1、第三章 药物的杂质检查,Contents,药物的杂质与限量,1,杂质的检查方法,2,一般杂质的检查方法,3,特殊杂质的检查方法,4,一、药物的杂质与纯度,第一节 药物的杂质与限量,杂质,任何影响药品纯度的物质均称为杂质。杂质无治疗作用、或影响药物的稳定性和疗效、甚至对人体健康有害。,药品纯度,指药物的纯洁程度，是反映药品质量的一项重要指标。主要由药品质量标准中的“检查”项下的杂质检查来控制。,注意,药物纯度的评价,应把药物的性状、理化常数、杂质检查、含量测定等作为一个有联系的整体来评价药物的纯度。,生产过程中引入,药物在合成过程中未反应的原料、中间体和副产物、所用的试剂、溶剂、还原剂 、金属器
2、皿、装置等。,贮藏过程中引入,外界条件的变化或微生物的作用可能发生的水解、氧化、异构化、晶型转化、聚合等变化而产生的有关杂质。,二、杂质的来源,示例：双氯非那胺的生产 原料残留：邻二氯苯 中间体分解：氯化铵,分解,NH4Cl,原料药生产中引入的杂质,示例 肾上腺素注射液 抗氧剂焦亚硫酸钠 稳定剂EDTA-2Na,肾上腺素磺酸,制剂生产中引入的杂质,肾上腺素,光学异构体 例. 肾上腺素左旋体的升压作用是右旋体的12 倍 盐酸普萘洛尔左旋异构体的- 受体阻断 作用比右旋体大60倍。,无效、低效异构体或晶型,几何异构体（顺式体，反式体）例. 维生素A全反式的生物活性最高,多晶型 晶型不同，理化常数、
3、溶解度、稳定性、体内吸收和疗效也不同。 例. 无味氯霉素有多晶现象，B晶型易被酯酶水解而吸收，为有效晶型，而A晶型则不易被酯酶水解，活性很低。,药物贮藏中引入的杂质,水解反应：吲哚美辛酰胺键,易发生水解反应的结构：酯、内酯、酰胺、 卤代烃、苷类等,易发生氧化反应的结构：醚、醛、酚羟基、 巯基、亚硝基、 双键等,氧化反应：利血平氧化产物无降压作用,卡比马唑的合成过程：,甲巯咪唑即是卡比马唑合成中的中间体，也是 贮存过程中的分解产物。,三、杂质的种类与分类,按来源分,一般杂质,在自然界中分布较广泛，在多种药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂质。如酸、碱、水分、氯化物、硫酸盐、重金属、砷盐等,特殊杂质
4、,在个别药物的生产和贮藏过程中引入的杂质。如阿司匹林中的游离水杨酸、甲硝唑中的2-甲基-5-硝基咪唑等。,有机杂质,残留溶剂,无机杂质,按化学类别和特性分类,合成中未反应完全的原料、中间体、副产物、降解产物等,生产中使用的有机溶剂,来源于生产过程，一般是已知的和确定的，直接影响药物的稳定性，反映生产工艺情况,四、杂质的限量,定义,药物中所含杂质的最大允许量。,计算,百分之几或百万分之几（ppm）,表示,样品管 标准管,注意事项：平行操作原则。,对照法,示例3-1 茶苯海明中氯化物的检查,已知：,求：L？,解：,示例3-2 谷氨酸钠中重金属的检查,已知：S1.0g C10g/ml L10106求
5、：V？,解：,示例3-3 肾上腺素中酮体的检查,解：,已知：,=435,A=0.05,求：L？,示例3-4 卡比马唑片中甲巯咪唑的检查,计算注意,单位一致稀释体积 ppm的表示方法,TLC法 杂质对照品法,解：,卡比马唑片规格：5mg,第二节 杂质的检查方法,一、杂质的研究规范,（一）有机杂质在药品质量标准中的项目名,肾上腺素中的“酮体”,利巴韦林中的“有关物质”,“杂质吸光度”,（二）杂质检查项目的确定,确定原则：针对性,原料药和制剂中的杂质 根据其生产工艺、起始原料情况确定检查项目 规定降解产物和毒性杂质的检查项目,新药：经研究和稳定性考察检出的，并在批量生产中 出现的杂质和降解产物。对在
6、合成、纯化和贮 存中实际存在的杂质和潜在的杂质进行研究， 包括无机杂质、有机杂质及残留溶剂。,单一对映体药物 其可能共存的其他对映体应作为杂质检查,消旋体药物 当已有其单一对映体药物的法定质量标准时， 应在该消旋体药物的质量标准中设旋光度检查 项目。,（三）杂质限度的确定,确定原则：合理性 在确保用药安全有效的前提下，应考虑：生产的可行性及批与批之间的正常波动及药品本身的稳定性,根据每日剂量来制订质控限度有机杂质的限度规定应包括：每一个已知杂质、未知 杂质及总杂质。仿制药品的杂质限度，应与已上市产品进行质量对比 研究。,原料药与制剂的杂质限度,a. 报告限度（reporting thresho
7、ld）：超出此限度的 杂质均应在检测报告中报告，并应报告具体的检 测数据。 b. 鉴定限度（identification threshold）：超出此限 度的杂质均应进行定性分析，确定其化学结构。,c. 质控限度（qualification threshold）：质量标准中一般允许的杂质限度，如制订的限度高于此限度，则应有充分的依据。,（四）杂质检查方法的选择与验证,用于杂质检查的分析方法要求专属、灵敏 。,专属性：根据原料药或制剂的生产工艺及储存条件，以中间体、立体异构体、粗品、重结晶母液、经加速破坏性试验后的样品作为测试品进行系统适用性研究，考察产品中各杂质峰及主成分峰相互间的分离度是否符
8、合要求。 采用HPLC法检查有机杂质时，常采用梯度洗脱。,检测限：要符合质量标准中对杂质限度的要求，最 低检测限不得大于该杂质的报告限度。,二、杂质的常用检查方法,与试剂产生颜色,与试剂产生沉淀,与试剂产生气体,（一）化学方法,显色反应检查法,杂质与试剂产生颜色,比色法,示例3-5 氯硝柳胺中5-氯水杨酸和2-氯-4-硝基苯胺的检查,氯硝柳胺,5-氯水杨酸,2-氯-4-硝基苯胺,5-氯水杨酸的检查,检查原理,2-氯-4-硝基苯胺的检查,氨基磺酸铵的作用：将剩余的亚硝酸分解除去,要求：1min内不得出现浑浊。,2. 沉淀反应检查法,杂质与试剂产生沉淀,比浊重量法测定杂质的量,示例3-6 盐酸肼屈
9、嗪中游离肼的检查,检查原理,3.滴定法,滴定剂只与杂质反应，以一定浓度的滴定溶液滴定药物的杂质，可以定量地测定杂质的含量。,检查原理,示例3-7 硫酸亚铁中高铁盐的检查,1. TLC 法,（1）杂质对照品法,（二）色谱方法,方法,适用于已知杂质并能制备杂质对照品的情况,示例3-8 枸橼酸乙胺嗪中N-甲基哌嗪的检查,判断结果供试品溶液如显与对照品相应的杂质斑点，其颜色与对照溶液品溶液主斑点比较，不得更深。,供试品溶液：枸橼酸乙胺嗪（50mg/ml）对照品溶液： N-甲基哌嗪对照品(50 g/ml),点样 展开 晾干薄层板检视斑点,（2）供试品溶液自身稀释对照法,适用于杂质的结构不能确定，或无杂质
10、对照品的情况。限于杂质斑点的颜色与主成分斑点颜色相同或相近的情况下使用。,结果判断供试品溶液所显杂质斑点与自身稀释对照溶液或系列自身稀释对照溶液所显主斑点比较，不得更深。,示例3-11 吡罗昔康中有关物质的检查,供试品溶液：20mg/ml,对照溶液：0.2mg/ml,结果判断：供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液所 显的主斑点比较，不得更深。,稀释,（3）杂质对照品法与供试品溶液自 身稀释对照 法并用,当药物中存在多个杂质时，其中已知杂质有对照品时，采用杂质对照品法检查；共存的未知杂质或没有对照品的杂质，可采用供试品溶液自身稀释对照法检查。,判断： 供试品溶液如显杂质斑点不得多于2个，其中在与对
11、照品溶液相同的位置上所显杂质斑点的颜色与对照品溶液主斑点比较，不得更深，另一杂质杂质的颜色与对照溶液主斑点比较，不得更深。,示例3-13 盐酸黄酮哌酯中有关物质的检查,供试品溶液： 20mg/ml对照溶液： 0.10 mg/ml对照品溶液：3-甲基黄酮-8-羧酸 0.10 mg/ml,稀释,（4）对照药物法,当无合适的杂质对照品，或者是供试品显示的杂质斑点颜色与主成分斑点颜色有差异，难以判断限量时，可用与供试品相同的药物作为对照品，此对照药物中所含待检杂质需符合限量要求，且稳定性好。,判断结果：供试品溶液主斑点的位置与颜色应与对照品溶液的主斑点一致，如显杂质斑点，其颜色不得深于对照品溶液对应的
12、杂质斑点，并不得有对照品溶液以外的杂质斑点；供试品溶液除主斑点外，不得显任何杂质斑点。,示例3-14 马来酸麦角新碱中有关物质的检查,供试品溶液 ：5mg/ml供试品溶液 ：0.2mg/ml,对照品溶液：马来酸麦角新碱对照品， 5mg/ml,限量要求：规定杂质斑点数和单一 杂质量、杂质总量,2. HPLC 法,（1）外标法测定供试品中某个杂质的含量,示例3-15卡托普利及其片剂中卡托普利二硫化物的检查,供试品溶液： 0.5mg/ml对照品溶液：卡托普利二硫化物对照品，5 g/ml,混合溶液： 卡托普利和卡托普利二硫化物对照品 0.1mg/ml和15 g/ml,适用性试验：用混合溶液 R卡托普利
13、和卡托普利二硫化物大于4.0,以峰面积计算其含量，原料药中的二硫化物不得超过1.0%，片剂中的不得超过卡托普利标示量的3.0%,（2）加校正因子的主成分自身对照法,消除杂质与主成分的响应因子可能不同所引起的测定误差,适用于已知杂质的控制。用杂质对照品测定f杂质，f杂质和相对保留时间直接载入各品种质量标准中，在常规检验时用相对保留时间定位，以f杂质校正该杂质的实测峰面积。,药物对照品的峰面积,杂质对照品的峰面积,方法,调节检测灵敏度：用对照溶液 主成分色谱峰的峰高约为满量程 的1025,供试品溶液的制备,对照溶液的制备,进样：供试品溶液 对照溶液,分析时间：主成分色谱峰保留 时间的2倍,判断：供试品溶液中各杂质的峰面积分别乘以相应的 校正因子后，与对照溶液中主成分的峰面积比 较。,Thank You !,
