细菌的分离、培养与鉴定,王欣欣,一、细菌的分离,1、从混杂微生物中获得单一菌株纯培养的方法称为分离。2、分离的目的在于从被检材料中、或者从污染的众多杂菌中分离出纯的病原菌。,1)病料采集,病料:疑似细菌性疾病的水产养殖动物以鱼为例,常见症状:体色发黑,体表溃烂、充血、粘液增多,鳃、鳍破损,内脏红肿,腹水,眼球凸出或浑浊,肛门红肿等等。活体病料应考虑病原在疾病发展过程中的部位(上述症状)病料死后应立即采集,越早越好,鱼的解剖结构:,2)无菌操作,无菌操作是指在环境中一切有生命活动的微生物的营养细胞及其芽孢或孢子都不存在的状态。微生物研究过程中,既要避免各种外界的微生物进入操作对象又要杜绝操作对象污染周围环境的操作技术。无菌操作是对微生物学工作者最基本的要求,必须经过严格训练才能形成无菌操作素养。不论何种情况下,头脑中都应该有这个概念。无菌操作贯穿于整个分离过程,例如:病料的采集、器材的准备、具体的操作。所用器械及物品均应事先灭菌备用,金属器具包装后高压灭菌或煮沸30min,玻璃器皿可高压灭菌也可干热灭菌,胶皮塞、培养基等则要高压灭菌。,3)细菌分离,工具:接种环(接种前后都要严