蛋白质变性.doc

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资源描述

1、蛋白质变性 蛋白质的变性既有物理变化,也有化学变化: 蛋白质是由多种氨基酸通过肽键构成的高分子化合物,在蛋白质分 子中各氨基酸的结合顺序称为一级结构:蛋白质的同一多肽链中的 氨基和酰基之间可以形成氢键,使得这一多肽链具有一定的构象, 这些称为蛋白质的二级结构;多肽链之间又可互相扭曲折叠起来构 成特定形状的排列称为三级结构,三级结构是与二硫键,氢键等联 系着的。 变性作用是蛋白质受物理或化学因素的影响,改变其分子 内部结构和性质的作用。一般认为蛋白质的二级结构和三级结构有 了改变或遭到破坏,都是变性的结果。能使蛋白质变性的化学方法 有加强酸,强碱,重金属盐,尿素,乙醇,丙酮等;能使蛋白质变 性的

2、物理方法有加热,紫外线照射,剧烈振荡等。 重金属盐使蛋白 质变性,是因为重金属阳离子可以和蛋白质中游离的羧基形成不溶 性的盐,在变性过程中有化学键的断裂和生成,因此是一个化学变 化。 强酸、强碱使蛋白质变性,是因为强酸、强碱可以使蛋白质中的氢 键断裂。也可以和游离的氨基或羧基形成盐,在变化过程中也有化 学键的断裂和生成,因此,可以看作是一个化学变化。 尿素、乙醇、丙酮等,它们可以提供自己的羟基或羰基上的氢或氧 去形成氢键,从而破坏了蛋白质中原有的氢键,使蛋白质变性。但 氢键不是化学键,因此在变化过程中没有化学键的断裂和生成,所 以是一个物理变化。 加热、紫外线照射,剧烈振荡等物理方法使蛋 白质

3、变性,主要是破坏厂蛋白质分子中的氢键,在变化过程中也没 有化学键的断裂和生成,没有新物质尘成,因此是物理变化。否则, 鸡蛋煮熟后就不是蛋白质了。 从以上分析可以看出,蛋白质的变性既有物理变化,也有化学变化。 但蛋白质的变性是很复杂的,要判断变性是物理变化还是化学变化, 要视具体情况而定。如果有化学键的断裂和生成就是化学变化;如 果没有化学键的断裂和生成就是物理变化。 天然蛋白质的严密结构在某些物理或化学因素作用下,其特定的空 间结构被破坏,从而导致理化性质改变和生物学活性的丧失,如酶 失去催化活力,激素丧失活性称之为蛋白质的变性作用 (denaturation)。变性蛋白质只有空间构象的破坏,

4、一般认为蛋白质 变性本质是次级键,二硫键的破坏,并不涉及一级结构的变化。 变性蛋白质和天然蛋白质最明显的区别是溶解度降低,同时蛋白质 的粘度增加,结晶性破坏,生物学活性丧失,易被蛋白酶分解。 引起蛋白质变性的原因可分为物理和化学因素两类。物理因素可以 是加热、加压、脱水、搅拌、振荡、紫外线照射、超声波的作用等; 化学因素有强酸、强碱、尿素、重金属盐、十二烷基磺酸钠(SDS) 等。在临床医学上,变性因素常被应用于消毒及灭菌。反之,注意 防止蛋白质变性就能有效地保存蛋白质制剂。 变性并非是不可逆的变化,当变性程度较轻时,如去除变性因素, 有的蛋白质仍能恢复或部分恢复其原来的构象及功能,变性的可逆 变化称为复性。例如,前述的核糖核酸酶中四对二硫键及其氢键。 在 巯基乙醇和 8M 尿素作用下,发生变性,失去生物学活性,变 性后如经过透析去除尿素, 巯基乙醇,并设法使疏基氧化成二硫 键,酶蛋白又可恢复其原来的构象,生物学活性也几乎全部恢复, 此称变性核糖核酸酶的复性。 许多蛋白质变性时被破坏严重,不能恢复,称为不可逆性变性

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