酚氯仿法提取DNA 主要步骤和原理酚氯仿法提取 DNA 主要步骤：1. 将动物组织放在 1.5ml 的离心管中，分别用 75%、50%酒精和纯水梯度脱酒精。每个梯度脱水时间为 5-10min2. 将组织放入研钵中，加入适量DNA 裂解液（ 300）l，研磨后再加入 300 lDNA裂解液冲洗研磨棒。3. 将研磨好的组织液用移液枪加到1.5ml 离心管，在管中加 10l蛋白酶 K，用封口带将离心管封口，放入摇床（ 56,5h）。4. 加入等体积的 Tris 饱和酚（ 500）l，摇匀（ 10min）。5. 离心： 12000R， 7min， 4。离心后分成上中下三层，上层为DNA ，中层为蛋白质，下层为有机质。6. 吸取上层液体加入新的离心管。7. 配制 Tris 饱和酚：氯仿：异戊醇 =25:24:1。8. 在含有上清液的离心管中加入Tris 饱和酚、氯仿和异戊醇混合液450，l摇匀 10min。9.离心： 12000R， 7min， 4。10.吸取上清
