1、沭阳县人民医院检验科 临床检验室 脑脊液（CSF）常规检查 文件编号：Q-1 版本：第一版 页号/总页数：1/4 脑脊液（CSF）常规检查 1 检验目的 脑脊液常规检查对许多神经系统疾病及某些神经系统并发症的诊断、鉴别诊 断、疗效观察及预后判断具有参考价值。 2 检测原理 一般性状检查采用目测法；蛋白定性试验采用 Pandy 原理(脑脊液中的球蛋 白与苯酚结合，可形成不溶性蛋白盐而下沉产生白色混浊或沉淀)；细胞学检查 采用显微镜检查法。 3 标本 3.1 脑脊液标本由临床医生进行腰椎穿刺采集，必要时可从小脑延脑池或侧 脑室穿刺获得。第一管作细菌学检查，第二管作化学或免疫学检查，第三管作常 规检
2、查。 3.2 标本采集后要立即送到检验科化验室（根据检验目的的不同分送不同的 检验室） ，一般不能超过 2 小时，因为放置时间过久，其性质可能发生改变，影 响检验结果。采集的脑脊液标本应尽量避免凝固和混入血液。 4 设备和试剂 4.1 仪器：OLYMPUS 公司的 CH-2 显微镜。 4.2 试剂：5%苯酚溶液；冰醋酸。 4.3 设备：Vetri-plast 一次性计数板(Cod. 211710)。 5 操作步骤 5.1 一般性状检查观察脑脊液的颜色和透明度。 5.2 潘氏(Pandy)定性试验 5.2.1 取 5%苯酚溶液 23ml 置于小试管内，用毛细管滴管滴入脑脊液 12 滴，衬以黑背景
3、，立即观察结果。 5.2.2 结果判断：阴性：清晰透明，不显雾状；弱阳性：微呈白雾状，在黑 色背景下才能看到；阳性：有明显白色浑浊或浓絮状沉淀；强阳性：有白色絮状 物凝块。 5.3 细胞计数 沭阳县人民医院检验科 临床检验室 脑脊液（CSF）常规检查 文件编号：Q-1 版本：第一版 页号/总页数：2/4 5.3.1 细胞总数 对澄清的脑脊液混匀后用滴管直接滴入一次性计数板，用低倍镜计数全部方 格内细胞数；混浊或带血的脑脊液可用细胞稀释液或者生理盐水稀释混匀后滴入 一次性计数板内，用低倍镜计数全部方格内细胞数。 5.3.2 白细胞计数 小试管内放入冰乙酸 12 滴，转动试管使内壁粘有冰乙酸后倾之
4、，然后滴 加混匀的脑脊液 34 滴，数分钟后，混匀充入一次性计数池内，用低倍镜计数 全部方格内白细胞数。 5.3.3 白细胞分类计数 直接分类法：如果白细胞数每微升不超过 20，可不分类计数；如超过 20 应 分类计数。在高倍镜下根据细胞核的形态分别计数单核细胞(包括淋巴细胞和单 核细胞)与多核细胞，计数 100 个白细胞，以百分率表示。 染色分类法：如直接分类不易区分细胞时，可将脑脊液沉淀，取沉淀物 2 滴， 推片制成均匀薄膜，置室温或 37温箱内待干，进行瑞氏染色用油镜分类。如见 有不能分类的细胞，应另行描述报告，如脑膜白血病或肿瘤时。 6 干扰因素 标本送检必须及时，收到标本后应立即检验
5、，以免脑脊液凝固或细胞破坏使 结果不准确。标本必须混匀后方可充池，否则影响计数结果。 因穿刺损伤血管，引起血性脑脊液，白细胞计数结果必须校正，以剔除因出 血而带来的白细胞。 细胞计数时应注意新型隐球菌与白细胞、红细胞区别，新型隐球菌不溶于乙 酸，加优质黑汁后可见不着色荚膜。白细胞也不溶于乙酸，加酸后白细胞核和胞 质更为明显，红细胞加乙酸溶解。 白细胞计数直接数的试管或吸管中的冰乙酸要尽量去尽，否则结果偏低。若 标本陈旧、细胞变形时，白细胞直接分类法误差太大，推荐用涂片染色分类法分 类计数。涂片染色分类法计数时，离心速度不能太快，否则细胞形态受影响，有 条件的单位可用玻片离心沉淀法、细胞室沉淀法
6、等收集细胞。涂片固定时间不能 太长，更不能高温固定，以免细胞皱缩。 脑脊液蛋白定性试验时，苯酚不纯可引起假阳性，室温低于 10苯酚饱和度 降低可引起假阴性。 沭阳县人民医院检验科 临床检验室 脑脊液（CSF）常规检查 文件编号：Q-1 版本：第一版 页号/总页数：3/4 7 计算 全部方格内的细胞总数 脑脊液细胞数(10 6/L) = - 10 9 8 生物参考值区间 正常人脑脊液为无色透明；蛋白定性试验为阴性；细胞计数无红细胞，仅有 少量白细胞，成人：(08)10 6/L；儿童：(015)10 6/L；婴儿：(020) 106/L。 9 实验室解释 9.1 正常人脑脊液为无色透明；红色见于脑
7、出血、蛛网膜下腔出血、出血性 脑膜炎、穿刺性损伤。黄色见于陈旧性出血、脑肿瘤、重症黄疸或胡萝卜素血症。 白色米汤样见于化脓性脑膜炎；白色毛玻璃样见于结核性或真菌性脑膜炎。绿色 见于绿脓杆菌、肺炎链球菌、甲型链球菌引起的脑膜炎。褐色或黑色见于中枢神 经系统黑色素细胞瘤。 9.2 脑脊液蛋白定性阳性见于：中枢神经系统炎症，以化脓性脑膜炎增高为 显著，结核性脑膜炎次之，病毒性脑膜炎轻度增高。脑出血时多呈强阳性反应； 脑室或蛛网膜下腔出血；脑部肿瘤；其它疾病：如肺炎、尿毒症及中枢神经中毒 症状等。 9.3 细胞计数增高见于 细菌性脑膜炎：细胞总数可显著升高，以中性粒细 胞为主。结核性脑膜炎：细胞总数可
8、升高，一般情况下不超过 500106/L，在起 病初期，以中性粒细胞增高为主，但很快下降；后期以淋巴细胞为主；中性粒细 胞、淋巴细胞及浆细胞同时存在是结核性脑膜炎的特点。病毒性脑膜炎：细胞总 数轻度升高，以淋巴细胞为主。其中流行性乙型脑炎以中性粒细胞为主。真菌性 脑膜炎：细胞总数可轻度升高，早期以中性粒细胞增高为主，后期以淋巴细胞为 主。寄生虫脑病：可见较多的嗜酸性粒细胞。中枢神经系统肿瘤：细胞总数可正 常或轻度增高，以淋巴细胞为主，有时可见肿瘤细胞。脑室及蛛网膜下腔出血及 出血性脑炎，可出现均匀性的血性脑脊液，除血细胞大量增加外，在脑脊液中也 出现周围血中的各种血细胞，其中大多以中性粒细胞为主。 10 异常结果处理 脑脊液常规试验结果异常需与临床诊断相符合，不符合的结果应复查。 11 报告时间与标本保存 沭阳县人民医院检验科 临床检验室 脑脊液（CSF）常规检查 文件编号：Q-1 版本：第一版 页号/总页数：4/4 11.1 脑脊液常规试验 4 小时出结果；病房患者的检验结果报告单在 24 小时 内发回科室。 11.2 脑脊液常规试验检查过的标本应放 28冰箱保存 24 小时。 12 操作性能 本试验是一个定性试验，目前还没有试验性能指标。 编写人 审核人 生效日期 2011 年 11 月 15 日
