大规模蛋白表达(Large-scaleproteinexpression)简介(INTRODUCTION)蛋白质是行使生物学功能的最重要的一类分子。利用包括生物化学和生物物理学,特别是结构生物学等手段对蛋白质的研究,需要大量的高纯度的蛋白。利用异源表达宿主来表达重组蛋白是目前最常用的一种方式。蛋白表达系统有很多种,比较常用的有原核表达系统(大肠杆菌)和真核表达系统(如酵母、昆虫细胞或者哺乳动物细胞)。不同的表达系统各有优缺点,而不同的蛋白对表达系统的要求也不同。这里仅介绍大肠杆菌表达系统。常用的大肠杆菌表达系统大多采用T7promoter,它可以结合Lacoperon和Araoperon的原件,对其控制的基因表达做调控。通常,目的蛋白的表达可以用过添加inducer(比如IPTG)来实现。更多关系表达载体的信息,请参见载体部分。材料(MATERIALS)试剂(REAGENTS)LB培养基抗生素(根据载体抗性而定)1MIPTG(plys细菌用0.7mM/L,其他BL21用0.2mM/L。如果发现不够