1、中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 全国第四届个体化医学培训班，长沙， 2011-6-13 个体化医学长沙论坛 中南大学湘雅医学检验所 卫生部临床药理国家培训中心 郭栋 中南大学湘雅医学检验所 肿瘤常规化疗药物个体化治疗 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 药 物代谢动力学 药 物效应动力学 药 物快慢代谢 ,毒性 /有效性差异 药物体内过程 药 物靶点药 物转运体药 物代谢酶 药 物效应个体差异 药物体内过程 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 基
2、因 mRNA 蛋白 每个蛋白功能改变 基 因突变 mRNA序列改变 mRNA数量改变 蛋白数量改变 总体蛋白功能改变 可遗传突变 体细胞突变 Biomarker Biomarker Biomarker Biomarker 组 织 检 测 ， 往 往 与 疗 效 相 关 可由血细胞分型反应， 往往与药物代谢相关 中心法则 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 Biomarker的优缺点 o 蛋白和 mRNA： 因为蛋白是直接效应蛋白，所 以肿瘤靶向治疗中，蛋白表达与否是跟疗效有 无直接相关的；而 mRNA的检测，因为比蛋白 更灵敏，所以，对 mRNA
3、与蛋白成正比的蛋白 而言，更易检测； o 突变： 比起蛋白而言，是定性检测更稳定，但 是，要求突变与蛋白功能关系确切。我们也是 致力于寻找能与表型直接对应的突变位点，以 利于检测。 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 o 非靶向性，为减少毒副反应，往往为 前药 。本次介绍中除铂 类； o 抗代谢型药物，为了减少毒性反应， 大部分药物在肝脏代谢 为无活性成分，而小部分在组织细胞内代谢为活性也是毒性 成分 ； o 因为普通化疗药物的毒性成分也是活性成分，所以治疗窗窄 ，特别应注意个体化用药，使得活性也是毒性成分在体内浓 度适当，方可减少副反应，而不牺
4、牲疗效。 普通化疗药物的 这一特点，所以 以生存期为终点观察指标的试验，仅有少数 结果得到很好的重复 ，我们这里报告所选择的是，结论较确 切。确认结论较确切的指标：试验结果在各试验中得到较好 的重复、试验设计合理性以及试验中受试者人数。选择设计 合理，受试者人数多而且重复性较好的结果报告如下。 普通化疗药物的特点 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 肿瘤个体化药物治疗基因检测目录 p 巯嘌呤、硫唑嘌呤 p 伊立替康 p 顺铂、奥沙利铂 p 吉西他滨 p 5-氟尿嘧啶 p 紫杉醇 p 表柔比星 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培
5、训中心 国家 GCP培训中心 肿瘤药物个体化治疗基因检测之二：化疗药物 巯嘌呤、硫唑嘌呤毒性预测 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 巯嘌呤 Mercaptopurine v 药理作用：细胞周期特异性药物 (S期敏感 )，抑制嘌呤合成途径 v 适应症：急性淋巴细胞白血病及急性非淋巴细胞白血病，慢性粒细胞白血病的 急变；为儿童急淋一线药物 v 不良反应：较常见的为 骨髓抑制；肝脏损害 ：可致胆汁郁积出现黄疸；可见于 服药量过大的患者：消化系统毒性、高尿酸血症（多见于白血病治疗初期，严 重的可发生尿酸性肾病）；少见：间质性肺炎及肺纤维化 硫唑嘌呤 A
6、zathioprine 126:608-614 TPMT (巯嘌呤甲基转移酶 ) 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 o 6p22.3 o 9 introns, 10 exons o 全长 3.4 kb，编码序列 2.7kb； 1号外显子全长及 3、 4号外显子部分不编码 o 假基因位于 18q21.1，同源性达 96% o TPMT的活性在患者间个体差异明显，人群中 86.6的 TPMT活性较高，而 11.1具有中等活性，有 0.3活性缺失。 o 80%-95%的低 TPMT活性可由： TPMT*2， *3A， *3B，和 *3C解释，在东方人
7、 群中 *3C占绝大多数 TPMT (巯嘌呤甲基转移酶 ) 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 TPMT (硫嘌呤甲基转移酶硫嘌呤甲基转移酶 ) Leukemia (2000) 14, 567572 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 TPMT活性与 TPMT突变呈基因剂量效应 Journal of the National Cancer Institute, 1999, 91(23) TPMT (巯嘌呤甲基转移酶 ) MM WM WW 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心
8、国家 GCP培训中心 TPMT(巯嘌呤甲基转移酶 ) Ther Drug Monit 2004(26):186-191 TGNTPMT WW WM MM WWWM MM MM WMWW MMWMWW 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 TPMT突变检测临床意义小结 p 巯嘌呤甲基转移酶（ TPMT）参与巯嘌呤和咪唑硫嘌呤的甲基化作用，与其毒性关系 密切。 p TPMT的活性受到遗传多态性的影响，它可以通过 TPMT改变巯嘌呤的代谢率。 TPMT的 活性在患者间个体差异明显，人群中 86.6的 TPMT活性较高，而 11.1具有中等活 性，有 0.
9、3活性缺失。 p TPMT活性高的为野生型 TPMT*1，而突变型 TPMT*2(G238C)， *3A（ A719G）和 *3C(G460A)占中等和低活性状况的 80-95。 TPMT*3A的患者 TPMT活性完全丧失， TPMT*3B和 TPMT*3C患者的 TPMT催化活性分别降低 9和 1.4。 TPMT*1/*3个体为中等代谢 者）， TPMT*3B/*3C个体为低代谢者。 p 研究表明， TPMT中等活性和较低活性的患者只能接受 10 50的平均巯嘌呤化疗 剂量。人群中约 0.3的 TPMT活性缺失， 11的人群活性中等，都面临着患骨髓抑制 增加的风险。 p TPMT基因的遗传变
10、异对于急性淋巴细胞性白血病化疗反应毒副作用具有重要意义。 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 p TPMT*1/*1野生型基因携带者酶活性正常，使用正常 剂量； p TPMT *1/*2、 *1/*3A、 *1/*3C突变杂合子基因携带者 酶活性很低，使用 10 50剂量，减少毒性反应并 节省费用； p TPMT *2/*2， *3A/*3A、 *3C/*3C、 *2/*3A、 *3A/*3C 、 *2/*3C突变纯合子基因携带者酶活性极低，使用 5 10剂量，减少毒性反应并节省费用。 用药建议 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国
11、家培训中心 国家 GCP培训中心 肿瘤药物个体化治疗基因检测之二：化疗药物 伊立替康药物毒性预测 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 属喜树碱类化疗药物，前药 ，活性成分： SN-38 作用机制 : 抑制拓扑异构酶 I ， S期特异 适应症：晚期 /转移性结直肠 癌，对于 5-FU化疗失败的患 者，本品可作为二线治疗。 同时对小细胞和非小细胞肺 癌及宫颈癌和卵巢癌亦有疗 效。 不良反应：较常见为血样腹 泻、中性粒细胞减少症 (均为 剂量依赖性 ) 伊立替康 UGT1A1 羧酸酯酶 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家
12、 GCP培训中心 CPT-11 CPT-11 SN-38G SN-38G SN-38SN-38 0-2级腹泻 3-4级腹泻 发生 3-4级腹泻的病人体内 SN-38浓度明显升高 伊立替康 CANCER RESEARCH, 1994(54),15: 3723-3725 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 UGT1A1基因突变 UGT1A1*28: 启动子 有 6个 TA重复 , 但 *28 突变为 5,7,8个 TA TATA 盒为 6个 TA重复 ,突变后变为 7个 TA重复 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 G
13、CP培训中心 UGT1A1*28 和 UGT1A1*6突变降低 UGT1A1功能 ,降低 SN- 38的葡萄糖醛酸化，使 SN-38蓄积 UGT1A1基因突变功能意义 Yakugaku Zasshi 2008,128(4): 575-584; Pharmacogenetics and Genomics 2007, 17:497504 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心JOURNAL OF CLINICAL ONCOLOGY, 2004(22): 1-7 中 性 粒 细 胞 计 数 UGT1A1*28使发生中性粒细胞减少的危险度明显增加 UGT1A
14、1*28与 伊立替康毒性 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 UGT1A1多态性 与 伊立替康毒性 美国 NIH的遗传药理学研究计划中： N9741项目，收集 524例使用伊立替康 化疗的结直肠癌病人，发现 UGT1A1*28携带者造血系统毒性明显升高 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 118名服用伊立替康 4级粒细胞减少 4级血样便腹泻或脱水 3级水样便腹泻。 12人（ 46%） 为 UGT1A1*28 （纯合子 4人；杂合子 8人） 纯合子严重腹泻的发生率为 70，而 *28突变杂合子和野生型
15、 纯合子中的发生率分别为 33和 17； 92人无 ADRs 13人（ 14%） 为 UGT1A1*28 26人发生严重 ADRs（ 22） UGT1A1多态性 与 伊立替康毒性 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 根据 UGT1A1*28基因型指导伊立替康临床用药 10% 40% 50% 所有相同诊断的病人 10% ADR发生率 7/7 基因型 ADR: 50% 减 量或 换药 7/6 基因型 ADR: 12.5% 减 量或 换药 6/6 基因型 ADR: 0% 常 规剂 量 数据自 CPT 2004 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临
16、床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 UGT1A1*28基因型指导伊立替康用药的药物经济学意义 结论：应用 UGT1A1基因型指导伊立替康临床用药，可以减少医疗开支 Cancer 2009 Sep (1): 3858-3867 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 UGT1A1*6 降低 SN-38代谢，引起严重造血系统毒性 依立替康 p 90-min IV输注 375 mg/m2，每 3周一次 (n = 45). p UGT1A1*6 纯合子： p SN-38血浓度升高 (P = 0.018), p 葡萄苷酸反应降低 (P = 0.006)，
17、胆汁指数升高 p 中性粒细胞计数低 85%； 4级中性粒细胞集落刺激 因子减少发生率为 27% p 严重 4级中性粒细胞减少发生的机率为其他基因型 的 3倍 Jada SR, et al, Cancer Sci 2007; 98: 14611467 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心Pharmacogenetics and Genomics 2007, 17:497504 UGT1A1*6与 伊立替康毒性 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 UGT1A1突变检测临床意义小结 p 伊立替康（ Irin
18、otecan）是经过化学修饰的天然喜树碱的衍生物 ，是一种前药。 p 其活性代谢产物 SN-38在肝细胞内通过葡萄糖醛酸转移酶（ UGT1A1）的作用与葡萄糖醛酸结合，形成 -葡萄糖苷酸 SN-38 （ SN-38G）而丧失抗癌活性。 p UAT1A1*28或 *6突变导致酶活性显著降低，发生致命性腹泻、 严重粒细胞减少的风险显著增高。美国 FDA明确规定 UAT1A1*28（ *6未列入因其仅见于亚洲人）是预测 伊 立替康毒 副反应的独立遗传标记。 p UGT1A1*1/*1野生型纯合子基因携带者发生致命性腹泻、严重 粒细胞减少的风险低于 510%； UGT1A1*28或 *6突变纯合子发
19、生严重毒性反应的风险显著增高为 75%左右，应密切关注。 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 对于 UGT1A1*28/*28、 *6/*6或 *6/*28携带者有三种建议 : 用正常剂量治疗，化疗后予 G-CSF预防血象下降； 减少伊立替康剂量，密切观察疗效； 转用其他化疗方案，不用伊立替康相关方案：在结 肠癌患者中推荐改为 5-FU/亚叶酸钙 /奥沙利铂联合 化疗方案。 用药建议 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 顺铂、奥沙利铂药物疗效预测 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家
20、培训中心 国家 GCP培训中心 药物介绍 铂类化疗药物包含： 奥沙利铂 (oxaliplatin), 顺铂 (Cisplatin),卡铂 (Carboplatin) 等 v 药理作用：直接作用于 DNA，细胞周期非特异性 适应症：化疗谱较广，奥沙利铂用于经氟脲嘧啶治疗失败 后的结直肠癌转移的患者；可单独或联合氟尿嘧啶使用。 v 不良反应：造血系统毒性、消化道毒性、神经毒性等。 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 GSTP1 Ile105Val与化疗病人存活率有关 乳腺癌化疗患者的 5年生存率与 Ile105Val的关系 J Natl Cancer
21、 Inst 2002 Jun; 94 (12): 936-42 Val/Val Ile/Val Ile/Ile 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 结肠直肠癌化疗患者的 2年生存率与 Ile105Val的关系 Cancer Res 2000 Oct; 60 (20): 5621-4 GSTP1 Ile105Val与化疗病人存活率有关 Val/Val Ile/Val Ile/Ile 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 Favourable genotypes: XPD-751(Lys/Lys) ERC
22、C1-118 (C/C) GSTP1-105 (Val/Val) TS-30UTR (+6BP/+6BP) GSTP1 105 Val突变等位基因携带者 ,5FU/奥沙利铂 化疗疗效更好 British Journal of Cancer (2004) 91, 344 354 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 GSTP1突变检测临床意义小结 p 人类谷胱甘肽 S转移酶 P1(GSTP1)是体内最重要的 II相解毒酶 ，在铂类药物的解毒代谢中起重要作用。 p GSTP1(Ile105Val)突变导致酶活性显著降低，降低了化疗药物 的代谢清除率，延
23、长了化疗药物对肿瘤的作用，因此患者化疗 后生存率显著增加， 但应关注药物毒副作用。 有研究报道奥沙 利铂治疗的患者中，发生 3级神经毒性 23%为 Ile105Ile野生型纯 合子， 77%为 105Val突变携带者。 p 经正规治疗的 Val105Val突变纯合子患者晚期结直肠癌患者的 相同时间生存率约为 75%； Val105Val杂合子患者晚期结肠直 肠癌患者的相同时间生存率约为 40%； Ile105Ile野生型纯合子 相同时间生存率仅为 5%。对于非突变纯合子个体要注意定期 复查。 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 TPMT和 COM
24、T突变是铂类药物耳毒性的危险因子 可能的机制是影响甲硫氨酸循环，从而改变细胞内 SAM浓度所致 Nature Genetic 2009,41(12):1345-1350 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 ERCC1表达是铂类化疗疗效的独立预测因子 N Engl J Med 2006,355;10 高表达 ERCC1的疗效差，原理可能是 ERCC1能使铂类作 用产生的 DNA络合物的清除增加 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 根据 ERCC1表达和 RRM1表达选择化疗方案 中南大学临床药理研究所
25、 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 ERCC1基因多态性与铂类化疗疗效的关系 ERCC1 118 CT突变者肿瘤组织高表达 ERCC1，所以奥沙利 铂化疗效果差 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 ERCC1基因多态性与铂类化疗疗效的关系 Clin Cancer Res 2005;11(17) 与上述 相反 ： ERCC1基因 118号外显子 (AAC)到 (AAT)的 突变 携带者，用奥 沙利铂 /5-FU治疗转移性结直肠癌的疗效更 好 。可能与降低 ERCC1表达量或 功能有关 所以： ERCC1表达是铂类化疗疗效预
26、测因子，而 118CT突变尚不可作为预 测因子 因上述不一致情况， ERCC1表达水平是铂类化疗疗效的独立 预测因子。但是，用 ERCC1基因突变来指导用药证据尚不足 ，需要进一步大规模临床试验验证 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 吉西他滨骨髓抑制毒性反应预测 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 吉西他滨 Gemcitabine, Gemzer p 药理作用：属细胞周期特异性抗肿瘤药，主要杀伤 处于 S期 (DNA合成 )的细胞，同时也阻断细胞增殖由 G1向 S期过渡的进程 p 适应症：非小细胞
27、肺癌、胰腺癌、膀胱癌、乳腺癌 及其他实体肿瘤 p 吉西他滨可被肝脏胞苷脱氨酶 (CDA)代谢为无活性代 谢产物 药物简介 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 ENT1 CNT3平衡核苷酸转运体 (ENT1, equilibrative nucleoside transporters) 浓度巷转运蛋白 (CNT3, concentrative nucleoside transporters) 胞苷脱氨酶（ CDA, Cytidine deaminase) 脱氧胞苷酸激酶 (DCK, Deoxycytidine kinase) 脱氧胞苷酸一磷酸脱氨基
28、酶 DCTD , deoxycytidine monophosphate deaminase) 核苷酸还原酶 (RRM1, ribonucleotide reductase M1) 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心Sugiyama E, et al, JOURNAL OF CLINICAL ONCOLOGY 2007;25:32-42 吉西他滨 p 吉西他滨治疗指数小，肝内经胞苷脱氨酶催化代谢。 p CDA基因多态性包括 *3（ 208AG， Ala70Thr），引起酶活性 缺失，使吉西他滨的体内清除率降低， Cmax和 AUC增高。 中南大学
29、临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 CDA *3降低吉西他滨清除率 ,升高其 AUC Ueno H, British Journal of Cancer (2007) 97, 145151 吉西他滨 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心Nucleosides, Nucleotides, and Nucleic Acids, 27:720725, 2008 CDA*3对吉西他滨的药代学影响在各个研究间得到很好的重复 吉西他滨 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 吉
30、西他滨和卡铂 ,顺铂 ,氟尿嘧啶合用时，中性白细胞减少 (III/IV级 )的发生 率在有单倍体 *3 (208GA,Ala70Thr)病人中高于无此突变者 ,AUC显著增 高 (无论单用或合用 ) JOURNAL OF CLINICAL ONCOLOGY 2007;25:32-42; Br J Cancer. 2009 Mar 24;100(6):870-3 CDA*3与吉西他滨毒性关系 242 前列腺癌患者中， 3名出现威胁生命不良反应（骨髓抑制），其 中两名为 CDA*3（ CDA 208GA, Ala70Thr）的突变纯合子，而且体 内吉西他滨清除率明显降低，浓度明显升高。 CDA*3
31、是吉西他滨导致 不良反应的主要因素 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 British Journal of Cancer (2007) 97, 145151 与吉西他滨通路相关的基因多态性在不同种族中的发生频率 吉西他滨 4% 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 CDA突变检测临床意义小结 p 抗肿瘤药物吉西他滨进入人体后转化为三磷酸盐活性产物并整合到 DNA 链中，通过阻断 DNA的合成并抑制核苷酸还原酶发挥抗肿瘤的作用。 p 吉西他滨被肝脏胞苷脱氨基酶 (CDA)迅速代谢为无活性代谢产物。 p
32、 CDA的 2号外显子区存在 208GA(CDA*3,Ala70Thr)突变，导致 CDA对 吉西他滨的脱氨基作用大大降低， CDA*3/*3和 CDA*1/*3体内 CDA的脱 氨基活性分别为 CDA*1/*1活性的 12%和 25%。 CDA*3携带者约占人群 的 8 10%。 p 当 CDA*3/*3和 CDA*1/*3突变携带者联合铂类化疗时，发生骨髓抑制、 3 级或 3级以上粒细胞减少症等不良反应几率增大，需严密关注血相。 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 RRM1与吉西他滨治疗关系 p RRM1 高表达与吉西他滨耐药相关； p 但是
33、 RRM1基因突变与吉西他滨的疗效和毒性的 关系在各研究间不能重复，尚不足以下确切性结论。 Woo Sun Kwona等发现 RRM1 2464GA的突变菌对吉西他滨反应性好 （ Pharmacogenetics and Genomics 16:429438） SUN YOUNG RHA等的实验未能重现，而他们同时还发现突变携带者的血液系 统毒性反应轻。 （ The Oncologist, 2007,12(6):622-630.） 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 5-氟尿嘧啶毒性预测 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中
34、心 国家 GCP培训中心 5-FU p 药理作用：抗代谢类，抑制胸苷合成酶， S期更敏感 p 适应症：抗瘤谱较广，主要用于治疗消化道肿瘤，或较 大剂量氟尿嘧啶治疗绒毛膜上皮癌。亦常用于治疗乳腺 癌、卵巢癌、肺癌、宫颈癌、膀胱癌及皮肤癌等。 p 肿瘤转移患者，以 5-FU为基础的化疗敏感性仅为 22% 药物简介 卡培他滨，替加氟 p 均为前药，代谢为 5-FU后，机制相同。 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 5-FU及其前药的代谢 /效应通路 二氢嘧啶脱氢酶 替加氟 卡培他滨 脱氧胞苷脱氨酶 乳清酸转磷酸核糖酶 尿苷一磷酸激酶 胸苷合成酶 亚甲基
35、四氢叶酸还原酶 MTX 亚叶酸钙 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 o 1p22, 23个外显子，全长 950kb, 开放阅读框 3075bp o 图中所未，绿色为 N-末端 Fe-S簇 ,黄色为 (FAD结合区 ),橙色为 (NAPDH结合区 ), 红色为 (FMN/嘌呤结合区 ),C末端蓝色区为 C 端 Fe-S簇 二氢嘧啶脱氢酶基因 (DPYD) 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 目前已知可使 5-FU毒性增强的 DPYD突变 European Journal of Cancer 40 (
36、2004) 939950 J Hum Genet (2007) 52:804819 *2A 二氢嘧啶脱氢酶基因 (DPYD) 0% 3% 2% 0% 1.5% 0% 0% 27% 0% 0% 1.5% 0% 0% New SNPs found in Japanese: -609CT, -477 TG, - 266 CA, 29CA(Ala10Glu), 325TA (Tyr109Asn), 451AG (Asn151Asp),733AT (Ile245Phe), 793GA (Glu265Lys), 1543GA(Val515Ile), 1572TG (Phe524Leu), 1666AC (
37、Ser556Arg), and 2678AG (Asn893Ser), 2303CA(Thr768Lys) 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 o 直肠癌：肿瘤组织高表达 TS对 5-FU为基础的化疗反 应性差；可作为复发和远处转移的独立预测指标； o 胰腺癌：高表达 TS却与生存期长相关 o 与 TS启动子区 VNTR的多态性关系，报道不一致， 不足以指导用药。 胸苷合成酶 (TYMS) TYMS表达与 5-FU疗效有关，但不同癌症中影响不同 ；而 TYMS突变对 5-FU疗效影响报道不一。 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家
38、培训中心 国家 GCP培训中心 紫杉醇 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 p 紫杉醇治疗卵巢癌、乳腺癌有良好效果，对治疗前列腺癌 、上消化道癌、小细胞性和非小细胞性肺癌前景良好。 p G2晚期和 M期敏感 p 紫杉醇参与微管蛋白的聚合，生成微管相关蛋白 ,使微管 蛋白亚单位的分子量增至 60 76kDa。经紫杉醇作用后的 微管其形态发生改变，不与染色体连接，使细胞表面出现 突起 ;并抑制有丝分裂 紫杉醇 (PAC) 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 紫杉醇 (PAC) P-gp PAC 85%
39、15% 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 MDR1 3435C/T突变个体更易发生周围神经病变， 3435C/T与 2677G/T联合突变者易出现中性粒细胞减少症 3435C/T 3435C/T 42(17): 28932896. MDR1 与紫杉醇 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 携带 MDR1 2677T/A突变的卵巢癌患者紫杉醇疗效更好 Clin Cancer Res. 2006 Feb 1;12(3 Pt 1):854-9. MDR1 与紫杉醇 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所
40、临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 携带 CYP1B1（ Leu432Val）突变的乳腺癌患者，使用紫杉醇 化疗存活率更低 ,与激素代谢有关，不可推及其他癌症患者。 Pharmacogenomics J. 2007 Jan 16. CYP1B1 与紫杉醇 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 表柔比星 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 表柔比星与 NQO1 Nature Genetics. 2008 40(7):844-853. 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心
41、国家 GCP培训中心 不表达 P53疗效好， NQO1突变纯合子疗效差 Nature Genetics. 2008 40(7):844-853. 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 检测方法 o 突变： PCR-pyrosequencing 优点：具有高灵敏度、准确性及高通量、操作简便等特性。 该方法可计算突变基因在基因组中比例，特别适用于组织标 本。 o mRNA及蛋白： illuminx（液相芯片） 优点：具有高灵敏度、准确性及高通量、操作简便等特性。 中南大学临床药理研究所 湘雅医学检验所 临床药理国家培训中心 国家 GCP培训中心 Thank you!
