1、支原体属和脲原体属,基 础 医 学 院病原生物学教研室,支原体(Mycoplasma),1.能在人工培养基中生长 2.能独立生活 3.最小原核细胞型微生物 4.无细胞壁 5.二分裂繁殖 6.多形态性,“油煎蛋样”菌落,分 类,柔膜体纲(Mollicutes) 支原体目(MycoPlasmatales) 下分3个科: 支原体科(MycoPlasmataceae); 2个属: 支原体(Mycoplasma) 脲原体(Ureaplasma) 无胆甾原体科(Acholeplasma-taceae), 生长时不需要外源性胆固醇; 螺原体科(Spiroplasmataceae), 生长至一定阶段呈螺形。,
2、人体分离: 20种, 其中8种是致病或条件致病菌: 肺炎支原体(M.pneumoniae,Mpn) 生殖支原体(M.geuitalium,Mg) 人型支原体(M.hominis,Mh) 发酵支原体(M.fermentants,Mf) 穿透支原体(M.penetrans,Mpe) 梨支原体(M.pirum,Mpi) 关节炎支原体(M.arthritidis,Mart) 解脲脲原体(U.urealyticum,Uu),支原体与细菌L型比较,肺炎支原体,形态与结构 大 小:可通过滤器,光镜下可观察细胞壁:无形 态:球形、球杆形、分枝丝状或念珠状等细胞膜: 三层:1.蛋白质 2.脂质(胆固醇较多) 3
3、.蛋白质染 色:姬姆萨染色法:淡紫色或蓝色核 酸:二种(DNA和 RNA),生长繁殖,繁殖方式: 二分裂方式 球体延伸、分节断裂、出芽、分枝繁殖周期:3小时营养要求:较高,含动物血清、酵母浸液酸 碱 度:pH7.880气体环境:5CO2或5CO2与95N2温度与时间:37,3d10d菌落特征: “油煎蛋”状菌落,表252支原体与脲原体的某些生物学特性,抗原构造,主要抗原成分: 1.蛋白质 P1蛋白抗原:表面抗原 致病:粘附 2.脂质中的糖脂 抗体:产生补体结合抗体 生长抑制抗体 代谢抑制抗体,抵抗力,理化因素:比细菌敏感(因无细胞壁)热:弱, 50经30min死亡 20可长期保存耐碱酸和有机溶
4、剂:较敏感(消毒剂、清洁剂)四环素族、红霉素、卡那霉素、氯霉素: 敏感 青霉素:不敏感,致病性,外源性感染上呼吸道感染:感冒、咽炎、气管炎支原体性肺炎 (Mycoplasmal pneumonia)(原发性非典型肺炎)(primary atypical pneumonia) 临床表现和胸部X线: 肺炎链球菌引起的典型肺炎不同 类似病毒性肺炎,世界各地,密集人群,儿童及青少年多见秋冬季发病率高,每隔35年出现一次流行飞沫传播潜伏期2W3W,感染起病缓慢临床主要症状:发热(约39)、头痛、持续性顽固咳嗽、胸痛等。病人带菌、排菌状态可持续6W8W肺外合并症(神经系统、消化系统及心脏等)发病率高,严重
5、者可致死致病性:粘附是先决条件 也和超敏反应有关(共同抗原),免疫性,抗体:多种(CF抗体、生长抑制抗体、 杀支原体抗体等) 呼吸道sIgA:有一定作用非特异冷凝集素: 1.和自身免疫有关 2.患者阳性率为50, 常用于辅助诊断。,微生物学检查法,病原分离特异核酸的检测血清学诊断抗原检测冷凝集试验,病原分离,标 本:咽拭子或痰液培养基:双相培养基(含马血清、酵母浸液) SP-4培养基(提高分离率3040)气体环境:510CO2温度与时间:37,l2W可疑菌落: 1.糖发酵 2.溶血性 3.血细胞吸附 4.特异抗血清生长抑制试验等,特异核酸的检测,(1)聚合酶链反应(PCR): 优点:特异性好
6、敏感性高 快速、简便 靶基因:16S RNA基因 P1蛋白基因 方法:套式PCR(nPCR) 复合PCR 限制性片段长度多态性分析(RFLP) 随机引物PCR(RAPD) (2)基因探针 根据碱基严格互补配对的特性 特异性强,敏感性不如PCR技术,血清学诊断,(1)补体结合试验(CFT): 双份抗体效价升高4倍以上诊断(2)间接血凝试验(IHA): 测抗体, 23周高峰(3)酶联免疫吸附试验(ELISA): 测IgM、IgG和IgA 敏感性高(4)间接免疫荧光试验: 检测IgM、IgG 特异性较强,抗原检测,方法1:间接法或直接法 抗体:荧光标记多克隆抗体或单克隆抗体 检测标本:呼吸道分泌物中
7、抗原 86%可阳性 方法2:双抗体夹心酶联免疫吸附试验 检测标本:呼吸道分泌物中抗原 可检出105 CFU /ml 方法3:酶联免疫吸附试验捕获法 抗体:抗P1单克隆抗体 检测标本:P1蛋白 可检出104CFU/ml 特异性强,3小时即可,冷凝集试验,辅助诊断非典型肺炎针对红细胞膜抗原冷凝集素属IgM 5d10d出现,2W3W高峰辅助诊断效价: 64128倍以上 双份效价升高4倍以上特异性和敏感性较低,防 冶,药物:四环素类(近年来耐药性增加) 大环内酯类:首选 (红霉素、克拉霉素、阿奇霉素) 喹诺酮类疫苗:减毒活疫苗 基因工程疫苗,其它支原体,寄生部位:鼻咽腔及泌尿生殖道粘膜属于正常菌群,引
8、起条件性感染口腔支原体:慢性呼吸道感染唾液支原体:齿槽溢脓生殖支原体:生殖道、呼吸道和关节腔的炎症, 流产、早产和新生儿肺炎发酵支原体:类风湿性关节炎 AIDS相关(分离率明显升高)人型支原体:渗出性咽炎、非淋菌性尿道炎 (nongonococcal urithritis,NGU), 卵巢脓肿、 产褥败血症,脲原体属 (Ureaplasma),从支原体分出的独立的新属 正常菌群:绝大多数 有致病性:解脲脲原体 (U.urealyticum,Uu) 1954年从NGU患者的病灶处分离 类似肺炎支原体 能水解尿素,生物学性状,形态:圆形或球杆状染色:革兰染色阴性温度和酸碱度: 37, pH 6.0
9、菌落:很小(15m60m,放大200倍), 称T株(Tiny colony strain)敏感性: 敏感: 四环素、氯霉素、庆大霉素、 卡那霉素、0.05% 醋酸铊、 125g/ml 5-碘-2脱氧尿苷 不敏感:青霉素生化特性:水解尿素产氨,致病性,存 在: 人和动物的口腔、呼吸道、 泌尿生殖道血清型: 解脲脲原体(Uu)有14个血清型传播途径: 性接触传播、母婴传播所致疾病 (STD) 泌尿生殖道感染: NGU 、盆腔感染、宫颈 炎、阴道炎、输卵管炎、慢性前列腺 炎、附睾炎、男女不孕症、反复流产、 早产、死胎 新生儿疾病:呼吸道病变、肺炎、脑膜炎,引起男性不孕的原因: Uu吸附于精子表面, 使其运动受阻, 并蔽盖了精子识别卵细胞的部位 Uu产生神经氨酸样物质, 干扰精子与卵细胞结合。 Uu与精子膜有共同抗原, 从而产生抗精子抗体,