1、烹饪蔬菜在不同保存条件下的亚硝酸盐含量变化1、 实验原理蔬菜样品经磨碎后,样品中的亚硝酸盐可被饱和硼砂溶液提取至溶液中;弱酸性条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应生成重氮盐,再与盐酸萘乙二胺偶合成红色染料,于538nm处测定吸光度,亚硝酸盐含量与溶液吸光度成正比。2、 仪器和试剂仪器1、 分光光度计2、 分析天平3、 搅拌机4、 振荡机5、 电热恒温水浴锅6、 烧杯、移液管、容量瓶等试剂1、 饱和硼砂溶液(50g/L)称取10.0g硼酸钠(Na2B4O710H2O),溶于200mL热水,冷却后备用;2、 亚铁氰化钾溶液(0.25mol/L)称取26.5g亚铁氰化钾(K4Fe(CN)63H2O),
2、溶于水,定容至250mL;3、乙酸锌溶液(1mol/L)称取55.0g乙酸锌(Zn(CH3COO)22H2O)加7.5mL冰醋酸(CH3COOH)4、 对氨基苯磺酸(0.4%)称取0.4对氨基苯磺酸(C6H7NO3S),溶于100 mL 20 %(体积比)盐酸中,置棕色瓶中混匀,避光保存。5、 盐酸萘乙胺溶液(0.2%)称取0.2 g 盐酸萘乙二胺(C12H14N22HCl),溶于100 mL 水中, 混匀后,置棕色瓶中,避光保存。6、 亚硝酸钠标准储备液(200 g /mL)称取0.1000于110120干燥恒重的亚硝酸钠(预先在干燥器中放置24h以上),加水溶解移入 500 mL 容量瓶中
3、,加水稀释至刻度,混匀,储于棕色瓶,冰箱中保存。7、 亚硝酸钠标准使用液(10g /mL)吸取储备液5.00mL于100mL容量瓶中,定容,临用时配制。8、 粉末状活性炭。3、 测定步骤1、 样品前处理烹煮后的白菜暴露在空气中冷却30分钟,模拟一般家庭进食情况,随后把样品分成3分。对照组暴露在空气中常温保存;实验组A置于冰箱中4下保存;实验组B用保鲜膜密封于常温下保存。每隔两小时取各组样品,先用滤纸尽量吸干水分,粗称约20g,切碎,用搅拌机制成匀浆备用。2、样品中亚硝酸盐的提取称取上述匀浆约10g,放入200ml烧杯中,加5ml饱和硼砂溶液和100ml热蒸馏水(70左右),在振荡机上振荡十分钟
4、,然后置沸水浴中加热30min并不断摇动,取出冷却,加入5ml亚铁氰化钾溶液和5ml乙酸锌溶液和1.0g活性炭粉,每次加后均充分摇匀。然后,转入250ml容量瓶中,用水定容。放置5-10min后过滤,弃去初滤液,收集约50ml无色清亮提取液备用。同时做空白试验。3、标准曲线的绘制 吸取亚硝酸钠标准使用液(10g /mL)0.00,0.20,0.50,1.0,1.5,2.0,3.0,4.0ml于100mL比色管中,各加水至30ml,然后各加入0.4%对氨苯磺酸3mL,混匀,静置3-5min后各加入0.2%盐酸萘乙二胺溶液2mL,加水至刻度线,混匀,得到亚硝基浓度梯度为0.00,0.02,0.05,0.10,0.15,0.20,0.30,0.40g /mL的标准溶液。静置15min,在分光光度计上于538nm处测其吸光度并绘制出标准曲线。4、样品测定吸取提取液于50mL比色管中,定容至25mL,按绘制标准曲线的同样方法操作。4、 数据处理 亚硝酸盐含量(亚硝基,g/g)=C*250/mC:从标准曲线查得的亚硝基浓度(g /mL)m:精确称取的匀浆样品质量