1、第八章球菌,第一节 葡萄球菌属,葡萄球菌属是G+球菌，是化脓菌中最常见者，广泛分布于自然界，因其常堆聚成葡萄串状，故名。本属包括30多个种，其中金黄色葡萄球菌致病性强，分布广泛，可引起许多严重感染。表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌是人体正常菌群，前者偶尔能引起感染,一 生物学性状 (一) 形态与染色 金黄色葡萄球菌直径约0.8-1.0m，呈葡萄串状排列 ，在固体培养基上生长的细菌排列典型，于脓汁或液体培养基中，可见有单个、成对、四联体以及短链状排列。该菌无芽胞，无鞭毛，一般不形成荚膜，但在少数菌株的外层可见有荚膜样的粘液物质。G，在陈旧培养物中可变成G,葡萄球菌扫描电镜图,(二) 培养和生化反应 金
2、黄色葡萄球菌为需氧或兼性厌氧菌， 在普通培养基上生长良好，形成圆形、隆起、表面光滑、湿润、有光泽、不透明、边缘整齐的中等大小金黄色菌落。在血平板上可形成完全透明溶血环(溶血)。在液体培养基中呈混浊生长 该菌能分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖，产酸不产气。分解甘露醇产酸在鉴定致病性方面有一定意义,（三）抗原构造 1 葡萄球菌A蛋白（SPA) 是存在于90%以上的金黄色葡萄球菌细胞壁表面的一种蛋白质，为完全抗原，能与人及多种哺乳动物的IgG1、IgG2和IgG4分子的Fc段非特异性结合，而结合后的IgG分子的Fab段仍能与抗原特异性结合 利用这种结合原理建立的协同凝集试验已广泛应用于 临床诊断,2.多糖抗
3、原 磷壁酸与肽聚糖相连，具有抗 原性 从金黄色葡萄球菌引起的心内膜炎患者血清中用琼脂扩散试验可以检出抗磷壁酸抗体 此外，少数金黄色葡萄球菌菌株的荚膜亦具有抗原性,(四) 分类1 根据DNA相关性程度，葡萄球菌分32个种2 噬菌体分型 目前国际上将金黄色葡萄球菌分为4个噬菌体群、23个噬菌体型。噬菌体分型可用于流行病学调查3 根据色素和生化反应不同，分为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌3种,三种葡萄球菌的主要性状 性状 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌 菌落色素 金黄色 白色 白色或柠檬色 凝固酶 葡萄糖 甘露醇 溶血素 耐热核酸酶 A蛋白 磷壁酸类型 核糖醇型 甘油型 两者
4、兼有噬菌体分型 多数能 不能 不能致病性 强弱 无,（五）抵抗力 在不形成芽胞的细菌中金黄色葡萄球菌抵抗力最强 对干燥、热和化学消毒剂有一定的抵抗力601h或8030min才能将其杀死。在2%石炭酸中15min死亡。 耐盐，在含有10%-15% NaCl的培养基中仍能繁殖 对某些染料较敏感 如110-20万倍稀释的龙胆紫溶液能抑制其生长 易产生耐药菌性,二、致病性 金黄色葡萄球菌能产生多种外毒素以及胞外酶作为其致病物质，且毒性强，临床感染的机会多、症状严重，耐药菌株也多，已成为医院内感染的最常见的致病菌,(一) 致病物质 1.凝固酶 是一种能使含有抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的蛋白质 凝固酶的作
5、用类似凝血酶原，使液态的纤维蛋白原变成固态纤维蛋白，进而使血浆凝固,凝固酶的意义： 致病作用 抗吞噬和抵抗体液中杀菌物质 金黄色葡萄球菌的感染易于局限化和形成血栓亦与凝固酶有关 鉴别作用 是鉴定金黄色葡萄球菌有无致病性的重要指标,2.葡萄球菌溶素 致病萄萄球菌可以产生、等多种溶素，其中溶血毒素是金黄色葡萄球菌的重要致病物质，对白细胞、血小板、肝细胞、成纤维细胞、血管平滑肌细胞等均有毒害作用 溶血素为蛋白质，不耐热 。经甲醛处理可制成类毒素，用于金黄色葡萄球菌感染的预防和治疗,3.杀白细胞素 只损伤中性粒细胞和巨噬细胞，因这两类细胞表面具有特异性受体。该毒素由F (快) 和S (慢) 两种组分构
6、成。两者单独存在时无杀伤性，必须协同才有作用 抵抗宿主吞噬细胞，增强细菌的致病力 鉴于杀白细胞素具有强烈的杀白细胞活性，有可能用于白血病的治疗,4.肠毒素 引起葡萄球菌食物中毒的致病物质。肠毒素根据抗原性分为A、B、C1、C2、C3、D、E、F、G和H 9个血清型。肠毒素是蛋白质，溶于水,耐热10030min，食品中的毒素不因加工而灭活；对蛋白酶也有耐性，故在消化道中不被破坏 作用机理 可能是毒素吸收后直接刺激呕吐中枢所致,5.剥脱性毒素(表皮溶解毒素) 是蛋白质， 能裂解表皮的棘状颗粒层细胞，引起烫伤样皮肤综合征(SSSS)。该毒素分A、B两种类型。前者耐热 (100,20min)，由染色体
7、基因控制；后者不耐热，6030min 灭活，由质粒控制 作用:能裂解表皮的棘状颗粒层细胞使表皮和真皮脱离 ,6.中毒性休克综合征毒素(TSST-1) 成分是蛋白质,对胰酶有抵抗力,在pH4.5能被胃蛋白酶消化 TSST-1能引起机体发热、猩红热样皮疹、脱屑和休克等症状,致病物质 所致疾病血浆凝固酶 侵袭性疾病：皮肤局部化脓性炎症葡萄球菌溶素 各种器官的化脓性感染杀白细胞素 全身的感染和败血症 脓毒血症等肠毒素 食物中毒 假膜性肠炎表皮剥脱毒素 烫伤样皮肤综合征中毒性休克综合征毒素I 中毒性休克综合征,金黄色葡萄球菌的致病物质与所致疾病,(二) 所致疾病 有侵袭性和毒素性两种 1.侵袭性疾病 主
8、要引起化脓性感染,一般发生在皮肤组织，也可发生于深部组织，甚至波及全身 局部感染:疖子、痈、气管炎肺炎、中耳炎、脓胸等内脏器官感染 全身感染：败血症、脓毒血症等,2.毒素性疾病 食物中毒 机理：当含有蛋白、淀粉和奶油类食物被产生肠毒素的金黄色葡萄球菌污染后，在20以上经8-10h即可产生大量肠毒素。食入含该毒素的食品后患病 表现：经1-6h潜伏期，出现恶心、呕吐、腹泻等急性胃肠炎症状，严重者可虚脱或休克，一般1-2日内恢复, 假摸性性肠炎 当肠道菌发生菌群失调时，由于耐药性葡萄球菌大量繁殖，产生肠毒素，引起腹泻为主的临床症状。因肠粘膜被一层假膜所覆盖（该膜由炎性渗出物、肠粘膜坏死块和细菌组成）
9、故称假摸性性肠炎,烫伤样皮肤综合征（SSSS) 多见于婴幼儿和免疫功能低下的成人。开始皮肤有红斑，1-2d表皮起皱，继而出现含无菌清亮液体的大泡，轻微损伤可破溃，最后表皮脱落 如病人得不到及时治疗，可有20%病人死亡,毒素性休克综合征（TSS) 由产生TSST-1的金黄色葡萄球菌引起。病人表现为突然高热、呕吐、腹泻、弥漫性红疹、瘀斑或多形性皮疹，继有脱皮、低血压、粘膜病变 (口咽、阴道等)；严重的病人还出现心、肾衰竭，甚至休克 TSS过去常见于经期使用受污染或未经消毒月经塞的妇女，但现亦见于儿童和成人,(三) 免疫性 有一定天然免疫力，只有当受伤或免疫力低下时才感染 从同一病人可反复受金黄色葡
10、萄球菌感染来看，说明特异免疫性不强，难以防止再次感染,三、微生物学检查法 一般局部化脓性感染，如疖、痈等微生物学检查意义不大，但对全身性感染在确定病因或选择有效治疗药物上有一定价值,1 标本 根据病情可采取脓汁、血液、脑脊液、骨髓穿刺液、呕吐物、粪便或可疑食物等,2 直接涂片染色镜检 取脓汁、痰等涂片、革兰染色镜检，可见典型葡萄球菌，但不能区别致病性和非致病性葡萄球菌,3 分离培养与鉴定 涂片镜检标本 血平板 菌落 血浆凝固酶试验 甘露醇发酵试验 少数血浆凝固酶阴性葡萄球菌有时也能致病，故在最后判定时须结合临床表现,(四) 动物实验 主要对葡萄球菌肠毒素检查 采取呕吐物、粪便或剩余食物 分离培
11、养 接种肉汤培养基 取滤液给小猫腹腔注射，若4h后动物出现呕吐、腹泻及体温升高时说明可能有肠毒素。继续观察，动物常在1-2d内中毒死亡,初步诊断应符合以下特征： 镜检符合葡萄球菌的形态学特征 菌落色素为脂溶性金黄色，血平板上有完 全透明的溶血现象 甘露醇发酵阳性 血浆凝固酶阳性 耐热核酸酶检测阳性，肠毒素的鉴定，在 专业实验室进行,四、防治原则无特异性防治注意个人卫生，及时处理皮肤创伤加强食品加工或饮食服务工作的管理 避免医源性感染 选用敏感抗菌药物治疗对反复发作的顽固性疖疮，采用自身菌苗,第二节 链球菌属 链球菌属 细菌是化脓性球菌中另一大类常见细菌，为链状或个别成双排列的G+球菌，链球菌在
12、自然界中广泛分布。其中化脓性链球菌产生多种致病物质，引起各种化脓性炎症、毒素性疾病与链球菌感染后超敏反应。某些链球菌为正常菌群，引起条件性感染,一、生物学性状 （一）形态与染色 G+球形或卵圆形，呈链状排列 ，在液体培养基中易呈长链；在固体培养基链较短；化脓性链球菌不形成芽胞，无鞭毛， 但有菌毛 有的菌种幼龄期可形成透明质酸的荚膜,链 球 菌 扫 描 电 镜,（二）培养和生化反应 本菌为需氧或兼性厌氧菌， 营养要求较高，在加有血液、血清等成分的培养基中生长良好。在固体培养基表面生成细小、灰白色、表面光滑、有乳光的菌落；不同种类的链球菌可产生不同的溶血现象。 本菌能分解葡萄糖，不分解菊糖，不被胆
13、汁溶解。后两点可与肺炎链球菌鉴别,（三）抗原构造 链球菌抗原构造复杂，主要有3种1 蛋白质抗原或表面抗原:具有型的特异性 A群有M、T、R、S四种2 多糖抗原(C抗原):为群特异性抗原3 核蛋白抗原(P抗原):无特异性,(四)分类 1.根据溶血作用分类 甲()型溶血性链球菌:有草绿色溶血环 为条件致病菌 乙()型溶血性链球菌:呈完全透明溶血环 亦称溶血性链球菌,致病力强 丙型链球菌:无溶血环 ,无致病性,2.根据族特异性抗原分类 根据细胞壁多糖(C)抗原不同,将乙型溶血性链球菌分为A-H、K-T和U、V共20个群,引起人类疾病90% A群, B、C、D和G群偶见,表面蛋白抗原是化脓性链球菌细胞
14、壁的蛋白质抗原，位于C抗原外层。除M蛋白质抗原外，还有T、R和S表面蛋白抗原。M蛋白是化脓性链球菌一种重要毒力因子，具有抗吞噬作用。M蛋白有型特异性，A群根据M蛋白抗原性不同分约100个型。此外，应用分子模拟试验证明，M蛋白与心肌肌浆蛋白有共同抗原表位，故与风湿性心肌炎可能有关,（五）抵抗力 本菌抵抗力不强，加热6030min即被杀死。对一般消毒剂敏感,乙链对红霉素、青霉素、氯霉素、四环素、磺胺等均敏感,极少发现耐药菌株,二 致病性 （一）致病物质 链球菌具有较强的侵袭力（产生粘附素、和多种侵袭性的酶）和多种毒素 1 链球菌溶素 有溶解红细胞、破坏白细胞和血小板的作用。根据对氧的稳定性分为对氧
15、敏感的链球菌溶血素O（SLO）和对氧稳定的溶血素S (SLS),（1） SLO：绝大多数A族链球菌和许多C、G族菌株可产生。SLO为含有-SH基的蛋白质,对热及氧敏感，遇氧时-SH基被氧化成-S-S-基，暂时失去溶血能力，若加入还原剂如半胱氨酸等，又可恢复其溶血能力 抗O实验就是根据此原理设计的,SLO的作用 溶解红细胞、破坏中性粒细胞、对血小板、巨噬细胞、神经细胞有毒害作用，对心肌有急性毒害作用可引起心跳骤停 SLO有抗原性，其抗体即抗O抗体 (ASO)有中和SLO的活性，阻止其溶血作用,85%90%的患者于链球菌感染后23w到病愈后数月或一年内可查到SLO抗体，一般其效价在1：400以上，
16、可作为链球菌新近感染的指标或风湿热的辅助诊断,（2）SLS 多数A、C、G群及其他链球菌产生SLS，SLS是小分子糖肽，无抗原性，对热和酸敏感不易保存在血平半上的溶血环由此毒素产生因SLO对O2稳定,2 致热外毒素： 又称红疹毒素或猩红热毒，素此毒素的产生由噬菌体基因所控制。至少有A、 B 、C 3种血清型，具有抗原性 作用：引起发热反应 是毒素直接作用于下丘脑所致猩红热的红疹 可能是一种超敏反应 C型还能增加脑屏障对内毒素和细菌的通透性，可提高家兔对内毒素休克的敏感性10万倍,2 侵袭性酶 透明质酸酶（扩散因子）：能分解透明质酸，使细菌及其毒素易在组织中扩散 链激酶(SK)亦称溶纤维蛋白:能
17、使血液中溶纤维蛋白酶原转变为溶纤维蛋白酶，溶解血块或阻止血浆凝固，有利于细菌在组织中扩散 链道酶(SD)亦称链球菌DNA酶：该酶能分解脓汁中高度粘稠性的DNA；使脓汁稀薄，有利于细菌扩散, M蛋白 为A群链球菌细胞壁中的蛋白成分有近100种 作用:有抗吞噬和抵抗吞噬细胞内杀菌作用;与心肌和肾小球基底膜有共同抗原，引起超敏反应, F蛋白 是化脓性链球菌的粘附素, F蛋白位于细胞壁内,能与细胞壁表面的纤 维粘连蛋白结合,使细菌粘附到上皮细胞 表面,利于细菌在宿主体内繁殖和定居,（二）所致疾病 链球菌性疾病90%是由A群引起的，感染源为病人和带菌者。途径为飞末传播、伤口和经口所致疾病有化脓性、中毒性
18、和超敏反应三类,(1)化脓性炎症 可引起局部的痈、脓肿等；由于产生SD、SK等使脓汁稀薄，有利于细菌扩散，易引起蜂窝组织炎；细菌沿淋巴管和血管扩散易引起丹毒、淋巴管炎、淋巴结炎及败血症； 其他系统感染主要有扁桃体炎、咽炎、咽峡炎、鼻窦炎、肾盂肾炎及产褥热等,(2)猩红热 (属于中毒性疾病） 这是一种急性呼吸道传染病，由产生致热外毒素的化脓性链球菌所致。细菌经咽喉粘膜侵入机体，增殖并产生毒素引起高热、全身红疹等症状，病后获得较强的免疫力,(3)链球菌感染后超敏反应 风湿热和急性肾小球肾炎 在咽炎或脓皮病后均可发生，多见于儿童和青少年，由于链球菌M蛋白引发型和型超敏反应所致,D族链球菌 本菌包括粪
19、链球菌、牛链球菌和马链球菌。营养要求不高，可在普通培养基上生长。血液琼脂平板上呈甲型或乙型溶血 D族链球菌为正常菌群,偶而引起泌尿道感染、腹部化脓性感染、败血症和心内膜炎,身体虚弱和免疫功能低下者易感染,甲型溶血性链球菌 也称草绿色链球菌 常见的菌种有唾液链球菌、血链球菌、米勒氏链球菌、轻型链球菌和变形链球菌，是人类口腔、上呼吸道的正常菌群，具有条件致病性，引起下列两种疾病,1.龋齿 常由变形链球菌引起，该菌为厌氧菌，粘附于牙齿表面。能分解蔗糖产生高分子量、粘性大的不溶性葡聚糖。能把细菌粘附在牙齿表面形成菌斑。除变形链球菌外， 菌斑中细菌分解多种糖产酸，导致局部牙釉质脱钙形成龋齿,2.亚急性细菌性心内膜 当拨牙或摘除扁桃体时，寄居于口腔的甲型链球菌可乘机侵入血流，引起菌血症。若心瓣膜有损伤或先天性缺陷时,细菌可在损伤部位繁殖，引起炎症由此菌引起的亚急性心内膜炎占全部病例50%,
