动物分子遗传育种学第2章-2.ppt

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第二讲基因组序列诠释,5.转录物组6.蛋白质组,问题细胞周期的不同时期个体发育不同阶段不同的器官和组织不同的外界环境下各种基因的表达与否、量的差异、表达部位如何,5.转录物组5.1Northern杂交杂交主要步骤:提取总RNA(不同组织、不同器官)变性电泳制备目的基因探针转移尼龙膜(放射性或化学标记法)杂交扫描或放射自显影依据杂交信号的强弱、有无判断基因的表达部位、表达量、表达时期等,5.2SAGESAGE(serialsanalysisofgeneexpression)基因表达系列分析1995Velculescu及其同事年创立,SAGE特点:进行转录物组研究,也就是转录水平的研究;通过快速和详细分析成千上万个EST来寻找出表达丰度不同的SAGE标签序列,从而接近完整地获得基因组的表达信息;SAGE区别于差异显示、消减杂交等其它技术的主要特点是可用于寻找那些较低丰度的转录物,最大限度地收集基因组的基因表达信息,这使之成为从总体上全面研究基因表达、构建基因表达图谱的首选策略;SAGE可用于在不同环境、不同生理状态及不同生长阶段的细胞和组织表达图谱构建,对不同状态下基因表达水平

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