1、实验六 反射时测定和反射弧分析一、实验目的1、学习测定反射时的方法;2、分析反射弧的组成,并探讨反射弧的完整性与反射活动的关系。二、实验原理反射是指在中枢神经系统参与下的机体对内外环境刺激的规律性应答。 反射活动的结构基础是反射弧。典型的反射弧由感受器、传入神经、神经中枢、传出神经和效应器5个部分组成。一旦其中任何一个环节的解剖结构和生理完整性受到破坏反射活动就无法实现。在反射活动中由于神经元特别是中间神经元联系方式的不同使反射活动表现出种种特征。反射时是指从机体接受刺激到机体出现反应的时间。下面是几个常见的概念: 屈反射:后肢、足的皮肤受到刺激同侧的肢会产生屈曲反射。 对应的反射弧:趾部皮肤
2、(感受器)坐骨神经(传入神经)脊髓(神经中枢)坐骨神经(传出神经)后肢肌肉(效应器) 抓反射:背、腹部的皮肤受到刺激时可引起后肢举起而对受刺激部位挠抓的动作。 对应的反射弧:背或腹部皮肤(感受器)脊神经(传入神经)脊髓(神经中枢)坐骨神经(传出神经)后肢肌肉(效应器)脊休克:脊髓失去上位中枢的控制,在刚开始的一段时间内对外界的刺激不能产生反应。越高级的动物脊休克时间越长。如蛙脊休克的时间一般是510分钟。三、动物与主要器材1、实验动物:青蛙2、实验器材:常用手术器械、支架、蛙嘴夹、蛙板、烧杯、培养皿、小滤纸片、棉花、蜡纸片、吸水纸、秒表、0.5及1硫酸溶液、2普鲁卡因、任氏液四、步骤与方法(一
3、)反射时的测定1、取一只青蛙,毁脑,制备成脊蛙;2、用蛙嘴夹夹住脊蟾蜍下颌,悬挂于支架上 。测定后肢最长趾的屈反射时:将蛙后肢的最长趾浸入0.5硫酸溶液中23mm,开始计时。当出现屈反射时,则停止计时,此为屈反射时。(浸入时间最长不超过10秒!)停止计时后, 立即用清水冲洗受刺激的皮肤并用纱布擦干。 重复测定屈反射时3次,求均值。(相邻两次刺激至少要间隔23分钟) 3、取一浸有1硫酸溶液的滤纸片,贴于青蛙右侧背部或腹部,记录抓反射的反射时。下肢抬起,即为产生了抓反射。不要等到动物将滤纸抓掉才记录反射时。测三次,求均值。(二)、反射弧分析1.毁脑,测左、右两后肢最长趾屈反射时2.去除感受器实验:
4、环剪右后肢最长趾基部,去趾上皮肤后测屈反射3.对照没去除感受器实验:测右后肢其他趾屈反射4.测右侧背抓反射(1硫酸)5、麻醉坐骨神经:腹部向下,剪开右侧大腿皮肤,分开坐骨神经沟,分离出坐骨神经,垫上蜡纸片;用一细棉条包住分离出的坐骨神经,在细棉条上滴几滴普鲁卡因后,每隔2min重复步骤3(加药立即开始计时)。6、当屈反射刚刚不能出现时(记录时间),立即测抓反射。之后每隔2min重复一次步骤4,直到抓反射不再出现为止(记录时间)。记录加药至屈反射消失的时间、加药至抓反射消失。7、将左侧后肢最长趾再次浸入0.5%硫酸溶液中(条件不变),记录反射时有无变化。8、毁坏脊髓后再重复7,记录结果。五、实验
5、结果(一)反射时测定第一次第二次第三次平均值屈反射(单位:s)2.92.82.82.83抓反射(单位:s)2.32.32.32.3(二)反射弧分析实验项目实验现象记录测左、右两后肢最长趾屈反射时左:2.0s右:2.9s环剪右后肢最长趾基部,去趾上皮肤后测屈反射无屈反射测右后肢其他趾屈反射有,反射时2.8s测右侧背抓反射(1硫酸)2.4s右侧坐骨神经滴几滴普鲁卡因后,每隔2min重复步骤3(加药立即开始计时),记录每次重复反射时的变化加药8分钟后,屈反射消失时间2min4min6min反射时4.53s4.3s3.83s当屈反射刚刚不能出现时(记录时间),立即测抓反射。之后每隔2min重复一次步骤
6、4,记录每次重复反射时的变化加药22分钟后,抓反射消失 时间10min12min14min16min18min20min反射时2.837.531.42.531.530.83测左后肢最长趾屈反射,记录反射时反射时2.23s,与步骤1相比无明显差异毁坏脊髓,重复步骤7,无屈反射六、分析与讨论:以实验结果为根据,以严密的逻辑推理方式说明反射弧的几个组成部分。分析:典型的反射弧由感受器、传入神经、神经中枢、传出神经和效应器5个部分组成。一旦其中任何一个环节的解剖结构和生理完整性受到破坏反射活动就无法实现。1、用0.5%的硫酸分别刺激青蛙左、右后肢最长趾,发生屈反射,说明此时的反射弧是完整的。2、环剪右
7、后肢最长趾基部,去趾上皮肤(即感受器)后测屈反射,无屈反射出现,说明由于去感受器后反射弧不完整,屈反射无法发生。3、用0.5%硫酸刺激青蛙右后肢其他趾,发生屈反射,说明其他趾的反射弧完整,同时也验证了感受器是反射弧不可或缺的一部分,缺少感受器,反射不能发生。4、用1%硫酸刺激青蛙右侧背部或腹部,发生抓发射,说明此时反射弧是完整的,可以进行完整的反射活动。5、右侧坐骨神经滴加普鲁卡因(神经麻醉剂),加药后6分钟内仍可发生屈反射,加药8分钟后屈反射消失。普鲁卡因是一种神经麻醉剂,对传入、传出神经均有麻醉作用。坐骨神经既是屈反射的传入神经,又是传出神经,有粗细之分,细的神经先被麻醉,粗的神经后被麻醉
8、,所以加药后的一段时间内仍可发生屈反射,当坐骨神经完全被麻醉时,屈反射消失。由此可说明传入神经和传出神经均是完整的反射弧的一部分。6、屈反射不能出现时每隔2min重复步骤4,实验发现,加药后20分钟内仍可发生抓反射,加药22分钟后抓反射消失。抓反射的传入神经是脊神经,传出神经是坐骨神经,加药22分钟后抓反射消失,说明传出神经是反射弧的一部分。而屈反射现象比抓反射现象先消失,这是因为屈反射的传入神经为坐骨神经,而抓反射的传入神经为脊神经,此外,髓鞘在不同的神经中,厚度也不同。传入神经较薄,传出神经较厚,普鲁卡因透入传入神经较快,透入传出神经则较慢,因此屈反射较抓反射先消失。 7、毁脊髓后,再对青蛙进行刺激,青蛙对刺激都无任何反应,说明脊髓是反射弧的组成部分。脊髓是低级的神经中枢,毁髓后,传出神经后的反射无法完成,无法形成一个完整的反射弧。七、注意事项1、实验顺序,各个步骤不能颠倒,因为会造成不可逆的伤害。2、每次刺激时,足趾浸入硫酸中的面积应相同;抓反射尽量用同一片小滤纸,以保证相同的刺激强度。3、每次刺激后,应立即清洗、擦干,以免影响硫酸的浓度。4、剥掉趾部皮肤时,一定注意趾尖不要残留皮肤,否则,刺激仍能引起反射。5、实验安全:稀硫酸具有一定的腐蚀性,实验过程中尽量避免沾到皮肤、衣服,如果不小心沾上要立刻用清水冲洗。