1、第二章 蛋白质 一、填空题 1. 组成蛋白质分子的碱性氨基酸有_、_和_。酸 性氨基酸有_和_。 2. 在下列空格中填入合适的氨基酸名称。 (1)_是带芳香族侧链的极性氨基酸。(2) _和_是带芳香族侧链的非极性氨基酸。 (3)_是含硫的 极性氨基酸。 (4)_或_是相对分子质量小且不含硫的氨基酸，在一个肽 链折叠的蛋白质中它能形成内部氢键。 (5)在一些酶的活性中心中起作用并含羟基的极性较小的氨基酸是 _。 3. 氨基酸的等电点(pI)是指_。 4. 脯氨酸与茚三酮反应产生_色的物质，而其它氨基酸与茚三酮反应产生 _色的物质。 5. 实验室常用的甲醛滴定是利用氨基酸的氨基与中性甲醛反应，然后
2、用碱(NaOH)来滴定 _上放出的_。 6.通常可用紫外分光光度法测定蛋白质的含量，这是因为蛋白质分子中的 _、_和_三种氨基酸的共轭双键有紫外吸收能力。 7. 在 -螺旋中 CO 和 N-H 基之间形成的氢键最稳定，因为这三个原子以_排列。 8. 维持蛋白质构象的化学键有 _、_、_、_、_和 _。 9. 常用的肽链 N 端分析的方法有_法、_法、_法 和_法。C 端分析的方法有 _法和_法等。 二、是非题 1. 天然氨基酸都具有一个不对称 -碳原子。 2. 亮氨酸的疏水性比丙氨酸强。 3. 蛋白质分子中所有的氨基酸(除甘氨酸外) 都是左旋的。 4. 只有在很高或很低 pH 时，氨基酸才主要
3、以非离子化形式存在。 5. 可用 8mol/L 尿素拆开蛋白质分子中的二硫键。 6. 如果多肽链 C-末端的第二个氨基酸不是脯氨酸，则羧肽酶 A 或 B 中至少有一种能切下 C-末端 氨基酸。 7. 脯氨酸不能参与 - 螺旋，它使 - 螺旋弯曲(bend)，在肌红蛋白和血红蛋白的多肽链中，每一 个弯曲处并不一定有脯氨酸，但是每个脯氨酸却产生一个弯曲。 8. 维持蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键。 9. 大多数蛋白质的主要带电基团是由它 N-末端的氨基和 C-末端的羧基组成。 10. 溶液的 pH 可以影响氨基酸的等电点。 11. 在生理条件下，氧和二氧化碳均与血红蛋白血红素中的二价铁结合。
4、12. 到目前为止，自然界发现的氨基酸为 20 种左右。 13. 疏水作用是使蛋白质空间结构稳定的一种非常重要的次级键。 14. 在蛋白质和多肽分子中，连接氨基酸残基的共价键除肽键外，还有二硫键。 三、单选题 1. 下列氨基酸溶液除哪个外都能使偏振光发生旋转? A.丙氨酸 B.甘氨酸 C.亮氨酸 D.丝氨酸 2. 下列哪种氨基酸有米伦氏(Millon)反应? A.色氨酸 B.酪氨酸 C.苯丙氨酸 D.组氨酸 3. 下列氨基酸中除哪种外都是哺乳动物的必需氨基酸？ A.苯丙氨酸 B.赖氨酸 C.酪氨酸 D.亮氨酸 4. 下列哪一种氨基酸侧链基团的 Pka 值最接近于生理 pH? A.半胱氨酸 B.
5、谷氨酸 C.谷氨酰胺 D.组氨酸 5. 有一多肽经酸水解后产生等摩尔的 Lys，Gly 和 A1a.如用胰蛋白酶水解该肽，仅发现有游离的 Gly 和一种二肽。下列多肽的一级结构中，哪一个符合该肽的结构? A.Gly-Lys-Ala-Lys-Gly-Ala B.Ala-Lys-Gly C.Lys-Gly-Ala D.Gly-Lys-Ala 6. 测定小肽氨基酸顺序的最好方法是 A.2，4-二硝基氟苯法(FDNB 法) B.二甲氨基萘磺酰氯法(DNS-Cl 法) C.氨肽酶法 D.苯异硫氰酸法 (PITC 法) 7. Sanger 试剂是 A.苯异硫氰酸(异硫氰酸苯酯 ) B.2，4- 二硝基氟苯
6、 C.丹磺酰氯 D.- 巯基乙醇 8. 典型的 - 螺旋是 A. B. C. D. 9. 下列有关 - 螺旋的叙述哪个是错误的? A.分子内的氢键使 -螺旋稳定减弱 R 基团间不利的相互作用使 -螺旋稳定 B.减弱 R 基团间不利的相互作用使 - 螺旋稳定 C.疏水作用使 -螺旋稳定 D.在某些蛋白质中，-螺旋是二级结构中的一种类型 10. 在生理 pH 条件下。具有缓冲作用的氨基酸残基是 A.Tyr B.Trp C.His D.Lys 11. 维持蛋白质三级结构主要靠 A.氢键 B.离子键 C.疏水作用 D.范德华力 12. 下列有关 - 折叠的叙述哪个是错误的？ A.球状蛋白质中无 -折叠
7、的结构 B.-折叠靠链间氢键而稳定 C.它的氢键是肽链的 CO 与 NH 间形成的 D.-角蛋白可以通过加热处理而转变成 - 折叠的结构 四 、名词解释 氨基酸的等电点 蛋白质一级结构、蛋白质 二级结构、蛋白质 三级结构、 蛋白质四级结构 等电聚焦电泳 盐析 五、问答题 1. 什么是蛋白质？简述蛋白质的生物学功能。 2. 什么是蛋白质变性？白质变性特点是什么？ 3. 蛋白质 螺旋结构的特点是什么？ 4. 蛋白质 折叠结构的特点是什么？ 参考答案 一 填充题 1 精氨酸 赖氨酸 组氨酸 天冬氨酸 谷氨酸 2 （1）酪氨酸（2）色氨酸，苯丙氨酸 （3）半胱氨酸（4）丝氨酸，苏氨酸（5） 丝氨酸 3
8、 氨基酸所带净电荷为零时溶液的 pH 值 4 黄 紫 5 氨基酸的-NH 3+ 质子 6 色氨酸 酪氨酸 苯丙氨酸 7 直线 8 氢键 离子键（盐键） 疏水键 范德华引力 二硫键 配位键 9 二硝基氟苯（FDNB）异硫氰酸苯酯（PITC ）丹磺酰氯（DNS-Cl ） 氨肽酶 肼解 羧肽酶 二 是非题 1 错，甘氨酸无不对称 -碳原子。 2 对 3 错，蛋白质中的氨基酸有左旋的，也有右旋的。 4 错，在水溶液中氨基酸的非离子化形式从来不会占优势。 5 错，尿素是蛋白质变性剂，它使蛋白质分子中的氢键破坏，但不能拆开二硫键。 6 错，当 C 端为脯氨酸时，羧肽酶 A 和 B 都不能作用。 7 对。
9、8 错，维持蛋白质三级结构最重要的作用力是疏水键（或称疏水作用） 。 9 错，蛋白质分子所带的电荷主要来自带电荷的侧链基团。 10 错，氨基酸的等电点式指氨基酸所带净电荷为零时溶液的 pH 值，溶液的 pH 值并不影响氨基酸的等 电点。 11 错 ，氧与血红蛋白血红素中的二价铁结合，而二氧化碳与血红蛋白 4 个亚基的 N 端氨基结合。 12 错 ，从蛋白质水解物中分离出来的常见氨基酸有 20 种左右，但自然界中发现的氨基酸已有 200 多种。 13 对 14 对 三 单选题 1B 、因为是甘氨酸的 -碳上结合了两个氢原子，这样甘氨酸就是没有不对称碳原子，因此也就没有光 学活性。在蛋白质中发现的
10、其他所有氨基酸都有光学活性，他们属于 L-型即与 L-甘油醛相同的那种构型。 2 B、酪氨酸的酚基有米伦氏反应，色氨酸的吲哚环有乙醛酸反应，苯丙氨酸的苯环有黄色反应，组氨酸 的咪唑环有波利（Pauly）反应，精氨酸的胍基有坡口（Sakaguchi）反应。 3C 、因为正常的哺乳动物的肝和肾中，存在着苯丙氨酸羟化酶，它是苯丙氨酸羟化成酪氨酸。而题中列 出的其他几种氨基酸必须从食物中供给。 4 D 、组氨酸咪唑基的 pKa 为 6.0，最接近于生理 pH 值。 5 B 、题中所列的多肽经酸水解以后均能产生等摩尔的三种氨基酸。胰蛋白酶水解精氨酸或赖氨酸的羧基 形成的肽键。只有（B）经胰蛋白酶水解以后
11、产生一个游离的甘氨酸和一种二肽。 6 D、测定小肽氨基酸序列最好的方法是苯异硫氰酸法。此法的最大优点是苯异硫氰酸和肽链 N 端氨基酸 的 -氨基反应后形成的苯硫氨甲酰肽（PTC-肽） ，然后在酸性条件下，N 端的苯硫氨甲酰肽（PTC-肽） 环化形成苯硫乙内酰脲衍生物（PTH-氨基酸）并从肽链上脱落下来，而肽链的其余部分仍是完整的，又 可重复上面的反应。蛋白质顺序仪的基本原理就是采用苯异硫氰酸法（亦称 Edman 讲解法）逐个降解肽 链 N 端的氨基酸而测定氨基酸在肽链中的排列顺序。 7 B、 Sanger 首先利用 2,4-二硝基氟苯与氨基酸、肽或蛋白质的自由 -氨基反应，生成一种黄色的二硝
12、基苯衍生物。 8 C、典型的 螺旋式 3.613。表示每圈螺旋包含 3.6 个氨基酸残基，氢键所封闭的环的原子数是 13 9 C、 螺旋是蛋白质二级结构中的一种。它的稳定因素包括（ 1）-CO 基与-NH 基之间形成的分子内部 的氢键。 （2） 螺旋的空间排列减小了 R 基团之间不利的空间效应。疏水作用对 螺旋结构的稳定性并 不重要。 螺旋被脯氨酸和甘氨酸残基所破坏。 10 C 、因 His 咪唑基的 pKa 为 6.0，在生理 pH 值条件下有明显的缓冲作用。 11 C 、氢键、离子键、疏水作用、范德华力和二硫键在维持蛋白质的三级结构中共同起作用，但其中疏 水作用是维持蛋白质三级结构的重要作用力。 12 A 、 折叠是蛋白质中常见的一种二级结构，在部分球状蛋白质分子中存在或多或少的 折叠。
