1、生命科学学院 Life Science College 细 胞 生 物 学 实验报告 姓名：柳伟雄 班级：2013级生科一班 学号：201300140062 同组者：曾玮璠 山东大学实验报告 2015 年 4 月 19 日 姓名：柳伟雄 系年级：生科一班 2013 级 同组者：曾玮璠 科目：细胞生物学实验 题目：细胞凝集反应 一、目的和要求 1、了解细胞的表面结构。 2、掌握细胞凝集的原理。 3、掌握细胞凝集实验的操作方法。 4、掌握普通光学显微镜的使用方法。 二、原理 1、在细胞表面，组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖链，形成细胞外被（糖萼） 。目前认为，细胞间 的联系、细胞的生长和分化、肿瘤
2、的发生与免疫反应都与细胞表面的分枝状糖分子有关。 2、凝集素是一类含糖（少数例外）并能与糖专一结合的蛋白质，即糖蛋白，它具有凝集细胞和刺激细 胞分裂的作用。凝集素能与细胞外被中的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的作用，从而凝集细胞。 凝集素引起的细胞凝集，其细胞膜结构没有发生改变。与血液凝固中发生的复杂生化反应完全不同。 3、竞争性抑制实验：凝集素能与不同的糖蛋白特异性结合，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞凝集。 三、试剂和器材 1、实验材料 家兔（或 2%家兔红细胞悬液） 、土豆块茎（或由土豆块茎制作的可溶性土豆凝集素粗提取液） 、PBS 缓 冲溶液（磷酸缓冲溶液） 、柠檬酸钠溶液、0.9%的
3、氯化钠溶液（生理盐水） 2、实验器材 5ml 注射器、酒精棉球、双凹片、载玻片、普通光学显微镜、托盘天平、滴管、离心管 四、实验步骤 1、2%家兔红细胞悬液制备：以无菌方法抽取家兔耳缘静脉血液 1ml（5ml 注射器中先吸取 3ml 柠檬酸 钠溶液） ，用 0.9%的氯化钠溶液洗 5 次，3000r/s 离心 5min，最后按沉淀的红细胞体积用 0.9%的氯化 钠溶液配成 2%的红细胞悬液。 2、土豆凝集素制备：称取去皮土豆块茎 2g，切成薄片，加 10mlPBS 缓冲液，浸泡 2h，浸出粗提液中 含有可溶性土豆凝集素。 3、细胞凝集反应：双凹片土左侧滴土豆凝集素 1 滴，2%家兔红细胞悬液
4、1 滴；右侧滴 PBS 缓冲液 1 滴， 2%家兔红细胞悬液 1 滴。在双凹片上混匀，摇动。 4、低倍镜下观察。 山东大学实验报告 2015 年 4 月 19 日 姓名：柳伟雄 系年级：生科一班 2013 级 同组者：曾玮璠 科目：细胞生物学实验 题目：细胞凝集反应 五、实验结果 1、 实验结论 所加试剂 土豆凝集素 1 滴， 2%家兔红细胞悬液 1 滴 PBS 缓冲液 1 滴， 2%家兔红细胞悬液 1 滴 实验现象 发生了细胞凝集反应 未发生细胞凝集反应 2、 实验照片 加入土豆凝集素的红细胞 加入 pbs 缓冲液的红细胞 山东大学实验报告 2015 年 4 月 19 日 姓名：柳伟雄 系年
5、级：生科一班 2013 级 同组者：曾玮璠 科目：细胞生物学实验 题目：细胞凝集反应 加入土豆凝集素的红细胞 5min 加入 pbs 缓冲液的红细胞 5min 加入土豆凝集素的红细胞 10min 加入 pbs 缓冲液的红细胞 10min 、低倍镜观察（104） 山东大学实验报告 2015 年 4 月 19 日 姓名：柳伟雄 系年级：生科一班 2013 级 同组者：曾玮璠 科目：细胞生物学实验 题目：细胞凝集反应 实验组 对照组 加入土豆凝集素的红细胞 10min 加入 pbs 缓冲液的红细胞 10min 六、注意事项 1、在使用双凹片的过程中因操作不熟练，经常造成两个孔中的液体混合。在使用双凹片时要注意摇动 的技巧，不可前后或左右单一地摇动，应该一手固定，一手成环形方向摇动，使凹槽内的液体转动起 来。
