1、抗体保存详细指南 需要相关抗体试剂的可以访问 Fantibody 全球抗体搜索引擎 fantibody 全球抗体搜索引擎是一个供公共检索的抗体数据库，其抗体信息数据来源于全球 范围的研究机构与商业公司。该引擎由商品化抗体数据库与抗体应用评价数据库两部分组 成，以帮助研究者更高效的寻找并评估该抗体的性能。全球抗体搜索引擎是继基因与蛋白 数据库之后更为复杂的应用型检索平台，网址： 需要相关的实验室仪器设备、生物试剂、医疗器械、制药设备、医药原料、体外诊断试剂 及耗材与技术服务信息的，可以访问探生网进行咨询，期待您的加入： 抗体保存得当与否，直接决定了抗体的活性和使用效果，如果抗体保存得当，抗体活性
2、大 部分都可以维持数年。 1. 收到抗体后，请务必在4，12000rpm ，离心3 分钟，再打开管盖进行分装和保存（如 果抗体体积小于50ul，请延长离心时间至 5 分钟，以保证全部抗体均离心下来） 。 抗体使用特制的储存管，只有在12000rpm 离心3 分钟，才能将附着在管壁或盖内的 抗体全部离心下来（即使是在10000rpm 离心也会离心不完全，导致出现抗体的量不足的 现象)。 请谨记，无论何时请按照说明书推荐的保存条件正确保存抗体！ 2. 对于大部分抗体，比较合适的保存方式是，分装后保存在-20 或者-80。 （1）对绝大多数抗体来说，保存在-20 就完全足够了，没有任何证据显示保存在
3、-80会 更好。 （2）分装可以最大程度的降低反复冻融对抗体活性的损害，同时也降低了由于多次从同 一管中吸取抗体造成的污染可能性。 （3）分装的量以一次实验用完为好，最少不能少于10ul 每份。因为分装体积越小，抗体 的浓度越可能会受到蒸发以及管壁吸附的影响。 （4）复融后的分装抗体如果一次用不完，将剩余母液保存在4，避免再冻起来。 （5）抗体工作液应该当天配制当天用完，4保存尽量不要超过1 天。 （6）绝对避免将抗体保存在自动除霜冰箱中。将抗体保存在冰箱里层，避免温度变化造 成反复冻融。 3. 大部分抗体收到后4短暂保存12 周对抗体活性没有影响。 如果抗体很快会使用（12 周内） ，推荐在
4、4保存，这是为了避免反复冻融对抗体活性的 损害，如果要长期保存，则最好是在-20或者-80 。最关键的一点是要根据说明书推荐 的方式来正确的保存抗体。腹水形式的抗体产品请在收到后立即冻起来，因为该类产品含 有大量的蛋白酶，长期在4保存会导致抗体的降解。 4. 大部分抗体的运输条件：一般的运输过程需要12 周的时间，所以是在低温4的条件 下来完成的。 4运输最主要的目的是为了避免反复冻融对抗体活性的损害（如果使用干冰运输，那么收 到时抗体是冻起来的，为了分装就需要解冻，这就多了一次冻融的过程） ，所以运输过程中 绝对避免干冰运输。 特殊抗体的保存条件 酶联抗体：永远保存在4，避免冻起来，否则会导
5、致酶活性的下降或者丧失。 偶联抗体：所有偶联抗体都需要在棕色管中或使用锡箔纸避光4保存，尤其是荧光抗 体，对光极为敏感，因此在所有的实验阶段也是要避光操作的。 IgG3 的同型对照：永远保存在4，避免冻起来。因为如果出现冻融过程，该抗体非常 容易形成多聚体。 无论是保存还是运输，请避免反复冻融！ 反复冻融会导致抗体空间结构变性，导致多聚体形成，从而降低抗体的结合能力。 抗体保存其它相关信息 关于加入甘油保存： 有些人会加50%的甘油到抗体中来避免反复冻融，甘油在-20会降低冰点，这对很多抗体 可能是可行的。加入甘油的溶液不建议在-80保存，因为这已经超过了甘油的冰点。如果 您要加入甘油来保存抗
6、体的话，请谨慎注意无菌操作，避免污染！ 关于蛋白保护剂： 蛋白在高浓度时更不容易降解（1mg/ml 或者更高） ，这就是为什么在抗体中加入 BSA 之 类作为稳定剂的原因了；另一方面，加入的蛋白也可以减少抗体由于管壁吸附所造成的损 失。但是如果抗体要用来标记的话，则不能加入蛋白稳定剂，因为这些稳定剂会和抗体一 起竞争结合标记物。 关于叠氮化钠（sodium azide）的使用： 为了防止微生物污染，叠氮化钠经常被加入到抗体中（终浓度0.02% (w/v)） 。不少公司绝 大部分抗体已经含有了0.02 -0.05%的叠氮化钠，在说明书的储存缓冲液中有标明。 在下述情况中不能使用叠氮化钠 如果抗体用于染色或处理活细胞，用于体内研究叠氮化钠在抵抗微生物的同时，对其它 大部分有机物也是有毒的，因为它阻断了线粒体的细胞色素电子传递系统。 要偶联带有氨基基团的抗体 叠氮化钠会干扰任何含有氨基基团的偶联，因此在进行偶联之前，应将叠氮化钠去除。偶 联后的抗体可以加入叠氮化钠保存，但是浓度只能是0.01。对于需要偶联的抗体，硫汞 撒也可以替代叠氮化钠作为保护剂。 注：叠氮化钠的去除方式 可以通过凝胶电泳或过滤的方式去除，IgG 的分子量是150kDa（IgM 约600kDa ） ；叠氮 化钠的分子量只有65Da，使用截留分子量为 14kDa 的滤膜即可将叠氮化钠从抗体中去除。
