1、胃泌素释放肽前体检测试剂盒（电化学发光法）中文说明书 ProGRP 中文 1/8 Elecsys 和 cobas e 分析 仪 【产品名称】 通用名称：胃泌素释放肽前体检测试剂盒（电化 学发光法） 英文名称：ProGRP 【包装规格】 100测试 /盒 【预期用途】 主要用途 用于体外定量检测人血浆和血清中的胃泌素释放 肽前体（ProGRP） 。该分析结合其他临床方法可 辅助用于肺癌的鉴别诊断和小细胞肺癌患者的管 理。结果必须根据标准临床诊疗指南结合其他方 法进行解释。 Elecsys和cobas e免疫分析仪的工作原理是电化 学发光免疫分析“ECLIA”。 临床应用 胃泌素释放肽（GRP）是
2、一种重要的调节分子， 和人体许多生理功能、病理状态有关。它是一种 胃肠激素，是哺乳动物同源的两栖动物蛙皮素， 最初从猪胃粘膜中分离，广泛分布于哺乳动物的 神经系统、胃肠道和呼吸道。 1随着信号肽解离， 它的148 个氨基酸的前蛋白原进一步分解生成27 个氨基酸的胃泌素释放肽和68个氨基酸的胃泌素 释放肽前体（ProGRP） 。由于胃泌素释放肽的半 衰期很短，只有2分钟，不可能在血中检测到。 因此研发出一种检测胃泌素释放肽前体（31- 98）的测定法，一个羧基端区域，常见于三种类 型的人胃泌素释放肽前体剪接变体。现已证明血 清胃泌素释放肽前体（31-98）可作为小细胞肺 癌（SCLC ）病人的可
3、靠标志物。 2,3,4,5Elecsys胃 泌素释放肽前体检测血浆和血清中的胃泌素释放 肽前体（31-98 ） 。 胃泌素释放肽前体和神经特异性烯醇化酶 （NSE）是与神经内分泌源组织和肿瘤有关的两 种分子。胃泌素释放肽前体水平升高见于多种神 经内分泌源肿瘤，包括小细胞肺癌、类癌、具有 神经内分泌功能的未分化大细胞肺癌、甲状腺髓 样癌 6、其他神经内分泌恶性肿瘤 6以及具有神经 内分泌功能的不依赖雄激素的前列腺癌亚组。 7 良性疾病中的胃泌素释放肽前体： 文献报道胃泌素释放肽前体血清浓度在2- 50pg/mL时为正常。 8但是，在一项对包括肝脏 疾病在内的良性疾病（肾功能不全除外）病人的 研究
4、中，有2.5%的病人胃泌素释放肽前体血清 水平50 pg/mL。所有病人胃泌素释放肽前体 水 平均150 pg/mL时提示SCLC的可能性高达93%。 胃泌素释放肽前体在鉴别肺癌中的应用： 胃泌素释放肽前体对鉴别小细胞肺癌和非小细胞 肺癌非常有用。血清NSE还能为肺癌的组织学诊 断提供额外信息。 12 胃泌素释放肽前体在除肺癌外的其他恶性肿瘤中 的应用： 胃泌素释放肽前体血清水平升高主要见于SCLC 或神经内分泌肿瘤。 13胃泌素释放肽前体 在分化 良好的神经内分泌肿瘤中浓度升高常提示原发肿 瘤在肺并且生存几率较低。 14在不伴随肾功能不 全的其他恶性肿瘤病人中也常出现胃泌素释放肽 前体血清浓
5、度轻度升高，但99.7%的病人浓度 5000 pg/mL至LoB。 稀释 高于检测范围的标本可用样品稀释液（Diluent MultiAssay）稀释。建议1:10稀释（MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys 2010 或cobas e 分析仪可以自动稀释，也可以手工稀释）。被稀 释样本的浓度必须高于 500 pg/mL。 如用手工稀释，结果应乘稀释倍数。 如果采用MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys 2010 和cobas e分析仪自动稀 胃泌素释放肽前体检测试剂盒（电化学发光法）中文说明书 ProGRP 4/8 释，机器会自动计算结果。 【参考
6、范围】 一项德国研究对 698 名来自表观健康的白种成人 （336 名男性，362 名女性）进行了 Elecsys 胃 泌素释放肽前体检测，这些人年龄范围为 18-79 岁，得到如下结果（罗氏研究编号 RD001525 和 RD000788）。 胃泌素释放肽前体 (pg/mL) 第 5 百 分位数 中值 第 95 百分 位数 （95%CI b ） 第 97.5 百分 位数 （95%CI） 血清 25.3 40.3 69.2 (63.8-75.3) 77.8 (74.6-99.6) 肝素锂 血浆 25.7 41.4 68.0 (63.7-74.5) 77.0 (73.0-101.1) EDTA
7、血浆 22.2 35.5 59.5 (55.8-65.3) 68.1 (64.1-84.9) b) CI = 置信区间 实验室应按照自身的病人总数检查参考值的可转 移性，如有必要可根据自身情况设定参考范围。 表观健康个体和不同类型良性和恶性疾病患者的 胃泌素释放肽前体值 在欧洲的 4 个临床中心采用 Elecsys 胃泌素释放 肽前体检测对 2163 份血清样本进行测试后得到 的胃泌素释放肽前体检测值的百分比（%）分布 总结如下表： Elecsys 胃泌素释放肽前体值（pg/mL） 总体 200 N (%) N (%) N (%) N (%) N (%) 表观健康 吸烟者 174 0 (0)
8、140 (80.5) 34 (19.5) 0 (0) 0 (0) 既往吸 烟者 61 0 (0) 46 (75.4) 15 (24.6) 0 (0) 0 (0) 不吸烟 者 463 0 (0) 347 (74.9) 108 (23.3) 8 (1.7) 0 (0) 良性疾病 c) 良性肺 病 35 0 (0) 31 (88.6) 4 (11.4) 0 (0) 0 (0) 肾病 29 0 (0) 4 (13.8) 6 (20.7) 13 (44.8) 6 (20.7) 其他良 性疾病 120 0 (0) 100 (83.3) 20 (16.7) 0 (0) 0 (0) 癌症 SCLC 185 0
9、 (0) 33 (17.8) 24 (13.0) 17 (9.2) 111 (60.0) NSCL C 752 0 (0) 543 (72.2) 182 (24.2) 14 (1.9) 13 (1.7) SCLC/ NSCL C 混合 型 7 0 (0) 1 (14.3) 2 (28.6) 0 (0) 4 (57.1) 间皮瘤 27 0 (0) 24 (88.9) 3 (11.1) 0 (0) 0 (0) 甲状腺 髓样癌 15 0 (0) 2 (13.8) 1 (6.7) 0 (0) 12 (80.0) 神经内 23 0 (0) 10 (43.5) 6 (26.1) 2 (8.7) 5 (21
10、.7) 分泌癌 乳腺癌 53 0 (0) 40 (75.5) 12 (22.6) 0 (0) 1 (1.9) 卵巢癌 36 0 (0) 25 (69.4) 8 (22.2) 2 (5.6) 1 (2.8) 前列腺 癌 32 0 (0) 18 (56.3) 9 (28.1) 5 (15.6) 0 (0) 结直肠 癌 61 0 (0) 43 (70.5) 15 (24.6) 3 (4.9) 0 (0) 其他恶 性肿瘤 d) 90 0 (0) 67 (74.4) 18 (20.0) 5 (5.6) 0 (0) c）其他良性疾病包括肝脏疾病、代谢性疾病、自身免疫性疾病和炎 性疾病。良性肺病包括肺炎、哮
11、喘、COPD 和肺结核。 d）其他恶性疾病包括肾癌、肝癌、胰腺癌、胃肠道肿瘤、胃癌和宫 颈癌、类癌和淋巴瘤。 胃泌素释放肽前体在原发性肺癌鉴别诊断中的作 用 通过一项对 944 名病人的研究调查了胃泌素释放 肽前体用以鉴别 SCLC 和 NSCLC 的性能。其中 有 185 名 SCLC，752 名 NSCLC 和 7 名 SCLC/NSCLC 混合肿瘤。胃泌素释放肽前体水 平与组织学类型有关。这些值的分布总结在框图 和 2x2 表格中。 x = 1：NSCLC（n = 752），2：NSCLC/SCLC 混合型（n = 7）， 3：SCLC（n = 185） y = 胃泌素释放肽前体血清 （
12、 pg/mL） N NSCLC N SCLC 总计 胃泌素释放肽前体 85.7pg/mL 714 51 765 胃泌素释放肽前体 85.7pg/mL 38 134 172 总计 752 185 937 特异性达 95%的临界值为 85.7 pg/mL。168 名 SCLC 病人 Elecsys 胃泌素释放肽前体值和分期 的相关性见下表： 临床疾病 N 第 5 百分位 数 pg/mL 胃泌素释 放肽前体 中值 pg/mL 第 95 百分 位数 pg/mL SCLC I-II 期 11 17.9 75.9 781 SCLC III 期 57 28.4 301 2985 胃泌素释放肽前体检测试剂盒（
13、电化学发光法）中文说明书 ProGRP 中文 5/8 Elecsys 和 cobas e 分析 仪 SCLC IV 期 100 32.5 585 21830 NSCLC I-IV 期 752 15.8 38.6 85.7 SCLC/NSCLC 混合型 7 33.5 416 25240 良性肺病 35 14.0 32.6 54.8 当特异性设定为 95%时，I-IV 期 SCLC 和 NSCLC 及其与良性肺病之间的胃泌素释放肽前 体的灵敏度以及曲线下面积（AUC）见下表。 临界值 （pg/mL ） 灵敏度 （% ） AUC （95%CI） SCLC vs. NSCLC 85.7 72.4 0.
14、872 (0.837-0.907) SCLC vs. 良 性疾病 54.8 80.0 0.922 (0.886-0.957) 应考虑到如下要点： 如果胃泌素释放肽前体结果与临床证据不相 符，应增加其他测试验证该结果。 作为诊断指标，必须结合患者病史、临床检 查和其他临床资料来综合评估检测结果。 报告结果时应说明样本类型。 胃泌素释放肽前体浓度升高见于肾功能不全 的病人。肾功能不全病人血清胃泌素释放肽 前体水平和血清肌酐浓度明显相关。当胃泌 素释放肽前体水平升高而与病人临床症状不 相符合时应评估血清肌酐水平。 胃泌素释放肽前体水平不管结果如何，都不 能作为恶性疾病存在与否的绝对证据。疑似 或已知
15、癌症患者也需要执行其它检查明确诊 断和指导治疗。 给定标本的胃泌素释放肽前体的浓度，采用 不同制造商的测定法进行检测时，其结果可 能因为测定方法、定标和试剂特异度的不同 而不同。 【检验方法的局限性】 检测了以下物质和药物对检测性能的影响。对所 列最高浓度进行检测，未发现对结果造成干扰。 标准：初始值60 pg/mL 时回收率 6 pg/mL，初 始值60 pg/mL 时回收率10%范围内波动。 物质 复合物 测试浓度 白蛋白 200 g/L 胆红素 1130 mol/L或 66mg/dL 生物素 35 ng/mL 血红蛋白 0.621 mmol/L 或1.0 g/dL IgA 10 g/L
16、IgG 17 g/L IgM 2.9 g/L 脂肪乳剂（英脱利 匹特） 2000 mg/dL 类风湿因子 最高至 540 IU/mL 对于接受高剂量生物素治疗的患者（即5mg/天） ，必须在末次生物素治疗 8 小时后采集样本。 胃泌素释放肽前体浓度高达 100000 pg/mL 没有 发现高剂量钩镰效应。 体外对 16 种常用药物进行试验。 常用药物 药物 测试浓度 对乙酰氨基酚 200 g/mL 乙酰半胱氨酸 150 g/mL 乙酰水杨酸 1000 g/mL 1000 g/mL 抗坏血酸 300 g/mL 头孢西丁 2500 g/mL 环孢霉素 5 g/mL 强力霉素 50 g/mL 肝素
17、5000 U/L 布洛芬 500 g/mL 左旋多巴 20 g/mL 甲基多巴+ 1.5 20 g/mL 甲硝唑 200 g/mL 保泰松 400 g/mL 利福平 60 g/mL 茶碱 100 g/mL 癌症治疗的特殊药物 药物 测试浓度 阿瓦斯丁 750 g/mL 卡铂 600 g/mL 顺铂 180 g/mL 环磷酰胺 500 g/mL 地塞米松 20 g/mL 多西他赛 112.5 g/mL 阿霉素 72 g/mL 促红细胞生成素 25 mU/L 厄洛替尼 150 g/mL 依托泊苷 300 g/mL 吉非替尼 250 g/mL 盐酸吉西他滨 1500 g/mL 异环磷酰胺 2400
18、g/mL 洛莫司汀 172.5 g/mL 甲氨蝶呤 150 g/mL 胃复安 7.5 g/mL 非格司亭 0.9 g/mL 紫杉醇 330 g/mL 胃泌素释放肽前体检测试剂盒（电化学发光法）中文说明书 ProGRP 6/8 盐酸拓扑替康 2.25 g/mL 硫酸长春新碱 3.0 g/mL 酒石酸长春瑞滨 53.1 g/mL 少数病例中极高浓度的分析物特异性抗体、链霉 亲合素抗体或钌抗体会影响检测结果。通过合适 的试验设计可最大程度的减少这些效应。 作为诊断指标，必须结合患者病史、临床检查和 其他临床资料来综合评估检测结果。 【产品性能指标】 特殊性能参数 试剂在各分析仪上的性能试验数据如下。
19、各实验 室得出的数据可能会稍有差异。 精密度 应用Elecsys试剂盒、样本和质控品按照 CLSI（临床和实验室标准研究所）的方案 （EP5-A2）检测精密度：平行检测，每天2次重 复，共21天（n=84）。下面是获得的结果。 Elecsys 2010 和 cobas e 411 分析仪 可重复性 中间精密度 样本 均值 pg/mL SD pg/mL CV % SD pg/mL CV % 人血浆 1 6.65 0.171 2.6 0.281 4.2 人血浆 2 57.8 0.574 1.0 1.41 2.4 人血浆 3 468 3.45 0.7 10.5 2.2 人血浆 4 2420 18.8
20、 0.8 52.0 2.1 人血浆 5 4520 41.4 0.9 109 2.4 胃泌素释放肽 前体质控品 1 35.7 0.250 0.7 1.14 3.2 胃泌素释放肽 前体质控品 2 609 4.59 0.8 20.3 3.3 MODULAR ANALYTICS E170、cobas e 601 和 cobas e 602 分 析仪 可重复性 中间精密度 样本 均值 pg/mL SD pg/mL CV % SD pg/mL CV % 人血浆 1 7.20 0.270 3.7 0.491 6.8 人血浆 2 61.0 0.577 0.9 1.83 3.0 人血浆 3 478 5.03 1
21、.1 17.7 3.7 人血浆 4 2510 23.8 0.9 83.8 3.3 人血浆 5 4180 73.0 1.7 157 3.8 胃泌素释放肽 前体质控品 1 39.4 0.457 1.2 1.62 4.1 胃泌素释放肽 前体质控品 2 678 5.19 0.8 24.1 3.6 检测范围 3.005000 pg/mL（根据检测限和厂商制定的定 标曲线的最大值定义）。低于检测限的值将报告 为 5000 pg/mL（或10倍稀释的样本高达50000 pg/mL）。 检测下限 空白限（ LoB）、检测限（ LoD）和定量限 （ LoQ） 空白限2.00 pg/mL 检测限3.00 pg/m
22、L 定量限7.00 pg/mL，可接受的总误差 30 根据 CLSI（临床和实验室标准研究所）EP17-A 的要求测定空白限、检测限和定量限。 通过检测数个独立系列的不含分析物的样本，得 出 n60个测试值，这些值的第 95 百分位值为 空白限。空白限低于不含分析物样本浓度的几率 为 95。 检测限由空白限和低浓度样本的标准差确定。检 测限与最低可检出的分析物浓度一致（高于空白 限值的几率达 95）。 定量限定义为可准确定量的最低分析物浓度，其 最小相对误差30。 研究遵循CLSI EP17-A2的要求，采用 5种马血清 样本和稀释的人血浆样本分别检测LoB和LoD 。 样本在2个分析仪上3
23、天运行6次，总共得到60个 值。计算的LoB和LoD分别为1.60 pg/mL和2.23 pg/mL。对于LoQ，对3份人血浆样本进行稀释， 并在2个分析仪上3 天运行6 次。总体可接受误差 30的LoQ 为 3.99 pg/mL。 方法学比较 在 cobas e 601 分析仪上采用 Elecsys 胃泌素释 放肽前体检测（y）和手工胃泌素释放肽前体 ELISA（x）进行比较得出以下相关性： 被测血清样本数：153 Passing/Bablok20 线性回归 y1.49x+4.38 y1.40x+13.2 T=0.800 r0.988 样品浓度范围约为 3-4384 pg/mL。 在 cob
24、as e 601 分析仪上采用 Elecsys 胃泌素释 放肽前体检测（y）和自动胃泌素释放肽前体方 法（x）进行比较得出以下相关性： 被测 K2-EDTA 血浆样本数：166 Passing/Bablok20 线性回归 y0.977x-2.68 y 1.00x-4.83 T=0.852 r0.996 样品浓度范围约为3-4068 pg/mL。 分析特异性 Elecsys 胃泌素释放肽前体 检测的特异性被设定 为当胃泌素释放肽（GRP）浓度为 100 ng/mL 时交叉反应性1%。采用 Elecsys 胃泌素释放肽 胃泌素释放肽前体检测试剂盒（电化学发光法）中文说明书 ProGRP 中文 7/
25、8 Elecsys 和 cobas e 分析 仪 前体检测根据 CLSI 的方案（EP7-A2）进行了一 项研究。含浓度范围为 34-107 pg/mL 的胃泌素 释放肽前体的人血浆等份，补入浓度为 400 ng/mL 的胃泌素释放肽后测试胃泌素释放肽前体。 计算胃泌素释放肽的交叉反应性低于 0.01%。 f） f）代表性数据；各实验室得出的数据可能会稍有差异。 【注意事项】 仅用于体外诊断。 在使用本试剂盒时必须遵循所有试验室试剂操作 的注意事项。 所有废弃物必须按照当地法规进行处置。 专业人员可要求获得安全数据报告。 避免试剂和样本（样本、定标液和质控品）产生 气泡。 请注意： 病人样本胃
26、泌素释放肽前体值的高低与所采用的 检测方法密切相关。因此检测报告必须要注明所 采用的胃泌素释放肽前体分析方法。用不同方法 测出的胃泌素释放肽前体值不能相互直接比较， 以免得出错误的医学解释。 【参考文献】 1. Ischia J, Patel O, Shulkes A, et al. Gastrin- releasing peptide: Different forms, different functions. Biofactors 009;35:69-75. 2. Miyake Y, Kodama T, Yamaguchi K. Pro- gastrin-releasing peptide
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