1、配制溶液的一般实验步骤 配制溶液步骤因配置的溶液不同而有所不同，现举两个例子：举例1：配置0.05mol/L，400mL NaOH溶液的步骤：要准确配置氢氧化钠的浓度，则要用容量瓶定容，实验室没有400毫升的容量瓶，则选用500毫升的容量瓶。1.计算需要氢氧化钠的质量： 0.5L*0.05mol/L*40.01=1.000克 2.称1.000克氢氧化钠于烧杯中，加少量水溶解，然后倒入500毫升容量瓶里，分3次洗烧杯，将溶液全部倒入容量瓶里，最后用水稀释至刻度线，摇匀，即，得到0.05mol/L的氢氧化钠溶液。如果不需要很准确的话，可以直接用量筒量400毫升，称的时候只要称0.8克就可以了。 举
2、例2：配置1.5mol/L的稀硫酸200mL步骤：第1步：计算：根据C1V1=C2V2，计算需要浓硫酸的体积； 第2步：量取，利用刻度吸管吸取需要浓硫酸的体积；第3步：稀释，将浓硫酸转移到小烧杯中，加少量水稀释；第4步：转移,待溶液温度降低后，将烧杯中的硫酸转移到200mL容量瓶中； 第5步：洗涤，洗涤小烧杯，和转移的时候用到的玻璃棒，至少三次，将洗涤的水一并转移到容量瓶中； 第6步：定容，加水定容到刻度线，在距离刻度线一厘米左右改用胶头滴管定容； 第7步：摇匀,将溶液摇匀,如果液面下降也不可再加水定容； 第8步：将配得的溶液转移至试剂瓶中，贴好标签； 举例3：配制500mL，0.1mol/L
3、碳酸钠溶液步骤及注意事项 所需的仪器：烧杯、容量瓶、玻璃棒、胶头滴管、分析天平、药匙、量筒步骤： 第一步：计算：所需碳酸钠的质量=0.5*0.1*106=5.3克； 第二步：称量：在天平上称量5.3克碳酸钠固体，并将它倒入小烧杯中； 第三步：溶解：在盛有碳酸钠固体的小烧杯中加入适量蒸馏水，用玻璃棒搅拌，使其溶解； 第四步：移液：将溶液沿玻璃棒注入500mL容量瓶中； 第五步：洗涤：用蒸馏水洗烧杯23次，并倒入容量瓶中； 第六步：定容：倒水至刻度线12cm处改用胶头滴管滴到与凹液面平直； 第七步：摇匀：盖好瓶塞，上下颠倒、摇匀； 第八步：装瓶、贴签； 误差分析： 固体药品的称量与液体药品的量取是
4、否准确； 把溶液向容量瓶中转移，溶液洒了； 未洗涤烧杯和玻璃棒； 用待配液润洗了容量瓶； 定容时水加多了或加少了； 定容时未平视刻度线。仰视、俯视对溶液浓度有何影响？ 俯视刻度线，实际加水量未到刻度线，使溶液的物质的量浓度增大； 仰视刻度线，实际加水量超过刻度线，使溶液的物质的量浓度减小。 市售盐酸密度1.19，质量分数36%38%以37%计算：步骤：1.计算：假若需要2mol/L的硫酸100mL，则需37%浓硫酸16.6mL； 计算过程如下：假设盐酸VmL：（0.1L*2mol/L*36.5g/mol）/37%=V/1.19V=16.59mL,考虑到量筒的精确度0.1mL，故取16.6mL即
5、可。2.量取：16.6mL浓硫酸； 3.溶解：把16.6mL浓硫酸倒入已经加入蒸馏水的小烧杯中，用玻璃棒不断搅拌。 4.转移：待溶液冷却后，将溶液沿玻璃棒倒入100毫升的容量瓶中。 5.洗涤：再用少量蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒2-3次，并将全部洗液移入容量瓶中。 6.定容：向容量瓶内加蒸馏水，当液面接近刻度线1-2厘米处时，改用滴管滴加蒸馏水到一面恰好与刻度线相切。 7.摇匀：塞上瓶塞，反复颠倒容量瓶数次，使瓶内的溶液均匀，此时可以把溶液倒入到试剂瓶中贴标签保存。完成配制过程 容量瓶的使用六忌： 1.忌用容量瓶进行溶解（体积不准确） 2.忌直接往容量瓶倒液（洒到外面） 3.忌加水超过刻度线（浓度偏
6、低） 4.忌读数仰视或俯视（仰视浓度偏低，俯视浓度偏高） 5.忌不洗涤玻璃棒和烧杯（浓度偏低） 6.忌标准液存放于容量瓶（容量瓶是量器，不是容器） 1 mol/L的氢氧化钠溶液250mL，完成下列步骤： 用天平称取氢氧化钠固体/克。 将称好的氢氧化钠固体放入烧杯中加少量蒸馏水将其溶解，待完全溶解后将溶液沿玻璃棒移入250mL的容量瓶中。 用少量蒸馏水冲洗23次，将冲洗液移入容量瓶中，在操作过程中不能损失点滴液体，否则会使溶液的浓度偏低。 向容量瓶内加水至刻度线12cm时，改用胶头滴管小心地加水至溶液凹液面与刻度线相切，若加水超过刻度线，会造成溶液浓度偏低应该重新配制。 最后盖好瓶盖，摇匀，将配
7、好的溶液移入试剂瓶中贴好标签。 常用贮液与溶液1mol/L亚精胺（Spermidine）： 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10mL。分装成小份贮存于-20。 1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10mL。分装成小份贮存于-20。 10mol/L乙酸胺（ammoniumacetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。 10mg/mL牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5mL水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖
8、好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20。 1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4mL水，分成小份贮存于-20，或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65mL的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。 8mol/L乙酸钾（potassiumacetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100mL。 1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100mL。 3mol/L乙酸钠（sodiumacetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90mL水中
9、，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到100mL。 0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。或称取186.1g的Na2EDTA2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。 1mol/L HEPES：将23.8gHEPES溶于约90mL的水中，用NaOH调pH（6.88.2），然后用水定容至100ml。 1mol/L HCl：加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。 25mg/ml IPGT：溶解250mg的IPGT（异丙基硫代-D-半乳糖苷）于10ml水中，分成小份贮存于-20。 1mol/LMgCl
10、2:溶解20.3g MgCl26H2O于足量的水中，定容到100mL。100mmol/L PMSF：溶解174mg的PMSF（苯甲基磺酰氟）于足量的异丙醇中，定容到10ml。分成小份并用铝箔将装液管包裹或贮存于-20。 20mg/mL蛋白酶K（proteinase K）：将200mg的蛋白酶L加入到9.5mL水中，轻轻摇动，直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20。 10mg/mL R-nase（无D-Nase）（D-NasefreeR-Nase）：溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1mL的10mmol/L的乙酸钠水溶液中（pH5.0）。溶解后于水浴中煮沸
11、15min，使DNA酶失活。用1mol/L的TrisHCl调pH至7.5，于-20贮存。（配制过程中要戴手套） 5mol/L氯化钠（NaCl）：溶解29.2g氯化钠于足量的水中，定容至100mL。 10N氢氧化钠（NaOH）：溶解400g氢氧化钠颗粒于约0.9L水的烧杯中（磁力搅拌器搅拌），氢氧化钠完全溶解后用水定容至1L。 10SDS（十二烷基硫酸钠）：称取100gSDS慢慢转移到约含0.9L的水的烧杯中，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定容至1L。 2mol/L山梨（糖）醇（Sorbitol）：溶解36.4g山梨（糖）醇于足量水中使终体积为100mL。 100三氯乙酸（TCA）：在装有500gTCA的试剂瓶中加入100mL水，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。（稀释液应在临用前配制） 2.5Xgal（5-溴-4-氯-3-吲哚-半乳糖苷）：溶解25mg的Xgal于1ml的二甲基甲酰胺（DMF），用铝箔包裹装液管，贮存于-20。 100Denhardt试剂（Denhardtsregent）成分及终浓度配制100mL溶液各成分用量2%聚蔗糖（Ficoll，400型） 2%聚乙烯吡咯烷酮（PVP-40） 2%BSA（组分V） 水2g 2g 2g 加水至总体积为100mL
