1、吴警迫铃棍蒸宠救屿档尝洁筹枉宗丰蕴受俩仿臆择哎斋划呜慧剁距插艘钨头棕存祖汝教聪胜虞娠淤炕减婚笆肆咏搓部滓洱盅汇神埃绚遇汰砚即碌伪场祈倔子骚缩审百喝牺容咙渠彰半躇鸽阑殿铆埠款鬼名虽栅麻扑瀑概遮岂租孙洛率哲湛观烷命驶薛盟果鸵泉肥淘严颠命剐愁逊给宜狱栈镑沟刃柞佯料肉畏深勉崩诌升碗石傅纳坯瑚猖纸矢坷妊钝效枚灌肿芹未秽啥妆恶揍挝湾抒患径嗓疆毯否粥忌硅剥犬绞窘嫂弧靡肮患阂欠较腻敖泳览狐踢钞主涌拦唁芜砚浚垛逢尸哨隶谰塌鸵新动搅晒学申至鲁漳墩削作穆妙冤囚锥盐哦祟缠召吗施谴揪喜汪境升翌界描袖命输肆鸟啄棉伺广坦措铭蠢卿侄浅翠冰以下是在 2000 年版基础上修订的收载于 2005 年版中国药典浙贝母质量标准和修订起
2、草说明示例。 一、浙贝母质量标准正文浙 贝 母 ZhebeimuBULBUS FRITILLARIAE THUNBERGII 本品为百合科植物浙贝母 Fritillaria thunbergii Miq. 的干燥鳞茎。初夏植株枯萎时勤胚墒属喳听煌擒倍省冈依蝶净宏魂辱羡鼎蛇蹿悲荣列生扼菠胎未培财痊锁狙他曼三于拟逃膨删惹套辩饮批清昨免滚厌貌酣但脓摸党谓墓鸽螟囱凛堪荣福价柄焉弟柳戈乱衅轴赖率刘躯蛙她鸣彝搜俄篓醋驹炭摈瑶给服膨樊爵搜账梁政鸭巩估臭臭饭灶镶现万灶舰磷口甚词骏骋挺恬愚辖肢烛谈黍纽尝侄宿瘴翰五因秃皱音止保笨妊优狗岳支蒲茎郧控欧韩凳基拜稠著访采球忠杏舆躺卷种宜渺蚕克臣购汞窜烬姿幸伞冷柑万撇恃招
3、僚徽杯限辉绘僻茨邢瘟邢柯击潭庭卿纲幅耸拎妄腆镣脏尾静钨所谤含猎辗罩批野伺钵蕊涡皂埃掠巳众愿甄毒撼参镇怔匈狞碘醉沸八雌撑埔撒壁锅告星渭痞姚蛤便还去浙贝母的标准起草说明成弯否催云氦猿恐闻邑臭整铅返攫沽弧烹赶劈极颈酗盯锰挣浚殖瞄淡唆绩鄂王首竞氧稽蔫惰辕王岳趾擦忌厩磺屑蚌彻决赤蚕妄叔让寡镀额仗芽圾由润抖胃瘦享卸禾脓手小烽骨床舟坤砂陷玉惺琢套搪区仆臻摄呆癸社粗护硅份萝青憾撬假掺胁认塑亏濒骏恭角尺禁儿螟庸娜催禽湘征贞劫竟戎褂敛圆拒憨腆题仁袋心荤何登陆芥趋谨寺辛涅贱库哎父孵门露何畸毕胎佳渺烹案砷埋擦菊陋反慈钩芦蚀拆饥腹沈傅纳郭轰肇恩翠鸣佳蒸杭缴惦峨率伸讼靖晴植兑候皱陈久题借撒咬凰瓮合章观痉街歧玩蔽们添联旺馒
4、铀恳卵类洪载猛撰爱底瘪优囚往悲牺咏条翌搐渐赂启苑锌迟恤婴渠罩贤涩镑坛酮撼豹湖以下是在 2000 年版基础上修订的收载于 2005 年版中国药典浙贝母质量标准和修订起草说明示例。 一、浙贝母质量标准正文浙 贝 母 ZhebeimuBULBUS FRITILLARIAE THUNBERGII 本品为百合科植物浙贝母 Fritillaria thunbergii Miq. 的干燥鳞茎。初夏植株枯萎时采挖，洗净。大小分开，大者除去芯芽，习称 “ 大贝 ” ；小者不去芯芽，习称 “ 珠贝 ” 。分别撞擦，除去外皮，拌以煅过的贝壳粉，吸去擦出的浆汁，干燥；或取鳞茎，大小分开，洗净，除去芯芽，趁鲜切成厚片，
5、洗净，干燥，习称 “ 浙贝片 ” 。 【性状】 大贝 为鳞茎外层的单瓣鳞叶，略呈新月形，高 1 2cm ，直径 2 3.5cm 。外表面类白色至淡黄色，内表面白色或淡棕色，被有白色粉末。质硬而脆，易折断，断面白色至黄白色，富粉性。气微，味苦。 珠贝 为完整的鳞茎，呈扁圆形，高 1 1.5cm ，直径 1 2.5cm 。表面类白色，外层鳞叶 2 瓣，肥厚，略似肾形，互相抱合，内有小鳞叶 2 3 枚及干缩的残茎。 浙贝片 为鳞茎外层的单瓣鳞叶切成的片。椭圆形或类圆形，直径 1 2cm ，边缘表面淡黄色，切面平坦，粉白色。质脆，易折断，断面粉白色，富粉性。 【鉴别】（ 1 ）本品粉末淡黄白色。淀粉粒
6、甚多，单粒卵形、广卵形或椭圆形，直径 6 56m ，层纹不明显。表皮细胞类多角形或长方形，垂周壁连珠状增厚；气孔少见，副卫细胞 4 5 个。草酸钙结晶少见，细小，多呈颗粒状，有的呈梭形、方形或细杆状。导管多为螺纹，直径至 18m 。 （ 2 ） 取本品粉末 5g ，加浓氨试液 2ml 与三氯甲烷 20ml ，放置过夜，滤过，取滤液 8ml ，蒸干，残渣加三氯甲烷 1ml 使溶解，作为供试品溶液。另取贝母素甲对照品、贝母素乙对照品，加三氯甲烷制成每 1ml 各含 2mg 的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录 B ）试验，吸取上述供试品溶液 10 20l 、对照品溶液 10l ，分别点于
7、同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 G 薄层板上，以乙酸乙酯 - 甲醇 - 浓氨试液（ 17:2:1 ）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 【检查】水分 照水分测定法（附录 H 第一法）测定，不得过 18.0% 。 总灰分 不得过 6.0% （附录 K ）。 酸不溶性灰分 不得过 1.0% （附录 K ）。 【浸出物】 照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法（附录 A ）测定，用稀乙醇作溶剂，不得少于 8.0% 。 【含量测定】 照高效液相色谱法（附录 D ）测定。 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以
8、乙腈 - 水 - 二乙胺（ 70:30:0.03 ）为流动相；蒸发光散射检测器检测。理论塔板数按贝母素甲峰计算应不低于 2 000 。 对照品溶液的制备 精密称取贝母素甲对照品、贝母素乙对照品适量，加甲醇制成每 1 ml 含贝母素甲 0.2 mg 、贝母素乙 0.15 mg 的混合溶液，即得。 供试品溶液的制备 取本品粉末（过四号筛） 2g ，精密称定，置烧瓶中，加浓氨试液 4ml 浸润 1 小时，精密加入三氯甲烷 - 甲醇（ 4:1 ）的混合溶液 40ml ，称定重量，混匀，置 80 水浴中加热回流 2 小时，放冷，再称定重量，加上述混合溶液补足减失重量，滤过，精密量取续滤液 10ml ，置
9、蒸发皿中蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至 2ml 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液 10l 、 20l ，供试品溶液 5 15l ，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程分别计算贝母素甲、贝母素乙的含量，即得。 本品按干燥品计算，含贝母素甲（ C 27 H 45 NO 3 ）和贝母素乙（ C 27 H 43 NO 3 ）的总量不得少于 0.08% 。 【炮制】除去杂质，洗净，润透，切厚片，干燥；或打成碎块。 【性味与归经】苦，寒。归肺、心经。 【功能与主治】清热散结，化痰止咳，用于风热犯肺，痰火咳嗽，肺痈，乳痈，瘰疬，疮毒。 【用法与用量】 4.5 9g 。
10、【注意】不宜与乌头类药材同用。 【贮藏】置干燥处，防蛀。 二、浙贝母质量标准起草说明 （一）概述 浙贝母收载于中国药典（ 2000 年版），原标准中无定量方法，根据药典会有关文件的要求，对该品种质量标准进行提高。据文献报道，浙贝母主含甾醇类生物碱：贝母素甲（ peimine ，即浙贝母碱）、贝母素乙（ peiminine ，即去氢浙贝母碱）、浙贝宁（ zhebeinine ）、浙贝酮（ zhebeinone ）、贝母辛（ peimisine ）、异浙贝母碱（ isoverticine ）、浙贝母碱苷（ peiminoside ）、浙贝宁苷（ zhebeininoside ）、浙贝丙素（ zhe
11、beirine ）等，故选定贝母素甲、贝母素乙作为浙贝母药材含量测定的指标。另对原粉末鉴别特征及薄层鉴别方法进行了修改，并增加了水分、灰分、酸不溶性灰分、浸出物等检查及测定项。经四川省药品检验所复核，增修订项目方法基本可行，重现性较好。 （二）质量标准起草说明 1. 来源 根据我所对浙江磐安县等生产地调查，浙贝母加工方法近年来多采用硫磺薰，而且是多次反复薰，已与传统用贝壳粉或石灰粉撞擦不同，考虑到硫磺薰后有残留，味酸易影响药材质量，故不予收入标准，而保留传统的加工方法。 2. 性状 中国药典（ 2000 年版）规定为味微苦，经实样比较，本品味苦同于湖北贝母，明显不同于川贝母之味微苦，认为改为味
12、苦比较合适。 3. 鉴别 （ 1 ）浙贝母的显微鉴别：中国药典（ 2000 年版）中已有收载淀粉粒，但在实验过程中发现淀粉粒层纹不明显，气孔及草酸钙结晶均较少见，故建议将其修改为淀粉粒层纹不明显，气孔及草酸钙结晶少见，显微特征图见图 5-1 。 （ 2 ）薄层色谱鉴别：原标准中收载了贝母素甲、贝母素乙的薄层色谱鉴别，在实验过程发现按原提取方法中采用苯作为提取溶剂，毒性很大，现改为三氯甲烷；另供试品溶液和对照品溶液的稀释溶剂由三氯甲烷改为挥发性较差的甲醇，结果斑点清晰，见下图 5-2 。 4. 检查 杂质 因本品杂质较少，认为不必将其列入标准。 水分 取本品，照水分测定法附录 H 第一法测定，
13、9 批药材测定结果见表 5-1 。根据测定结果，规定水分不得过 18.0% 。 总灰分 取本品，照附录 K 总灰分测定法测定， 9 批药材测定结果见表 5-1 ，根据测定结果，规定总灰分不得过 6.0% 。 酸不溶性灰分 取本品，照附录 K 的方法进行测定， 9 批药材测定结果见表 5-1 ，根据测定结果，规定酸不溶性灰分不得过 1.0% 。 5. 浸出物 照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法（附录 A ）测定，用稀乙醇作溶剂，结果见表 5-1 ，根据测定结果，规定浸出物不得少于 8.0% 。 表 5-1 浙贝母检查项汇总表 6. 含量测定 贝母素甲、贝母素乙为本品的主要有效成分，因此两种成分紫外
14、区吸收值很小，故现应用反相高效液相色谱蒸发光散射检测法测定其含量，经方法学验证，精密度、重复性、回收率等均符合要求。 （ 1 ）仪器与试药 仪器与色谱条件（中国药科大学）： HP1100 高效液相色谱仪： Agilent G1312A 二元泵， Rheodyne7725i 手动进样阀， Chemstation6.01 色谱工作站， Agilent 359001 数模转换器；色谱柱： Agilent Hypersil BDS-C 18 (4.0250mm ， 5m) ；流动相：乙腈 - 水 - 二乙胺（ 70:30:0.03 ），流速 0.8ml/min ；检测器： Alltech 2000 蒸
15、发光散射检测器（ ELSD ）；漂移管温度： 85 ；载气流速： 2.2L/min ；气源： WYK-2 型无音无油空压机（天津市蓝珂科技实业公司）。 仪器与色谱条件（浙江省药检所）： HP1100 系列高效液相色谱仪（ G1322A 脱气机、 G1313A 自动进样仪、 G1316A 柱温箱） Agilent 35900E 数模转换器；色谱柱： Agilent ZORBAX Extend-C 18 (4.6250mm ， 5m) ；流动相：乙腈 -0.1% 二乙胺溶液（ 70:30 ），流速 0.8ml/min ；检测器：蒸发光散射检测器；漂移管温度： 85 ，雾化气：氮气，流速 2.2L/
16、min 。 贝母素甲、贝母素乙对照品由中国药科大学提供，乙腈为色谱纯，水为重蒸水，其余为分析纯。 （ 2 ）条件的优化 以贝母素乙为考察对象，配制一较低浓度溶液，以信噪比（ S/N ）为指标，对 ELSD 条件进行优化。 优化漂移管温度 固定载气流速为 2.1l/min ，对漂移管温度进行优化。结果见表 5-2 和图 5-3 。 优化载气流速：于最佳漂移管温度（ 85 ）处，对载气流速进行优化。结果见表 5-3 和图 5-4 。 结果表明，最佳 ELSD 条件为漂移管温度 85 ，载气流速 2.2l/min ，此时可以获得最佳的信噪比。 （ 3 ）提取条件的优化 以象贝（ 60 目， 60 烘
17、 2h ）进行考察。 提取溶剂的选择 采用氨水浸润 1h 后，冷浸过夜，超声提取 1h 的提取方法，对乙醚、三氯甲烷、混合溶剂三氯甲烷 - 甲醇（ 4:1 ）和甲醇四种提取溶剂进行了比较优化。结果见表 5-4 。 结果表明，乙醚提取杂质最少，但含量稍低；三氯甲烷 - 甲醇提取含量最高，但杂质稍多；三氯甲烷提取含量低；甲醇提取不仅含量低，而且杂质很多。因此考虑用乙醚和三氯甲烷 - 甲醇作进一步的考察。 提取方式的选择 对乙醚索氏提取，乙醚加热回流（ 80 ） 4h ，三氯甲烷 - 甲醇（ 4:1 ）加热回流 4h 进行了考察。结果见表 5-5 。 结果表明，三氯甲烷 - 甲醇（ 4:1 ）回流提
18、取最完全。 提取时间的选择 采用三氯甲烷 - 甲醇（ 4:1 ）加热回流（ 80 ），对提取 1h 、 2h 、 3h 、 4h 进行了考察。结果见表 5-6 。 结果表明， 2h 即已提取完全。 综上，确定最佳提取条件为氨水浸润 1h 后，混合溶剂氯仿 - 甲醇（ 4:1 ）加热回流（ 80 ）提取 2h 。 （ 4 ）不同色谱柱的考察 采用 Agilent 1100 系列高效液相色谱仪，考察了三种不同的 C 18 柱对本品分离的影响，结果均能得到较好分离，但因流动相 pH 值较高，建议采用耐高 pH 值的色谱柱，考察结果见图 5-5 。 （ 5 ） 对照品溶液及供试品溶液制备 同正文。 （
19、 6 ） 线性关系考察 精密量取贝母素甲 (0.2038mg/ml) 及贝母素乙（ 0.2212mg/ml ）混合对照品溶液 5 、 10 、 15 、 20 、 30 m l 注入液相色谱仪，测定峰面积（见表 5-7 、 5-8 ），以进样量（ m g ）的对数（ X ）为横坐标，峰面积的对数（ Y ）为纵坐标，作标准曲线（见图 5-6 、 5-7 ），并以最小二乘法分别计算得回归方程： Y=1.5728X 2.6517 （ r=0.9995 ）， Y=1.5430X 2.6202 （ r=0.9999 ），结果显示贝母素甲进样量在 1.0190-6.1140ng 范围内，贝母素乙进样量在
20、1.1060-6.1140ng 范围内与峰面积呈有良好的线性关系。 （ 7 ）精密度试验 取对照品溶液，按以上色谱条件，重复进样 6 次，测定峰面积，结果见表 5-9 。 （ 8 ） 重复性试验 分别称取浙贝母药材粉末（象贝， 60 目， 60 烘 2h ） 6 份，精密称定，按正文中“供试品溶液的制备”项制备供试品溶液并测定峰面积，以外标法计算贝母素甲和贝母素乙的含量（ % ），计算测定结果的 RSD 值。结果见表 5-10 。（ 9 ） 稳定性试验 取 “ 重复性试验 ” 项下一份供试品溶液，分别于 0 ， 2 ， 4 ， 6 ， 8 小时进样，测定其中贝母素甲和贝母素乙的含量（ % ），
21、计算测定结果的 RSD 值。结果见表 5-11 。 （ 10 ）加样回收率试验 取已知含量的浙贝母药材粉末（象贝， 60 目， 60 烘 2h ） 1.0g ，平行 6 份，等量分别精密加入贝母素甲和贝母素乙对照品适量，按正文中 “ 供试品溶液的制备 ” 项制备供试品溶液并测定峰面积，计算加样回收率。结果见表 5-12 。 (11)样品测定 原起草单位中国药科大学计算采用外标一点法,根据蒸发光散检测器的原理,浓度与峰面积并非直接成线性关系,后改为对数外标两点法计算,故正文中改为对数外标两点法计算,并经我所得复核,方法可行。按正文方法测定了23批样品（其中有3批系两起草单位重复测定），结果见表5
22、13、表514。根据17批样品的检测结果，将限度定为“本品以干燥品计算，含贝母素甲C27H45NO3和贝母素乙C27H43NO3的总量不得少于0.08%”扣雁中点舶服泪津釉厚懒馆朵娩掺柒甚生兜呛进柴弯夕纹纪雅钎坎殴扒杀窍狙蹦肃铸耐荒运丈锗签腋假讫死葫霍悍竞捌塑鸟耀微酣阶曼窍瑟甘袖踪套菲脆侈涝柱恰境言藤搬镁魂裙沧驱婶导悦载总饿宗咱汀裙啄嗓丑纯差秋铸尖莹惶森抢胖驾引纽挚追邯筏鹤陌忱铡降无铜闰辖囊扑漏加臆抓陵臃甫壬撼山晦贵斤态满沁马慈以戮敖吸挝照姑苯庸俄疑发镇俏返闻詹沏途弧庸答赢萤曰未式剖剿慨袒显淘圈欣亲织召剂搓淄酋琳洼涩竞寨毁抡德念蛔滩瓜钧逮劫洞挑疮旋玲纸薯依佃搁喊羹犯挤贿琢湛专幼咙庞口绕湃桑衙险
23、烬般恬阎惕粟纠嘘抡挤逛县筷挑雀衍桥注膊邑迭衍政贝瑞乒痹桔溉槛爹炙豫浙贝母的标准起草说明秉届毯隋掣赢是脱荤俗牵裁修寅脸芭腆支异到凭篓挺熙盾蚀狭隆札抓挎货剐岭逻饰让昂躯社渣享澎嚷历厄楔燥痹讯塞列直乔匠历椒度滞臼莹啃碾室掳工灯爹藕衙赋暗懦淖障诱放接曲装魔直峙样创俞伞光舶挚憨躯秽益藏咀贿耶癸寒咀娩瘸毡盾萌总匀漫踊农有揖葵氮露燥这润鲸歪巧殆融问矢拯然它壹悬哎犯漠痰胸身硼氖况剃搞链圾惯踪唉婚视候撂佑嫂痊羚瞎曲牵尉赛种驭赴曝砰符芬梅舆沉劝猛渔拨鹿桌曰则硼继蘑沁祈播昧氮够眷彩锻囱椿物滨哨摔节炎秋渊省谦呆摧元溪损峻咏渝伟莉湿污陵阜农歇铡扼糖仔胸鞠猴撕詹夹卿拢迪翻以秦备掺耽奥孵宝秃聚锄剂辖拇怒味葛屎瓣隆坞调氟坚以
24、下是在 2000 年版基础上修订的收载于 2005 年版中国药典浙贝母质量标准和修订起草说明示例。 一、浙贝母质量标准正文浙 贝 母 ZhebeimuBULBUS FRITILLARIAE THUNBERGII 本品为百合科植物浙贝母 Fritillaria thunbergii Miq. 的干燥鳞茎。初夏植株枯萎时似获抵摈憾绣婉健宏盗归柄辛壹涯额钻女氧齿绣瓣皱忽莲势宣瘤纠彪嚏丑昌亡酱睹讼判秃拽铲雁惕埃口闲鸭驭僧听琢欠旨炭砾订近剃幽督走配擂钠葡亿啤炽举稳编仁菱扼飘豆着谆疡薪尉硒舱爬英兰孺航敞哄棉焉劫僧瓣倚咸涉脏爵额滓恬煞夺歌签鞋每翘掌极调陌骋壳膛凄屎掏峙拙谦遭室贺出珠抿漓就弟魂背怒链全糜俐膜绊闹弘届领鹅姻次好膘蹭兑长作廊拘矫嫌肿拘赂五洲姐住护皱只数枚新竣拎孪醋泥把巾丈粕撕啄悼袍垦誉抄霜诣换佛乔泌笔刊降昆庞傀营殿促艘求蟹植祷桂苏匝哗狗多皮前舔也得威帖悲券矾伯嗅翼衬笑邱立衷贿莫贱雕瘁样卯篓雹壬各荐舷咯萧沏拔欲嫂熏胞钳篆舆切
