1、兽用猪链球菌2型ELISA抗体检测试剂盒说明书 【兽用名称】通用名：猪链球菌2型ELISA抗体检测试剂盒商品名：无英文名：ELISA Kit to Detect the Antibodies against Streptococcus suis type 2汉语拼音：Zhu Lianqiujun 2xing ELISA Kangtijiance Shijihe【主要成分与含量】(1) 抗原包被板2块（96孔/块）(2) 阴性对照血清1管（1ml/管）(3) 阳性对照血清1管（1ml/管）(4) 羊抗猪酶标二抗1瓶（20ml/瓶）(5) 脱脂奶粉1管（1g/管）(6) 稀释液A1瓶（50ml/瓶
2、）(7) 底物液A1 瓶（10ml/瓶）(8) 底物液B1 瓶（10ml/瓶）(9) 终止液1 瓶（10ml/瓶）(10) 20倍浓缩洗涤液1瓶（30ml/瓶）(11) 血清稀释板2块(12) 说明书1份【作用与用途】 适用于检测猪链球菌2型血清抗体。【用法与判定】 1 用法1.1 样品准备 取动物全血，待血液凝固后、4000r/min离心10分钟，收集上清。也可采集血液，待凝固后自然析出血清，要求血清清亮，无溶血。1.2 洗涤液配制 使用前，浓缩的洗涤液应恢复至室温（2025），并摇动使沉淀溶解（最好在37水浴锅中加热510分钟），然后用蒸馏水作20倍稀释（例如：每两块板用30ml的20倍浓
3、缩洗涤液加上570ml蒸馏水），混匀，稀释好的洗涤液在28可以存放7日。1.3 样品稀释液的配制 将1g脱脂奶粉溶于50ml稀释液A瓶中，作为待检血清和对照血清的稀释液。1.4 待检血清和对照稀释 将待检血清在血清稀释板中用样品稀释液按1:40的比例稀释（例如：195l样品稀释液中加5l待检血清或对照血清）。注意：阳性和阴性对照用样品稀释液按1:4稀释（例如：180l样品稀释液中加60l对照血清，吹打均匀）。1.5 操作步骤 1.5.1 取抗原包被板（根据样品多少，可拆开分次使用），先用稀释好的洗涤液洗板2次 ，再将稀释好的待检血清、阴性对照血清和阳性对照血清各取100l加入到抗原包被板孔中。
4、阴性对照和阳性对照各设2孔。轻轻振匀孔中样品（勿溢出），置37温育30分钟。1.5.2 甩掉板孔中的溶液，每孔加入稀释好的洗涤液200l，静置3分钟后倒掉，并在吸水纸上拍干，共计洗涤5次。1.5.3 每孔加羊抗猪酶标二抗100l，置37温育30分钟。1.5.4 甩掉板孔中的溶液，洗涤方法同1.5.2，共计洗涤5次。1.5.5 每个反应孔先加底物液A一滴（50l）、再加底物液B一滴（50l），混匀，室温（1825）避光显色10分钟。1.5.6 待显色完成后每个反应孔加终止液一滴（50l），10分钟内测定结果。2 判定：在酶标仪上测各孔OD630nm值，试验成立的条件是阳性对照孔OD630nm值均
5、应0.8；阴性对照孔OD630nm值均应0.3。如果样品OD630nm值0.35，判为阳性；如果样品OD630nm值0.35，则判为阴性。【注意事项】 （1） 试剂盒使用前各试剂应平衡至室温，使用后放回28。（2） 不同批号试剂盒的试剂组分不得混用，使用试剂时应防止试剂污染。（3） 底物液B不要暴露于强光和避免接触氧化剂。.（4） 未使用的抗原包被板封口膜切记不要撕开。（5） 待检血清样品数量较多时，应先使用血清稀释板稀释完所有要检测血清，再将稀释好的血清转移到反应板，使反应时间一致。（6） 浓缩洗涤液用蒸馏水稀释，如果发现有结晶加热使其溶解后再使用。（7） 在操作过程中移液时，切忌将气泡加入抗原包被板孔中。（8） 严格按照操作说明书可以获得最好的结果。【贮藏与有效期】 28保存，有效期9个月。【规格】 192孔/盒。【批准文号】 兽药生字（2012）170048113【生产企业】 武汉科前动物生物制品有限责任公司地址：湖北省武汉市洪山区狮子山街1号 邮编：430070电话（传真）：027-87284425 网址：http:/仅供兽医诊断使用
