骨髓细胞化学染色.ppt

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资源描述

骨髓细胞化学染色,细胞化学染色是以细胞形态学为基础,利用化学反应原理,对细胞中的酶类、脂类、糖类及蛋白质等化学物质进行定性、定位或半定量分析的方法。用于血液系统疾病的诊断、鉴别诊断及疗效判断;用于白血病细胞类型的判断。,基本步骤,1.固定:目的是保持细胞固有结构和化学成份不变,分蒸汽固定和液体固定。2.显示:通过化学反应显示被测物质,有偶氮偶联法,联苯胺法,金属沉淀法等。3.复染:作为背景染色,使反应的细胞结构能更清楚显示出来。,原理机体多余的铁以铁蛋白及含铁血黄素的形式储存。这些铁与低铁氰化钾在酸性溶液中发生反应而呈蓝色。,铁染色,试剂,40g/l亚铁氰化钾溶液。4%盐酸(38%浓盐酸40ml,小心倒入340ml冷蒸馏水中,混匀)20g/l伊红溶液。甲醛溶液。,方法,取骨髓片2张,加固定液固定10min,水洗待干。将II缓缓滴入I内,混合后染液滴于骨髓涂片上,37C放置60分钟,流水冲洗数分钟流水冲洗,一张待干观察外铁,一张冲洗后用核固红复染1分钟,冲洗待干,观察细胞内铁。,结果观察,幼红细胞核染成鲜红色,胞浆呈淡黄色,铁粒呈蓝绿色。(1)细胞外铁:用低倍镜观察骨髓

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