜检：皮屑、甲屑内可见分枝分隔的菌丝或成串的孢子，病发取 黑点部位的断发，毛发损害为发内型大孢子，呈关节型排列，充满整个发内， 故毛发出皮即断。 （2）培养特性：在沙氏琼脂培养基室温培养 菌落生长慢，开始为圆形、白色、潮湿发亮的菌 落，类似酵母；以后中央褶叠或突起，产生紫色色素，并逐渐扩大，或中央紫 色，边缘淡红色，最外围有一圈白色的环。培养基颜色不变，边缘无放射状菌 丝，整齐如刀切，下沉不明显，背面无色至深紫色，少数菌株无颜色，呈无色 紫色毛癣菌，镜检见粗细不一的菌丝，分隔较密，胞浆淡，有很多不规则的突 起和肿胀，但无鹿角菌丝。厚壁孢子多，多为间生，偶见小分生孢子 25 个大

17、 生分生孢子。 （3）菌种鉴定：菌落形态，紫色色素；VitB 能促进菌落生长，形成 大分生孢子；发内型感染。 2小孢子菌属 羊毛状小孢子菌 （1） 直接镜检：皮屑内见分枝、分隔的菌丝，病发为发外型感染。 （2）培养特性：在沙氏琼脂培养基上室温生长快。开始为黄色绒毛样生长， 2周后菌丝较多，呈羊毛状，可充满大部分斜面。中央趋向粉未化。正面桔黄， 背面红棕色，平皿中培养的菌落表面中央可有少数同心园，无放射状沟纹。生 长约 4-5周后开始变异，菌丝增多，大分生孢子减少或消失。镜检见大量纺锤 形，厚壁的大分生孢子。一端稍弯曲，末端有帽样肥大，有 6-15个分隔。小分 生孢子较少，长形，无柄侧生。可有球

18、拍状菌丝，破梳状菌丝，结节菌丝及大 量厚壁孢子等。 （3）菌种鉴定：菌落形态及色素，在 PDA培养基上能产生黄色色素； 特征性的厚壁、顶端膨大微弯曲，如戴帽的大分生孢子；发外孢子型感染。 石膏样小孢子菌 （1）直接镜检：皮屑内见菌丝或成串的孢子，病发为发外型感染，孢子较 大，排列成串。 （2）培养特性：在沙氏琼脂培养基上室温生长快，开始为白色菌丝，后成 棕黄色粉未状菌落，凝结成片，菌落中心有隆起，外围有少数极短的沟纹，边 缘不整齐，背面红棕色。镜检：见多数较小，纺锤形，46 个的大分生孢子， 壁厚 13m，两端园，壁有刺，菌丝较少，小分生孢子棒状无柄，有时可见 球拍状菌丝，螺旋，破梳状菌丝及结

19、节菌丝。 （3）菌种鉴定：菌落形态；大分生孢子的形态；毛发穿孔试验阳性。 3表皮癣菌属 絮状表皮癣菌 （1）直接镜检：皮屑及甲屑内见分枝分隔的菌丝。 （2）培养特性：在沙氏培养基室温生长快。菌落开始蜡状，高出斜面，表 面有不规则的褶叠，上覆粉未样菌丝,黄绿色。较大的菌落中央有褶叠，外围可 见放射状沟纹，最外围有不整齐的平滑圈。菌落下沉明显，培养基常为之开裂。 背面黄至棕色。镜检：见典型的杵状大分生孢子，24 个分隔。游离端圆形， 薄壁光滑，基部平截。常 24 个成群，无小分生孢子，老龄菌落厚壁孢子多， 菌丝较细，分枝，分隔，间或可见球拍，结节和螺旋菌丝。 （3）菌种鉴定：菌落特征；典型杵状大分

20、生孢子；无小分生孢子。 二、深部真菌 （一）白念珠菌：（Candida albicans） 1标本来源 痰、大便、口腔或阴道分泌 物、尿、脑脊液、胸水、脓液、皮屑及痂皮等。 2直接镜检 氢氧化钾涂片，可见卵圆形、 圆形芽孢，薄壁，直径约 24m 芽孢，椭圆形芽孢的芽管延长形成假菌丝， 有时在菌丝旁附着芽孢，PAS 染色为红色。 3培养及镜检 （1）葡萄糖蛋白胨琼脂：30划线培养一天即有光滑小菌落生长，菌落为 奶油色，闪光或呈蜡状，柔软光滑，老的菌落渐变硬，表面有皱褶或有毛发状 突起。镜检，在菌丝交接处有群集的卵圆形孢子或在菌丝旁侧有少许芽孢， 3.06.53.512.5m。 （2）玉米培养基：

21、菌落外观同上，镜检：菌丝很少分枝，有少量芽生孢子， 在菌丝的顶端或侧缘有厚壁孢子，直径 717m。 （3）快速鉴定与鉴定程序：将标本直接接 种在科玛嘉上，24 小时出现翠绿色菌落，将初 代分离的酵母样菌接种在含 1%吐温 80米粉中，25室温中 2448 小时，镜检 可见顶端产生圆形厚壁孢子或接种于 0.5ml，正常人血清或羊血清中，置 37 温箱中，经 12 小时镜检有芽生孢子及芽管形成，可初步鉴定为白念珠菌。 API 酵母快速鉴定：同化试验结果：葡萄糖，麦芽糖，乳糖，半乳糖 。 （二）热带念珠菌（Candida Tropicalis） 1标本来源：同白念珠菌。 2直接镜检：同白念珠菌。 各

22、 种深部真菌在快速鉴定上有何 不同之处？ 3培养及镜检： （1）葡萄糖蛋白胨琼脂，在 25中培养，菌落平滑有光泽，白色，时间 较久表面有皱纹，粘稠，甚至有毛样外观，镜检可见卵圆形细胞或球形细胞 （约 59m612m）。 （2）玉米琼脂：产生丰富的假菌丝及发育良好芽生孢子，但无厚壁孢子生 长。 （3）快速鉴定：科玛嘉培养基上，24 小时出现蓝灰色。同化试验。 （三）克柔氏念珠菌（Candida Krusei） 标本来源：同白念珠菌。 直接镜检：同白念珠菌。 培养及镜检： 葡萄糖蛋白胨琼脂：菌落扁平，平滑、干燥，有时表面有皱折，通常是 乳白色到淡黄，镜检所见：大多数孢子是较大的柱状， 2.55.5

23、m7.521.5m，亦有少数短卵圆形孢子。假菌丝丰富，芽生孢子 在菌丝上轮生。 玉米琼脂：对称分枝的菌丝，芽生孢子较少，无厚壁孢子。 葡萄糖蛋白胨液培养基：在培养基表面生长，与试管壁粘连。 快速鉴定：科玛嘉培养基上 24小时出现淡粉红色菌落。同化试验。 （四）近平滑念珠菌（Candida parapsilosis） 标本来源：同白念珠菌。 直接镜检：同白念珠菌。 培养及镜检： 葡萄糖蛋白胨琼脂：乳酪样菌落，通常表面光滑，亦有菌落表面粗糙及 皱折。镜检所见：卵圆形芽生孢子 2.55.048m，假菌丝形成丰富。 玉米琼脂：交叉分枝菌丝，侧生芽生孢子较多，无厚壁孢子。 葡萄糖蛋白胨液基：无表面生长，

24、在管底生长。 快速鉴定： 科玛嘉培养上 24小时出现粉色光滑菌落。同化试验： API。 （五）光滑念珠菌（Candida glabrata） 标本来源：痰、尿、血、皮肤、阴道、伤口、腹水、胸水、胆汁等。 直接镜检：卵圆形芽生孢子，直径 27m 或更大，单芽，位于孢子的 细端，无荚膜，无子囊或菌丝。 培养及镜检： 葡萄糖蛋白胨琼：白色或奶油色乳酪样菌落，日久变棕灰色，表面平滑， 稍有光泽，本菌只在酸性条件下生长，pH6.5 即不生长，镜检：同直接涂 片。 快速鉴定： 科玛嘉培养基上 24小时出现紫色菌落。 同化：API 试 验。 （六）胶红酵母（Rhodotorula mucilaginosa）

25、 标本来源：痰、尿、血、大便、皮肤、CSF、咽喉、体液等。 直接镜检：圆形或卵圆形，35m 直径，有荚膜的芽生孢子，单芽生， 孢子内有少数颗粒，无菌丝，不着色。 培养及镜检： 葡萄糖蛋白胨琼脂：25或 37时，生长迅速，菌落 10天内可达 22.5cm 直径，为乳酪样生长，边缘整齐，表面光滑，但无光泽，桔红，日久 颜色逐渐消退，呈淡黄色或桔黄色，培养基不变色，镜检同涂片所见，有时可 见假菌丝，无子囊。 快速鉴定： 菌落产生红色色素； 使尿素琼脂由黄变红。 （七）新生隐球菌（Cryptococcus neoformans） 标本来源：脑脊液、痰、脓、尿、粪、血、活体组织及尸体解剖材料等。 直接镜

26、检：墨汁染色，可见圆形厚壁孢子，菌体直径约 420m，外围 有一透光的厚荚膜，厚度约 57m，荚膜内的菌体可出芽或不出芽，孢内有 一较大的反光颗粒（脂质颗粒，不是孢核）和许多小颗粒，可与白细胞或淋巴 细胞相鉴别。 培养及镜检： 在葡萄蛋白胨琼脂，25或 37培养时，25 天即生长出乳白色细菌粘 液性菌落，呈不规则圆形，表面有蜡样光泽，以后菌落增厚，颜色由乳白、奶 油转桔黄色。非致病性隐球菌 37不生长。镜检类似直接镜检，可见圆形孢子， 直径 2.58m，多数有芽，孢子外围有荚膜，但荚膜开始甚狭，日久渐增厚， 无真菌丝及子囊孢子，但可有芽管。 快速鉴定：37生长；尿素酶变红；咖啡酸变棕色；同化试

27、验， 不发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖等。 三、其它实验室常见的丝状真菌 （一）曲霉属： 标本来源：皮屑，甲屑，耵聍，痰，粪，尿，脓液，活检与尸检组织标 本。 直接镜检：涂片见分枝，分隔的菌丝及足细胞，与外界相通腔道内标本 中有时可见分生孢子头，为曲霉的特征结构。 培养：初代用沙氏培养基，次代用察氏 PDA培养基，接种后室温培养 2 周。少数能产生闭囊壳的曲霉需培养 3周或更长时间。 菌种鉴定：（1）菌落，菌落生长速度，表 面质地，颜色，形态和气味等，其中颜色的特征 较稳定，是曲霉分类的主要依据之一；（2）分生 孢子头：分生孢子头的形态，颜色和大小。分生孢子头由顶囊、瓶梗、梗基和 分生孢子链组

28、成，是曲霉的特征性结构。（3）分生孢子梗或分生孢子柄，注意 它的长短，颜色，表面粗糙或光滑，是否有隔等。（4）分生孢子梗上的顶囊， 注意顶囊的大小，形态，颜色，梗占据顶囊表面积的大小等。（5）瓶梗及梗基： 统称小梗，注意单层还是双层，有些既有单层又有双层，甚至同一顶囊上也两 者兼有。（6）分生孢子：形态，大小，颜色，表面是否光滑及有无纹饰。 （7）具有性生殖的曲霉能产生闭囊壳。（8）部分曲霉能产生壳细胞，足细胞。 （9）有些能产生菌核。致病的曲霉有烟曲霉，黄曲霉，黑曲霉，土曲霉，构巢 曲霉，棒曲霉，杂色曲霉，米曲霉等等。 （二）青霉属： 标本来源：皮屑，甲屑，耵聍，痰，粪，尿，脓液，活检与尸检

29、组织标 本。 直接镜检：可见分枝、分隔的菌丝，无顶囊，偶可发现帚状枝。 培养：初代培养用沙氏培养基，次代培养用察氏或麦芽汁培养基。 菌种鉴定： （1）菌落特征：菌落形态包括生长速度、菌丝高度、颜色、渗出物、气味 和质地。质地包括绒状絮状束状。 （2）菌丝的粗细、颜色、埋伏型，部分埋伏型或部分气生型。 （3）分生孢子梗分枝或不分枝，是自气生菌丝亦成从埋伏菌丝上长出。单 根或成束，壁光滑或粗糙。 （4）帚状枝：为青霉属的特征性结构，指分生孢子梗分枝处毛瓶梗的整个 扫帚状结构。不包括分生孢子。 帚状枝的形状有 4种：单轮青霉组；对称双轮青霉组；不对称组； 对称多轮组。 （5）瓶梗：帚状枝的最后一级分枝即产孢细胞，大致分 3种类型： 柱 形；披针形；瓶形。 （6）副枝：支持梗基的细胞称副枝，可有一个或一个以上。 （7）分生孢子：大小、颜色、形状、表面是否光滑或粗糙。 （8）菌核：闭囊壳。 致病青霉有：产黄青霉、桔青霉、淡紫青霉、灰绿青霉、马尔尼菲青霉 等。 小结 真菌特征是具有真正的细胞核，产生孢子和不含叶绿素，以寄生或腐生等方 式吸取养料； 不同病原菌可通过培养、镜检、菌种鉴定上各有不同特征，可以进行分离和 鉴定。